Descrição
CRISPR/Cas9 é uma técnica na qual a nuclease Cas direcionada por RNA faz modificações específicas de DNA em genes alvos, que é um mecanismo de defesa imunológica adquirido desenvolvido por bactérias e arqueobactérias em resposta a ataques de fagos e plasmídeos estranhos. Neste sistema, a nuclease Cas9 é guiada com RNA guia único otimizado artificialmente (sgRNA) para cortar DNA fita dupla (dsDNA) no local alvo, causando quebras de DNA. O DNA é reparado com a junção de extremidade não homóloga ou mecanismo de reparo direcionado por homologia in vivo, resultando em mutação de mudança de quadro, substituição ou exclusão de genes.
O HifairTM Precision sgRNA Synthesis Kit usa uma mistura de RNA polimerase T7 para transcrever eficientemente spCas9 sgRNA. O kit contém uma sequência específica que é reconhecida pela proteína Cas9 e atua como um andaime. Uma parte da sequência pode ser parcialmente sobreposta com a sequência específica do alvo projetada pelo usuário. As fitas complementares são preenchidas pela DNA polimerase para gerar modelos de dsDNA para transcrição. Usando seu reagente fornecido e sequências de DNA específicas projetadas pelo usuário, o kit pode obter de 20 a 100 µg de sgRNA funcional em 4 horas em uma única reação em tubo.
Características
Alto rendimento de síntese:Em uma reação de tubo único ao longo de 4 horas, o rendimento de sgRNA pode atingir 20 - 100 μg.
Ampla gama de aplicações: Altos rendimentos podem ser obtidos para diferentes tipos de sgRNA.
Alta pureza:O sgRNA sintetizado possui uma única banda.
Alta atividade: O sgRNA sintetizado pode efetivamente guiar o Cas9 para clivar o DNA alvo.
Aplicações
Edição de genes CRISPR/Cas
Componentes
| Componentes No. | Nome | 11355ES05 | 11355ES25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
| 11355-A | Mistura de enzimas 10×sgRNA | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-B | Tampão de reação 10×sgRNA | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-C | 2×Mistura de enzimas Canace | 62,5 μL | 312.5 μL | 625 μL | 1,25 mL |
| 11355-D | Modelo de andaime | 6,25 μL | 31,25 μL | 62,5 μL | 125 μL |
| 11355-E | NTPs (25 mM cada) | 40 μL | 200 μL | 400 μL | 800 μL |
| 11355-F | Controle sgRNA Oligo (10 µM) | 2 μL | 10 μL | 20 μL | 40 μL |
Envio e armazenamento
Este produto deve ser armazenado a -25 ~ -15oC para 2 anos.
Figuras
Figura 1.A quantidade de síntese de sgRNA em diferentes pontos de tempo
Figura 2.O rendimento da síntese de sgRNA com diferentes sequências
Figura 3.A pureza do sgRNA sintetizado (determinada pelo Agilent 2100)
Figura 4.O gráfico de eficiência de clivagem do sgRNA
Documentos:
Ficha de dados de segurança
11355_FISPQ_Ver.EN20250120.pdf
Manuais
11355_Manual_Ver.PT20240710.pdf
Pagamento e segurança
Suas informações de pagamento são processadas com segurança. Não armazenamos detalhes do cartão de crédito nem temos acesso às informações do seu cartão de crédito.
Investigação
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Perguntas frequentes
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