Descrição
A T4 Polynucleotide Kinase (T4 PNK) é uma 5'-hidroxil quinase que facilita a transferência do γ-fosfato do ATP para os terminais 5'-hidroxil de cadeias de oligo ou polinucleotídeos, incluindo DNA ou RNA de fita dupla e fita simples, bem como para nucleotídeos 3'-monofosfato. Essa transferência é reversível. A T4 PNK também possui atividade 3'-fosfatase, que desfosforila terminais de oligonucleotídeos 3'-fosforilados, nucleotídeos desoxi 3'-monofosfato e nucleotídeos desoxi 3'-difosfato. Na presença de ADP, a T4 PNK pode atuar como uma 5'-fosfatase, promovendo a troca de grupos 5'-fosfato em oligo ou polinucleotídeos 5'-fosforilados com ATP. Essa enzima é amplamente usada para a construção de bibliotecas de DNA e para marcação de extremidades para gerar sondas.
Aplicações
Fosforilação das extremidades 5' do DNA ou RNA para ligação subsequente
Marcação terminal de DNA ou RNA para servir como sondas e para fins de sequenciamento
Fosforilação 5' de mononucleotídeos com uma extremidade 3' fosforilada para preparar substratos pNp para fixação às extremidades 3' do DNA ou RNA
Rotulagem das extremidades 5' dos oligonucleotídeos que possuem um grupo fosfato 3'
Especificações
| Sfonte | Bacteriófago T4 |
| Peso molecular | 36,78 kDa |
| Concentração | 10 U/μL |
| Unidade edefinição | Uma unidade é definida como a quantidade necessária para catalisar a incorporação de 1 nmol de [γ-32P] ATP em uma reação em 30 minutos a 37°C. |
Componentes
| Componentes Não. | Nome | 12902ES76 | 12902ES86 | 12902ES92 |
| 12902-A | T4 polinucleotídeo quinase(10 U/μL) | 50 μL | 250 μL | 1 mL |
| 12902-B | Tampão PNK 10×T4 | 500 μL | 1 mL | 2×1 mL |
[Nota]: O tampão 10×T4 PNK não contém ATP; os clientes precisam adicioná-lo eles mesmos, com uma concentração final de referência de 1 mM, ou usar o tampão T4 DNA ligase.
Envio e armazenamento
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