Descrição
Exonuclease I, proveniente de uma molécula geneticamente modificada E. coli cepa que expressa o gene Exo I, exibe atividade de exonuclease que digere DNA fita simples da extremidade 3' para 5'. Ela libera sequencialmente desoxirribonucleotídeos 5'-monofosfatos, preservando a integridade dos dinucleotídeos terminais 5'. Esta enzima é predominantemente utilizada para a quebra e remoção de primers após amplificação por PCR. Ela permanece inativa em relação ao DNA fita dupla e fitas de DNA com extremidades hidroxila 3' que são bloqueadas por fosforilação ou acetilação.
Características
Nenhuma exonuclease residual (fita dupla), endonuclease ou RNase
Inativado simplesmente tratando-o a 80°C por 15 minutos
Aplicações
Remova os primers de fita simples do sistema de reação de PCR antes do sequenciamento de DNA Sanger ou da análise de SNP
Remover primers de fita simples do sistema de reação de PCR aninhado
Elimine o DNA linear de fita simples da amostra, deixando para trás o DNA de fita dupla
Especificações
| Sfonte | E. coli |
| Peso molecular | 55 KDum |
| Concentração | 20 U/μL |
| Unidade Edefinição | Uma unidade é definida como a quantidade de enzima necessária para catalisar a liberação de 10 nmol de nucleotídeos solúveis em ácido de [3H]-DNA de fita simples a uma concentração de 0,17 mg/ml em um recipiente de 50 μ.eu sistema de reação contendo tampão de reação 1X Exonuclease I a 37°C em 30 minutos |
Componentes
| Componentes Não. | Nome | 14535ES80 | 14535ES90 |
| 14535-A | Exonuclease EU (2(0 U/μL) | 250 μL | |
| 14535-B | 10×Exonuclease Eu tampão de reação | 1 mL | 1 mL |
Envio e armazenamento
Este produto deve ser armazenado a -25 ~ -15°C por 2 anos.
Figuras
Figura 1. Capacidade de digestão da exonuclease I em DNA fita simples
Nota: Em um sistema de reação de 20 μL, uma concentração final de 15 pmol/μL de substrato de DNA fita simples foi adicionada. Quantidades diferentes (0,63, 1,25, 2,5, 5, 10, 20 U) de Yeasen e da Exonuclease I do Fornecedor A foram usadas e incubadas a 37°C por 15 minutos, seguidas por inativação por calor a 80°C por 15 minutos. A eletroforese em gel de poliacrilamida foi empregada para detectar a degradação do DNA fita simples. Os resultados demonstraram que a Exonuclease I de Yeasen tem a mesma capacidade de digerir DNA fita simples que o Fornecedor A.
Documentos:
Ficha de dados de segurança
14535_FISPQ_Ver.EN20241210.pdf
Manuais
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Investigação
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Perguntas frequentes
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