Hieff Ngs ™ RNA Lib Prep 384 CDI Primer para Illumina, Set 1 (96 Índice) -12414es

Sku: 12414ES02

Tamanho: 96 × 2t
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Descrição

Hieff NGS® RNA Lib Prep 384 CDI Primer para Illumina é um kit de primer de linker dedicado para construção de biblioteca de RNA da plataforma de sequenciamento de alto rendimento Illumina, dividido em 2 conjuntos, cada conjunto contém o adaptador PE usado na biblioteca de sequenciamento de segunda geração e 8 de i5 Index Primer e 12 de i7 Index Primer. Um total de 16 de i5 Index Primers e 24 de i7 Index Primers estão disponíveis em 2 conjuntos que fazem 384 combinações diferentes de bibliotecas rotuladas com índice de extremidade dupla podem ser construídas. Todos os reagentes fornecidos no kit passam por rigoroso controle de qualidade e verificação funcional para maximizar a estabilidade e repetibilidade da construção da biblioteca.

Componentes

Não.

Nome

Volume

12414ES02

Adaptador PE

320 μL

RP 501-508

60 μL cada

RP 701-712

40 μL cada

12415ES02

Adaptador PE

320 μL

RP 509-516

60 μL cada

RP 713-724

40 μL cada


Envio e armazenamento

Todos os componentes são enviados secos gelo e pode ser armazenado a -15℃~ -25℃ por 18 meses.

Observação:

1) A concentração do PE Adapter neste kit é de 15 μM, e a quantidade de adaptadores usados ​​para construção de biblioteca individual é ajustada de acordo com a quantidade recomendada do kit de construção de biblioteca. O Index Primer tem uma concentração de 10 μM.

2) O adaptador PE fornecido com este kit é um adaptador curto de uso geral que requer amplificação de PCR para obter uma biblioteca completa. O Index Primer fornece etiquetas de sequência de código de barras para distinguir amostras durante sequenciamento de alto rendimento.

3) Cada conjunto deste kit contém 8 de i5 Index Primers (RP 5xx) e 12 de i7 Index Primers (RP 7xx), que podem ser combinados entre si para construir 96 combinações diferentes de bibliotecas rotuladas de Index de extremidade dupla. 2 conjuntos oferecem um total de 16 de i5 Index Primers e 24 de i7 Index Primers. Você pode usar o i5 Index Primer (ou i7 Index Primer) do Cat#12414 e o i7 Index Primer (ou i5 Index Primer) do Cat#12415 para construir até 384 combinações diferentes de bibliotecas rotuladas de Index de dupla extremidade.

4) Não aqueça o adaptador, deixe-o dissolver lentamente em temperatura ambiente, e a temperatura do laboratório é melhor definida para 20-25 °C. O adaptadores são necessários para evitar congelamento e descongelamento repetidos, e é recomendado armazená-lo em alíquotas e armazená-lo a 4°C por um curto período.

5) A estrutura da biblioteca de sequenciamento construída usando o kit Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer for Illumina® é a seguinte:



6) Para sua segurança e saúde, use jaleco e luvas descartáveis.
7) Este produto é apenas para fins de pesquisa científica!

Instruções
1. Uso de adaptadores: Diluir para uma concentração apropriada de acordo com a dosagem recomendada para diferentes quantidades de entrada no manual de construção da biblioteca utilizado.
2. Uso do Index Primer: Prepare o sistema de reação de acordo com o manual de construção da biblioteca em chinês, o sistema de amplificação da biblioteca (conforme mostrado na tabela abaixo), e o procedimento de reação é definido de acordo com o procedimento no manual de construção da biblioteca.


Nome

Volume (μL)

2× Mistura de DNA PCR de alta fidelidade

25

RP 5xx

2,5

RP 7xx

2,5

DNA ligado ao adaptador

20

Etotal

50

Informações de sequência

Adaptador PE para Illumina:

5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´

5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCGATC*T-3´

Índice i5 Primer para Illumina:

5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[Índice i5]ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT -3´

Índice i7 Primer para Illumina:

5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT[Índice i7]GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCGATC-3´

[Índice i5]8 pb de i5 Sequência de índice,[Índice i7]8 pb de Sequência de índice i7.

O nome do índice correspondente a cada primer, a sequência do índice contida no primer e as informações da sequência do índice correspondente durante o sequenciamento são mostrados na tabela a seguir:

I5 EUíndice Nome

I5 EUíndice

sequência

Informações de sequência de índice durante o sequenciamento

NovaSeq 6000 reagentes v1.0, MiSeq, HiSeq 2000/2500

NovaSeq 6000 v1.5 reagentes

MiniSeq, PróximoSeq,
HiSeq 3000/4000

RP501

TATAGCCT

TATAGCCT

AGREGADOS

RP502

ATAGAGGC

ATAGAGGC

GCCTCAT

RP503

CCTATCCT

CCTATCCT

AGATAGG

RP504

GGCTCTGA

GGCTCTGA

TCAGAGCC

RP505

AGGCGAAG

AGGCGAAG

CTTCGCCT

RP506

TAATCTTA

TAATCTTA

TAAGATTA

RP507

CAGGACGT

CAGGACGT

ACGTCCTG

RP508

GTACTGAC

GTACTGAC

GTCAGTAC

RP509

GACCTGTA

GACCTGTA

TACAGGTC

RP510

ATGTAACT

ATGTAACT

AGTTACAT

RP511

GTTTCAGA

GTTTCAGA

TCTGAAAC

RP512

CACAGGAT

CACAGGAT

ATCCTGTG

RP513

TAGCTGCC

TAGCTGCC

GGCAGCTA

RP514

AGCGAATG

AGCGAATG

CATTCGCT

RP515

TATGCTGC

TATGCTGC

GCAGCATA

RP516

AGORAAGACTO

AGORAAGACTO

AGTCTTCT

I7 EUíndice Nome

I7 EUíndice sequência

Informações de sequência de índice durante o sequenciamento

RP701

GANHAR

ATTACTCG

RP702

TCCCGGA

TCCGGAGA

RP703

AATGAGCG

CGCTCATT

RP704

GGAATCTC

GAGATTCC

RP705

TTCTGAAT

ATENÇÃO

RP706

ACGAATTC

GAATTCGT

RP707

AGCTTCAG

CTGAAGCT

RP708

GCGCATTA

TAATGCGC

RP709

CATAGCCG

CGGCTATG

RP710

TTCGCGGA

TCCGCGAA

RP711

GCGCGAGA

TCCGCGC

RP712

CTATCGCT

AGCGATAG

RP713

CCTACACG

CGTGTAGG

RP714

GTAGTGTC

GACACTAC

RP715

TGATGCA

TGCATACA

RP716

CCAGACTG

CAGTCTGG

RP717

AGGTGCCA

TGCACCT

RP718

TCACCTTG

CAAGGTGA

RP719

GTATCTTTT

AAAGATAC

RP720

CAGCTCCA

TGAGCTG

RP721

TCGCCTTA

TAAGGCGA

RP722

CTAGTACG

CGTACTAG

RP723

AGCGTAGC

GCTACGCT

RP724

GAGCCTCG

CGAGGTCTC - Associação de Agentes de Segurança


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