Descrição
Hieff NGS® RNA Lib Prep 384 CDI Primer para Illumina é um kit de primer de linker dedicado para construção de biblioteca de RNA da plataforma de sequenciamento de alto rendimento Illumina, dividido em 2 conjuntos, cada conjunto contém o adaptador PE usado na biblioteca de sequenciamento de segunda geração e 8 de i5 Index Primer e 12 de i7 Index Primer. Um total de 16 de i5 Index Primers e 24 de i7 Index Primers estão disponíveis em 2 conjuntos que fazem 384 combinações diferentes de bibliotecas rotuladas com índice de extremidade dupla podem ser construídas. Todos os reagentes fornecidos no kit passam por rigoroso controle de qualidade e verificação funcional para maximizar a estabilidade e repetibilidade da construção da biblioteca.
Componentes
Não. | Nome | Volume |
12414ES02 | Adaptador PE | 320 μL |
RP 501-508 | 60 μL cada | |
RP 701-712 | 40 μL cada | |
12415ES02 | Adaptador PE | 320 μL |
RP 509-516 | 60 μL cada | |
RP 713-724 | 40 μL cada |
Envio e armazenamento
Todos os componentes são enviados secos gelo e pode ser armazenado a -15℃~ -25℃ por 18 meses.
Observação:
2) O adaptador PE fornecido com este kit é um adaptador curto de uso geral que requer amplificação de PCR para obter uma biblioteca completa. O Index Primer fornece etiquetas de sequência de código de barras para distinguir amostras durante sequenciamento de alto rendimento.
3) Cada conjunto deste kit contém 8 de i5 Index Primers (RP 5xx) e 12 de i7 Index Primers (RP 7xx), que podem ser combinados entre si para construir 96 combinações diferentes de bibliotecas rotuladas de Index de extremidade dupla. 2 conjuntos oferecem um total de 16 de i5 Index Primers e 24 de i7 Index Primers. Você pode usar o i5 Index Primer (ou i7 Index Primer) do Cat#12414 e o i7 Index Primer (ou i5 Index Primer) do Cat#12415 para construir até 384 combinações diferentes de bibliotecas rotuladas de Index de dupla extremidade.
4) Não aqueça o adaptador, deixe-o dissolver lentamente em temperatura ambiente, e a temperatura do laboratório é melhor definida para 20-25 °C. O adaptadores são necessários para evitar congelamento e descongelamento repetidos, e é recomendado armazená-lo em alíquotas e armazená-lo a 4°C por um curto período.
5) A estrutura da biblioteca de sequenciamento construída usando o kit Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer for Illumina® é a seguinte:

6) Para sua segurança e saúde, use jaleco e luvas descartáveis.
7) Este produto é apenas para fins de pesquisa científica!
Instruções
1. Uso de adaptadores: Diluir para uma concentração apropriada de acordo com a dosagem recomendada para diferentes quantidades de entrada no manual de construção da biblioteca utilizado.
2. Uso do Index Primer: Prepare o sistema de reação de acordo com o manual de construção da biblioteca em chinês, o sistema de amplificação da biblioteca (conforme mostrado na tabela abaixo), e o procedimento de reação é definido de acordo com o procedimento no manual de construção da biblioteca.
Nome | Volume (μL) |
2× Mistura de DNA PCR de alta fidelidade | 25 |
RP 5xx | 2,5 |
RP 7xx | 2,5 |
DNA ligado ao adaptador | 20 |
Etotal | 50 |
Informações de sequência
Adaptador PE para Illumina:
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCGATC*T-3´
Índice i5 Primer para Illumina:
5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[Índice i5]ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT -3´
Índice i7 Primer para Illumina:
5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT[Índice i7]GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCGATC-3´
[Índice i5]8 pb de i5 Sequência de índice,[Índice i7]8 pb de Sequência de índice i7.
O nome do índice correspondente a cada primer, a sequência do índice contida no primer e as informações da sequência do índice correspondente durante o sequenciamento são mostrados na tabela a seguir:
I5 EUíndice Nome | I5 EUíndice sequência | Informações de sequência de índice durante o sequenciamento | |
NovaSeq 6000 reagentes v1.0, MiSeq, HiSeq 2000/2500 | NovaSeq 6000 v1.5 reagentes, MiniSeq, PróximoSeq, | ||
RP501 | TATAGCCT | TATAGCCT | AGREGADOS |
RP502 | ATAGAGGC | ATAGAGGC | GCCTCAT |
RP503 | CCTATCCT | CCTATCCT | AGATAGG |
RP504 | GGCTCTGA | GGCTCTGA | TCAGAGCC |
RP505 | AGGCGAAG | AGGCGAAG | CTTCGCCT |
RP506 | TAATCTTA | TAATCTTA | TAAGATTA |
RP507 | CAGGACGT | CAGGACGT | ACGTCCTG |
RP508 | GTACTGAC | GTACTGAC | GTCAGTAC |
RP509 | GACCTGTA | GACCTGTA | TACAGGTC |
RP510 | ATGTAACT | ATGTAACT | AGTTACAT |
RP511 | GTTTCAGA | GTTTCAGA | TCTGAAAC |
RP512 | CACAGGAT | CACAGGAT | ATCCTGTG |
RP513 | TAGCTGCC | TAGCTGCC | GGCAGCTA |
RP514 | AGCGAATG | AGCGAATG | CATTCGCT |
RP515 | TATGCTGC | TATGCTGC | GCAGCATA |
RP516 | AGORAAGACTO | AGORAAGACTO | AGTCTTCT |
I7 EUíndice Nome | I7 EUíndice sequência | Informações de sequência de índice durante o sequenciamento |
RP701 | GANHAR | ATTACTCG |
RP702 | TCCCGGA | TCCGGAGA |
RP703 | AATGAGCG | CGCTCATT |
RP704 | GGAATCTC | GAGATTCC |
RP705 | TTCTGAAT | ATENÇÃO |
RP706 | ACGAATTC | GAATTCGT |
RP707 | AGCTTCAG | CTGAAGCT |
RP708 | GCGCATTA | TAATGCGC |
RP709 | CATAGCCG | CGGCTATG |
RP710 | TTCGCGGA | TCCGCGAA |
RP711 | GCGCGAGA | TCCGCGC |
RP712 | CTATCGCT | AGCGATAG |
RP713 | CCTACACG | CGTGTAGG |
RP714 | GTAGTGTC | GACACTAC |
RP715 | TGATGCA | TGCATACA |
RP716 | CCAGACTG | CAGTCTGG |
RP717 | AGGTGCCA | TGCACCT |
RP718 | TCACCTTG | CAAGGTGA |
RP719 | GTATCTTTT | AAAGATAC |
RP720 | CAGCTCCA | TGAGCTG |
RP721 | TCGCCTTA | TAAGGCGA |
RP722 | CTAGTACG | CGTACTAG |
RP723 | AGCGTAGC | GCTACGCT |
RP724 | GAGCCTCG | CGAGGTCTC - Associação de Agentes de Segurança |
Pagamento e segurança
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Investigação
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Perguntas frequentes
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