Descrição
T4 RNA Ligase 1, também conhecida como T4 RNA ligase, é uma enzima dependente de ATP que catalisa a formação de uma ligação fosfodiéster entre o terminal 5'-P e o terminal 3'-OH de RNA fita simples (ssRNA), DNA fita simples (ssDNA) ou moléculas de mononucleotídeo. T4 RNA Ligase 1 pode realizar a ligação entre moléculas de ssRNA (mais eficientemente), entre ssDNA e ssRNA (com menor eficiência) e também pode ser usada para ligação entre moléculas de ssDNA (com eficiência muito baixa). É adequada para a ligação de moléculas de ssRNA e para a fixação de adaptadores 5' na construção de biblioteca de miRNA para NGS.
Figura 1. Mecanismo de ação da T4 RNA Ligase 1
Características
Catalisa a formação de uma ligação fosfodiéster entre o terminal 5'-P e o terminal 3'-OH de RNA fita simples (ssRNA), DNA fita simples (ssDNA) ou moléculas de mononucleotídeos.
Aplicações
Clonagem de RNA
Adaptadores 5' na construção de biblioteca de miRNA para NGS
Preparação de RNA circular
Especificações
| Definição de unidade | Uma unidade é definida como a quantidade de enzima necessária para converter 1 nanomole de 5 -[32P] rA16 em uma forma resistente à fosfatase em 30 minutos a 37oC |
| Fonte | Proteína recombinante expressa por Escherichia coli é derivado do bacteriófago T4 |
| Condições de reação | 10×Tampão de reação T4 RL1: 500 mM Tris-HCl (pH 7,5 a 25oC), 100 mM MgCl2, 20 mM DTT; Incubação ótima a 37oC |
| Condições de inativação | Aquecimento a 65oC por 15 minutos ou ferver por 2 minutos pode inativar a T4 RNA Ligase 1. Alternativamente, adicionar uma concentração final de 50 mM de EDTA pH 8,0 pode encerrar a reação da T4 RNA Ligase 1 |
Componentes
| Componentes Não. | Nome | 14651ES80 | 14651ES90 |
| 14651-A | T4 RNA Ligase 1 (1(0 U/μL) | 500 μL | |
| 14651-B | 10×Tampão de reação T4 RL1 | 200 μL | 1 mL |
Envio e armazenamento
Este produto deve ser armazenado a -25 ~ -15oC por 2 anos.
Documentos:
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14651_FISPQ_Ver.EN20241209.pdf
Manuais
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Investigação
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