Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (No Rox) é uma pré-solução para amplificação quantitativa de PCR em tempo real 2×, apresentando alta intensidade de fluorescência, alta sensibilidade e especificidade e alto rendimento de amplificação. O componente principal, Hieff UNICON™ Taq DNA Polymerase, é iniciado a quente pelo método de anticorpo, que pode efetivamente inibir a amplificação não específica causada pelo recozimento do primer durante a preparação da amostra. Ao mesmo tempo, a fórmula adiciona fatores para aumentar a eficiência de amplificação da reação de PCR e facilitadores para equalizar a amplificação de genes com diferentes conteúdos de GC (30~70%), para que a PCR quantitativa possa obter uma boa relação linear em uma ampla gama de regiões quantitativas. O produto utiliza a reação de mudança de cor mista de diferentes corantes para monitorar a operação de pipetagem, o que reduz efetivamente a ocorrência de erros de pipetagem.

Características

Rastreamento de pipetagem: reduza o risco de erros de adição/perda

Excelente amplificação: boa linearidade em uma ampla faixa linear

Alta precisão: pode distinguir com precisão modelos com uma diferença de concentração de 2 vezes

Boa repetibilidade: pequena variabilidade entre poços em poços replicados, resultando em melhor repetibilidade

Estável e confiável: o sistema de reação pode ser armazenado em temperatura ambiente por 24 horas e o produto permanece inalterado após 20 ciclos de congelamento e descongelamento

Aplicações

Análise de Diferenças de Expressão Gênica

Análise quantitativa absoluta

Especificações

Componentes

Envio e armazenamento

Este produto deve ser armazenado a -25~-15℃ por 1 ano.

Figuras

Figura 1. Resultados confiáveis ​​podem ser obtidos dentro da faixa dinâmica.

Usando 2 µL de moldes de plasmídeo com um gradiente de 10^1-10^7, os genes relacionados foram amplificados. Hieff UNICON™ O master mix do ColorGPS pode detectar efetivamente uma faixa de quantidade de modelo de 7 ordens de magnitude, alcançando boa linearidade dentro de uma ampla faixa linear.

Figura2. Pode distinguir com precisão diferenças de concentração de modelo de 2 vezes.

Usando 2 µL de plasmídeo diluído em um gradiente de 2 vezes como molde, os genes relacionados foram amplificados. Hieff UNICON™ O master mix do ColorGPS pode resolver com precisão as diferenças de concentração do modelo.

Figura3. Pequena variabilidade entre poços é observada, mostrando melhor repetibilidade.

Usando dezenas de cópias do plasmídeo como molde, a amplificação foi realizada com diferentes reagentes quantitativos fluorescentes de acordo com os procedimentos especificados em seus respectivos manuais de instruções. Os valores de DP indicam que, comparado a outros reagentes de transcrição reversa, o novo produto tem diferenças menores entre poços replicados e melhor repetibilidade.

Figura4. Mais flexível, adequado para procedimentos padrão ou rápidos.

No procedimento padrão, o tempo de desnaturação e o tempo de extensão são definidos para 10 segundos e 30 segundos, respectivamente, enquanto no procedimento rápido, o tempo de desnaturação e o tempo de extensão são definidos para 3 segundos e 10 segundos, respectivamente, para detectar os valores de Ct correspondentes a 10 genes-alvo.Os resultados mostram que os valores de Ct obtidos com o novo produto tanto no procedimento padrão quanto no rápido apresentam forte correlação, e o novo produto pode alcançar bons resultados usando o procedimento rápido.

Figura5. Após o sistema de reação ser preparado, ele pode permanecer estável em temperatura ambiente por 24 horas.

Usando diferentes genes de camundongo, células 293 humanas e Arabidopsis thaliana como alvos, após preparar o sistema de reação, ele foi colocado no escuro em diferentes temperaturas por 24 horas antes da detecção. Comparado ao processamento imediato, a diferença de detecção para diferentes genes não excede 0,5 Ct, indicando que resultados estáveis ​​também podem ser obtidos com operações de longa duração.

Edocumentos:

Manuais

11188_Manual_Ver.EN20241218.pdf