Descrição
Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix para qPCR representa uma iteração aprimorada do Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix para qPCR (gDNA Digester Plus). Ele foi projetado para atender às demandas de conduzir reações de transcrição reversa e remoção de genoma em um único tubo. Além disso, ele simplifica o processo de reação, reduz significativamente o tempo de reação e aumenta o rendimento do produto de transcrição reversa. O 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix abrange todos os reagentes essenciais para a reação de transcrição reversa. Durante a reação, você simplesmente precisa complementá-lo com o gDNA Remover Mix, RNA modelo e água para sintetizar eficientemente a fita inicial de cDNA enquanto elimina simultaneamente a contaminação do DNA genômico. Este produto é bem adequado para a transcrição reversa de modelos de RNA intrincados e se mostra altamente eficaz para transcrição reversa envolvendo quantidades escassas de modelos e genes de baixa cópia.
O produto de transcrição reversa gerado por este produto em particular é totalmente compatível com os métodos qPCR baseados em sonda e corante. Para qPCR baseado em sonda, recomendamos usar o Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (Cat#11211), enquanto para qPCR baseado em corante, o Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184) é a escolha recomendada para análise de expressão gênica de alto desempenho.
No entanto, é importante observar que o produto de transcrição reversa produzido por este produto não é adequado para aplicações subsequentes, como a amplificação de fragmentos longos. Se você precisar de transcrição reversa eficiente para esses propósitos, recomendamos utilizar o Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (Cat#11149, Cat#11150).
Características
- 5 minutos de RT
-
RT integrado e digestão de gDNA em um tubo
Aplicações
- RT-qPCR
- Síntese de RNA antisense
Especificações
| Tipo de produto final | cDNA (primeira fita) |
| Método PCR | RT-PCR |
| Tipo de reagente | Transcrição reversa |
| Tipo de amostra | ARN |
| Temperatura de reação ótima | 37℃ |
| Transcriptase reversa | M-MLV |
Componentes
| Não. | Nome | 11151ES10 (10T) | 11151ES60 (100T) |
| 11151-A | 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 50 μL | 500 μL |
| 11151-B | Mistura removedora de gDNA | 10 μL | 100 μL |
| 11151-C | Água sem RNase | 1 mL | 2×1 mL |
Envio e armazenamento
O produto é enviado com gelo seco e pode ser armazenado a -15℃ ~ -25℃ por 12 meses.
Instruções de uso
Descongelamento os componentes 11151-A/B/C no gelo, agite suavemente e misture bem cada componente do reagente. Em seguida, monte o seguinte componentes dentro de um tubo livre de RNase:
| Componente | Volume (μL) |
| Livre de RNase Água | Para 20 μL |
| 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 5 μL |
| Mistura removedora de gDNA | 1 μL |
| RNA total | 10 pg -5 μg* |
| ou mRNA | 10 pg-500 ng* |
Tabela 1: Preparação da reação
*Sugerimos não exceder 2 μg como a quantidade total de entrada de RNA. Em caso de baixa abundância de expressão do gene alvo, a entrada total de RNA pode ser aumentada até um máximo de 5 μg.
| Temperatura | Tempo |
| 37℃ | 5 minutos* |
| 85℃ | 30 segundos |
Tabela 2: Protocolos de reação
*Este processo abrange tanto a transcrição reversa quanto a digestão do gDNA.
O produto de transcrição reversa é adequado para uso imediato em reações de qPCR ou pode ser armazenado a -20°C por um curto período. Para armazenamento prolongado, recomendamos aliquotar e armazená-lo a -80°C para evitar múltiplos ciclos de congelamento-degelo.
Precauções:
1. Todos os procedimentos devem ser realizados no gelo, com o máximo cuidado para evitar contaminação por RNase.
2. Garanta sua segurança e bem-estar usando um jaleco e luvas descartáveis.
3. Este produto se destina exclusivamente a fins de pesquisa científica e não deve ser usado de outra forma.
Pagamento e segurança
Suas informações de pagamento são processadas com segurança. Não armazenamos detalhes do cartão de crédito nem temos acesso às informações do seu cartão de crédito.
Investigação
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Perguntas frequentes
O produto é apenas para fins de pesquisa e não se destina ao uso terapêutico ou diagnóstico em humanos ou animais. Os produtos e o conteúdo são protegidos por patentes, marcas registradas e direitos autorais de propriedade da
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