Descrição
PBCV DNA Ligase, também conhecida como SplintR ligase, PBCV-1 DNA Ligase ou Chlorella virus DNA Ligase, é uma DNA ligase dependente de ATP que catalisa eficientemente a reação de ligação de duas fitas de DNA adjacentes que são complementares a um RNA de fita simples. Nessas duas fitas de DNA adjacentes, a que fornece o grupo hidroxila 3' é chamada de fita de DNA aceitadora, enquanto a que fornece o grupo fosfato 5' é chamada de fita de DNA doadora. Durante esse processo de ligação, uma fita de RNA complementar atua como uma "tala" ou "andaime" para as duas fitas de DNA. A atividade da PBCV DNA Ligase é muito maior do que a da T4 DNA ligase tradicional e mostra uma forte afinidade por substratos de DNA com RNA como uma tala (Km aparente = 1 nM, onde um valor de Km menor indica uma afinidade mais forte). Ele pode detectar espécies únicas de RNA no nível subnanomolar em misturas complexas, tornando-o adequado para processos de enriquecimento de alvos em aplicações como detecção de RNA de alta sensibilidade, sequenciamento de última geração e diagnóstico molecular.
Características
Nenhuma nuclease, endonuclease, RNase ou fosfatase residual
Aplicações
Detecção de microRNAs e outros pequenos RNAs com base no método de sonda
Conectando DNA fita simples através de fixação por "clamp" por sequências complementares de RNA
Usando sondas de DNA para atingir a detecção de RNA específico
Detecção de SNP ou Splicing Alternativo
Análise RASL-seq
Especificações
| Fonte | O gene da DNA Ligase do PBCV-1 originário do vírus Chlorella expresso em E. coli |
| Peso molecular | 34 coroas suecas |
| Concentração | 25 U/µL |
| Unidade Definição | Uma unidade é definida como a quantidade de enzima necessária para atingir pelo menos 50% de conclusão da ligação de 2 pmol de substrato híbrido DNA:RNA marcado com FAM em 15 min a 25°C em 1×Tampão de ligase PBCV |
| Inativação Ccondições | 65°C, 20 mínimo |
Componentes
| Componente nº. | Nome | 14962ES80 | 14962ES90 |
| 14962-A | Ligase de DNA de PBCV (25 U/µL) | 50 µL | 200 µL |
| 14962-B | Tampão PBCV Ligase 10 x | 1 mL | 1 mL |
Envio e armazenamento
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Documentos:
Ficha de dados de segurança
14962_FISPQ_Ver.EN20241210.pdf
Manuais
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Investigação
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Perguntas frequentes
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