RNase R (grau GMP, 20 u/μl) _ 14615es

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Descrição

Ribonuclease R (RNase R) de E. coli, é uma exoribonuclease 3′→5′ dependente de magnésio que pode digere todos os RNAs lineares, mas não digere estruturas de RNA lariat ou circular. A maioria dos RNAs celulares será digerida completamente pela RNase R, com exceção de tRNAs, RNA 5S e lariats de íntron. A RNase R é usada para enriquecimento de circRNAs em amostras biológicas, identificação de sequências de lariat intrônicas, identificação de circRNAs exônicos, estudo de splicing alternativo.

Características

Eficácia e qualidade garantidas com certificação ISO 13485.

Disponível em grandes quantidades ou em configurações personalizadas.

Decompõe efetivamente o RNA linear, preservando os laços de ligação e os RNAs circulares.

A digestão seletiva de RNAs lineares melhora o isolamento de RNAs circulares para produção de proteínas ou construção de biblioteca de cDNA intrônica.

Oferecendo RNAse R de grau GMP

Especificações

Fonte Um recombinante E. coli estirpe portadora do gene RNAse R de E. coli
Temperatura Ótima 37℃
Buffer de armazenamento 50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 0,1 mM de EDTA, 0,1% Triton® X-100, 1 mM de DTT, 50% glicerol, pH 7,5 em 25℃
Definição de unidade Uma unidade converte 1 μg de poli-r(A) em nucleotídeos solúveis em ácido em 10 minutos a 37°C em 20 mM Tris-HCl (pH 8,0), 100 mM KCl e 0,1 mM MgCl2.

Aplicativo

RNase R serve como um componente fundamental na síntese de RNA circular (circRNA). CircRNA promete melhorar a estabilidade farmacêutica e a bioestabilidade. Com suas estruturas covalentemente fechadas, circRNAs resistem a exonucleases de RNA. [1,2] RNase R encontra ampla aplicação em vários estudos, incluindo splicing alternativo, produção de cDNA de íntron e isolamento de intermediários de splicing e lariats.

Componentes

Componentes No.

Nome

14615ES25

14615ES72

14606ES80

14615

RNase R (grau GMP, 20 U/μL)

25 μL

250 μL

1 mL

Armazenar

Este produto deve ser armazenado entre -25 e -15℃ por 2 anos.

Instruções

Prepare o seguinte sistema de reação em um tubo de microcentrífuga estéril

componente

Volume

Tampão de reação 10×RNase R

2 μL

Amostra de RNA

1 micrograma

RNase R (20 U/μL)

2-4 você

ddH livre de RNase2O

Até 20 μL

Incube a 37 ℃ por 10 - 30 minutos.

Figuras

Figura 1: Moléculas de RNA linear podem ser digeridas pela Yeasen RNAse R.

Figura 2: CircRNA não pode ser digerido pela Yeasen RNAse R.

Notas

  1. A atividade da RNase R requer 0,1-1,0 mM Mg2+;
  2. Com o aumento do RNA, o tempo de reação pode ser estendido e a quantidade de enzima pode ser aumentada adequadamente;
  3. O conteúdo de EDTA em amostras de RNA pode afetar a atividade da RNase R.
  4. Incubar a 70 ℃ por 10 minutos pode inativar a enzima.

Referência

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y, et al. Vacinas circulares de RNA contra SARS-CoV-2 e variantes emergentes. Célula. 2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, et al. A caixa de ferramentas de bioinformática para descoberta e análise de circRNA. Breve Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

Manuais

Manual de RNAse R GMP-Grade

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Investigação

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