Descrição
Nãoninguém-Tn5 é um recombinante Transposase Tn5 fundido com nanocorpoy que pode se ligar especificamente com anticorpos primários de duas espécies diferentes (camundongo e coelho).
Pproduto EUinformação
| Catálogo Não. | 12595ES01/12595ES02/12595ES03 |
| especificações | 10 μL/ 80 μL/ 100 μL |
Produto Componentee
| Componente Não. | Nome do componente | 12595ES01 | 12595ES02 | 12595ES03 |
| 12595-A | Anti-rato Tn5 | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
| 12595-B | Anti-coelho Tn5 | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
| 12595-C | Montar buffer | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
Envio e Sarmazenamento
Armazenado em -85° ～ -65℃ para um ano.
Figuras
H3K4me1:
H3K4me3
H3K9me3
H3K27ac
H3K27me3
H3K27me3
Controle: pA/G-Tn5 convencional, Cut&Tag Multi Cut&Tag: Nanobody Tn5
Instrução
Pegue uma biblioteca de sequenciamento de alto rendimento preparação por exemplo, certifique-se de ler atentamente as instruções antes de usar.
1. Adaptador preparação
1) Referência oligo nome e sequência da plataforma Illumina:
Oligo A-1：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATAAGGCTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Oligo A-2: 5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Oligo A-3：5'-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Oligo B：5'-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Oligo C：5'-fos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2) Dissolva o Oligo UM, Oligo Banda Oligo C a 200 μM.
3) Os seguintes sistemas de reação são formulados respectivamente:
| componente | Reação 1 |
| Oligo B （200 μM） | 10 μL |
| Oligo C （200 μM） | 10 μL |
| total | 20 μL |
| componente | Reação 2 |
| Oligo A-1 ou A-2 ou A-3（200 μM） | 10 μL |
| Oligo C （200 μM） | 10 μL |
| total | 20 μL |
4) Misture a reação 1 e 2 juntas, e centrifugue brevemente para trazer a solução de volta ao fundo do tubo. Coloque no instrumento de PCR, configure o seguinte programa e execute-o: tampa quente a 105°C,e depois aquecer em 94℃ por 2 min. Após o término do tempo, o procedimento de reação foi interrompido sem abrir a tampa quente.O tubo de PCR foi resfriado naturalmente no instrumento de PCR por 2 h e então colocado a 4℃ por 5 min.
5) Após a reação, misture volumes iguais de Ração 1 e Reação 2. Nomeado anúncio Adaptador Misture e armazene de – 25 a – 15℃.
2. para geração de transposon
1) Para configurar o seguinte sistema de reação:
| componente | volume (μL) |
| Anti-rato Tn5 ou Anti-coelho Tn5 | 10 |
| Mistura de adaptadores (50 μM) | 0.5 |
| Montar Buffer | 0,5 |
2) Condições de reação: use a pipeta para soprar suavemente e misturar bem. Executar o reação no 25℃ por 1 h (tampa quente desligada). Os produtos de reação pode ser aplicado diretamente à biblioteca preparação ou armazenado de -25 para -15℃.
Notas
1. A transposase é sensível à temperatura, por isso é recomendável completar a adaptador incorporando o mais rápido possível. O transposon gerado pode ser armazenado a -25~ -15℃, com um período de validade de 1 ano.
2. Este produto é usado apenas para fins de pesquisa científica.
3. Para sua segurança e saúde, use roupas de laboratório e luvas descartáveis.
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Investigação
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Perguntas frequentes
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