Descrição
HifairTM Kit RT-qPCR Lyo Multiplex em uma etapa é um kit multiplex de PCR quantitativo baseado em RNA como molde. No processo do experimento, a transcrição reversa e a PCR quantitativa foram realizadas no mesmo tubo, o que simplificou a operação experimental e reduziu o risco de contaminação. O design exclusivo do tampão e da enzima garante que ele possa ser usado na preparação e no design do produto de sistemas de reação liofilizados RT-qPCR de uma etapa.
Neste kit, a primeira fita de cDNA foi sintetizada eficientemente pelo Hifair resistente ao calorTM V Transcriptase reversa e amplificada quantitativamente por UniconTM HotStart Taq DNA Polymerase. O kit contém principalmente otimizado liofilizável tampão, mistura de enzimas, etc. Além disso, são adicionados fatores que podem inibir efetivamente a amplificação de PCR não específica e melhorar a eficiência de amplificação de múltiplas reações de qPCR, o que pode garantir a eficiência de amplificação e realizar até múltiplas reações de amplificação.
Este kit é equipado com lioprotetor que pode ser usado para liofilização.
Especificações
| Início quente | Partida a quente integrada |
| Método de detecção | Detecção de sonda de primer |
| Método PCR | RT-qPCR em uma etapa |
| Tipo de amostra | ARN |
| Equipamento de aplicação | Equipamento com Rox：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Rápido, StepOne™, StepOne Plus™ Equipamento com Low Rox：ABI 7500, 7500 rápido, ViiA™7, QuantStudio™ 3 e 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex Estratógeno MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™ Equipamento sem Rox： Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Óptico® 2, Cromo4™ Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000 Roche Ciência Aplicada Ciclo de Luz® 480, Ciclo de Luz® 2.0, Ciclo de Luz® 96 Termo Científico Ciclista PikoReal; Cefeida Ciclista Inteligente®; Iluminar Eco qPCR |
Componentes
| Componentes No. | Nome | 11831ES60 (100T) | 11831ES80 (1.000T) | 11831ES92 (10.000T) |
| 11831-A | 4×HifairTM V Lyo-Tampão | 600 μL | 6 mL | 60 mL |
| 11831-B | HifairTM Mistura de Lyo-Enzima | 100 μL | 1 mL | 10 mL |
| 11831-C | Lioprotetor | 800 μL | 8 mL | 80 mL |
Armazenar
Parte 1:11831-A【4×Hifair V Lyo-Buffer】deve ser armazenado em -25℃ ~ -15℃ para 1 ano.
Parte 2: 11831-B【HifairTM Mistura de Lyo-Enzima】 deve ser armazenado em 2℃ ~ 8℃ para 6 meses.
11831-C【Lioprotetor】deve ser armazenado em -25℃ ~ -15℃ para 1 ano.
Figura
Desempenho de contas
PCR multiplexo
Consulta de produtos de contas
Instruções
- Reação Composição
| Componentes | Volume (μL) | Concentração Final |
| 4×HifairTM V Lyo-Tampão | 6 | 1× |
| HifairTM Mistura de Lyo-Enzima | 1 | - |
| Lioprotetor | 8 | - |
| Mistura de primer (10 μM) | 1 | 0,1-1 μM |
| Mistura de sonda (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Modelo de RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | para 25 | - |
Observação: certifique-se de misturar bem antes de usar, evite bolhas excessivas causadas por vibração violenta.
- Protocolo de Ciclismo Otimizado
|
| Estágio de reação | Temperatura | Tempo | Ciclo |
| 1 | Transcrição reversa | 50°Cum | 10 minutos | 1 |
| 2 | Desnaturação inicial | 95°C | 2 segundo | 1 |
| 3 | Reação de amplificação | 95°C |
| 45 ciclos |
| 60°Cb | 13 segundoc |
Notas
a) Transcrição reversa: A temperatura pode selecionar 42°C ou 50°C por 10-15 minutos.
b) Reação de amplificação: A temperatura é ajustada de acordo com o valor de Tm dos primers projetados.
c) Aquisição do sinal de fluorescência: Defina o procedimento experimental de acordo com os requisitos do manual do instrumento.
Pagamento e segurança
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Investigação
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Perguntas frequentes
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