O kit de clonagem Hieff Clone™ Universal II One Step é um kit de clonagem recém-atualizado.

O 2× Hieff Clone™ de 2ª geração cuidadosamente otimizado O Universal II Enzyme Premix combina a enzima recombinante e o tampão necessários para a reação recombinante com a adição de um intensificador recombinante exclusivo para melhorar significativamente a eficiência da clonagem recombinante.

O kit pode ser direcionado para clonar produtos de PCR para qualquer local de qualquer vetor, compatível com produtos de PCR não purificados, produtos de PCR recuperados diretamente, baixa concentração de produtos recuperados de borracha, este produto pode remontar o conteúdo de GC do braço homólogo de 30%-70% do fragmento de junta. O vetor foi completamente linearizado, e sequências homólogas da extremidade do vetor linearizado de 15-25 pb foram introduzidas na extremidade 5' dos primers de PCR positivo e reverso do fragmento inserido, de modo que as extremidades 5' e 3' dos produtos de PCR do fragmento inserido tivessem exatamente a mesma sequência correspondente às duas extremidades do vetor linearizado, respectivamente. Sob a ação da enzima recombinante, a reação recombinante do produto de PCR e do vetor linearizado pode ser concluída em apenas 5 min a 50℃. A taxa positiva de clonagem pode atingir mais de 95%.

Características

Simples: clone até seis fragmentos de DNA em uma única reação.

Flexível: as diretrizes de design permitem a montagem em qualquer vetor de sua escolha.

Eficiente: Eficiente para ligação de um a sete fragmentos.

Aplicações

Rápido Clonagem: permite que vários fragmentos de DNA sobrepostos sejam perfeitamente ligados em uma reação isotérmica de uma etapa, de 5 a 50 minutos.

Clonagem Dirigida; Mutagênese dirigida ao sítio.

Especificações

Componentes

Armazenar

Este produto deve ser armazenado a -25~-15℃ por 1 anos.

Figuras

Ffigura 1. Fragmentos únicos de baixa entrada de 10 ng foram conectados no estado receptivo de não ressuscitação do pequeno sistema de 6 μL. Os resultados mostraram que o 10923ES teve melhor desempenho do que os produtos concorrentes, com alta eficiência de conexão, mais colônias e uma taxa positiva de 100%. AB: Placa Clony. A razão molar de portador (10 kb) para fragmento de inserção (1 kb) foi de 1:2. C: Mapa de eletroforese identificado por PCR de fragmento de inserção, M: YEASEN 10505ES.

Figura 2. Seis fragmentos (comprimento total de 7,6 kb) foram clonados em um plasmídeo de 11,6 kb. Os resultados mostraram que 10923ES teve melhor desempenho do que produtos concorrentes, com mais colônias e taxa positiva de 100%. AB: Placa de colônia. A razão molar de transportador (11,6 kb) para fragmentos de inserção foi de 1:2. C: Análise de eletroforese do fragmento de inserção, M: YEASEN 10505ES. Entrada de plasmídeo：200 ng/20 μL, 50°C, 50 minutos.

Citações e referências relacionadas:

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