Hifair^™ O Advanced One Step RT-qPCR Kit é um kit para quantificação de fluorescência com base no corante SYBR Green I. Usando primers específicos de gene, as reações de transcrição reversa e qPCR são concluídas em um tubo, eliminando a necessidade de operações repetidas de abertura de tampa e pipetagem, melhorando muito a eficiência do ensaio e reduzindo o risco de contaminação. Para amostras de RNA, o kit emprega Hifair resistente ao calor^™ V Transcriptase Reversa para síntese eficiente de cDNA e UNICON^™ HotStart Taq DNA Polymerase para amplificação quantitativa. Sob o sistema de tampão otimizado, a sensibilidade do kit pode ser tão alta quanto 0,1 pg para alvos altamente expressos e tão alta quanto 1 pg para alvos moderadamente expressos, e o kit também é adequado para amplificação e quantificação de amostras de DNA. O kit é adequado para amplificação e quantificação de amostras de DNA. Ele permite a detecção e quantificação sensíveis de ácidos nucleicos de diferentes amostras de plantas e animais, células e microrganismos.

Especificações

Componentes

Armazenar

Este produto deve ser armazenado a -25~-15℃ ausente de luz para 1 ano.

Instruções

1. Reação sistema configuração*****

* Os modelos Low Rox e os modelos sem correção Rox são preparados diretamente de acordo com o sistema de reação acima. Ao usar o modelo High Rox, adicione Hieff™ SP High Rox a 2 x Hifair™ Advanced SG Buffer a 1:250 v/v, misture bem e centrifugue. O 2× Hifair^™ O Advanced SG Buffer com Hieff™ SP High Rox não afeta o uso dos modelos de correção Low Rox e No Rox.

** A concentração final do primer foi de 0,2 μmol/L, que também pode ser ajustada entre 0,1 e 1 μmol/L, conforme apropriado.

*** O reagente é extremamente sensível, com RNA total na faixa de 1 pg-1 μg, e os testes de amostras humanas mostraram uma entrada ideal de 1 pg-100 ng, controlando um valor Ct geral na faixa de 15-30, conforme apropriado.

**** Recomenda-se usar 20 μL ou 50 μL para garantir a validade e a reprodutibilidade da amplificação do gene alvo.

***** Por favor, prepare na bancada ultralimpa e use pontas e tubos de reação sem resíduos de nuclease; pontas com cartuchos de filtro são recomendadas. Evite contaminação cruzada e contaminação por aerossol.

2）Programa de reação

*A temperatura de transcrição reversa pode ser selecionada entre 50-55°C de acordo com as necessidades experimentais. Para amostras de DNA, o processo de transcrição reversa pode ser omitido.

** Em casos especiais, a temperatura de recozimento/extensão pode ser ajustada de acordo com o valor Tm do primer, sendo recomendado 60°C.

3)Modelo aplicável

Modelos de instrumentos que não requerem calibração Rox:

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler2.0, Lightcycler 96;

Thermo Scientific: Ciclador PikoReal; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Modelos aplicáveis ​​Low Rox:

ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 e 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

Modelos aplicáveis ​​High Rox*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Rápido, StepOne, StepOne Plus.

* Para modelos High Rox, observe que Hieff™ SP High Rox deve ser adicionado proporcionalmente a 2 x Hifair^™ Tampão SG avançado antes de usar.

Notas

1. Este produto é somente para uso em pesquisa.
2. Por favor, opere com jalecos e luvas descartáveis, para sua segurança.

Documentos:

Ficha de dados de segurança

11175ES-A-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-B-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-C-MSDS-HB230927.PDF

Manuais