Descrição
HifairTM Pronto para Lyo EU Kit Multiplex One Step RT-qPCR（UDG mais) é um kit multiplex de PCR quantitativo baseado em RNA como molde. No processo do experimento, a transcrição reversa e a PCR quantitativa foram realizadas no mesmo tubo, o que simplificou a operação experimental e reduziu o risco de contaminação.O O design exclusivo do tampão e da enzima garante que ele pode ser usado na preparação e no design do produto de sistemas de reação liofilizados RT-qPCR de uma etapa.
Neste kit, a primeira fita de cDNA foi sintetizada eficientemente pelo Hifair resistente ao calorTM Transcriptase reversa e amplificada quantitativamente por UniconTM HotStart Taq DNA Polymerase. O kit contém principalmente otimizado eutampão iofilizável, mistura de enzimas, etc. Além disso, são adicionados fatores que podem inibir efetivamente a amplificação de PCR não específica e melhorar a eficiência de amplificação de múltiplas reações de qPCR, o que pode garantir a eficiência de amplificação e realizar até múltiplas reações de amplificação.
Este kit é equipado com euyoprotetor que pode ser usado para liofilização.
Especificações
| Componentes No. | 16645ES60 / 16645ES80 / 16645ES92 |
| Tamanho | 100 E / 1000 E / 10000 toneladas |
Componentes
| Nome | 16645ES60 (100T) | 16645ES80 (1.000T) | 16645ES92 (10.000T) | |
| 16645-UM | 4×HifairTM Lyo-Tampão | 600 μL | 6 mL | 60 mL |
| 16645-B | HifairTM Mistura de Lyo-Enzima | 100 μL | 1 mL | 10 mL |
| 16645-C | Lioprotetor | 800 μL | 8 mL | 80 mL |
Armazenar
O produto deve ser armazenado a -25℃ ~ -15℃ por 1 ano. Deve evitar congelamento e descongelamento repetidos.
Instruções
1. Composição da reação:
| Componentes | Volume (μL) | Concentração Final |
| 4×HifairTM Lyo-Tampão | 6 | 1× |
| HifairTM Mistura de Lyo-Enzima | 1 | - |
| Lioprotetor | 8 | - |
| Mistura de primer (10 μM) | 1 | |
| Mistura de sonda (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Modelo de RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | para 25 | - |
Observação：Misture bem antes de usar, evite bolhas excessivas causadas por vibração violenta.
2. Protocolo de Ciclismo Otimizado
(1) Procedimento de amplificação padrão
| Estágio de reação | Temperatura | Tempo | Ciclo | |
| 1 | Transcrição reversa | 50°Cum | 1 | |
| 2 | Desnaturação inicial | 95°C | 5 mínimo | 1 |
| 3 | Reação de amplificação | 95°C |
| 45 ciclos |
| 60°Cb | 30 segundoc |
(2) Programa de amplificação rápida
|
| Estágio de reação | Temperatura | Tempo | Ciclo |
| 1 | Transcrição reversa | 50°Cum | 2 mínimo | 1 |
| 2 | Desnaturação inicial | 95°C | 2 segundo | 1 |
| 3 | Reação de amplificação | 95°C |
| 45 ciclos |
| 60°Cb | 13 segundoc |
Observação:
a) Transcrição reversa: A temperatura pode selecionar 42°C ou 50°C por 10-15 minutos.
b) Reação de amplificação: A temperatura é ajustada de acordo com o valor de Tm dos primers projetados.
c) Aquisição do sinal de fluorescência: Defina o procedimento experimental de acordo com os requisitos do manual do instrumento.
3. Aplicativo equipamento
Equipamento com Rox：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Rápido, StepOne™, StepOne Plus™
Equipamento com Low Rox：ABI 7500, 7500 Rápido, ViiA™7, QuantStudio™ 3 e 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
Equipamento sem Rox：
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Ciência Aplicada LightCycler® 480, LightCycler® 2.0, Lightcycler® 96
Termo Ciclista científico PikoReal; Cefeida Ciclismo Inteligente®; Iluminar Eco qPCR
Notas
Use o EPI necessário, como jaleco e luvas, para garantir sua saúde e segurança!
Por favor, use consumíveis RNasefree para o experimento.
Este produto é para pesquisar usar somente！
Procedimento de liofilização
Este kit pode ser usado diretamente para liofilização, ou você pode explorar mais excipientes para diferentes primers com base nisso.O procedimento padrão de liofilização deste reagente é o seguinte:
| Processo | temperatura | definir hora | duração | Vácuo mbar |
| pré-liofilização | -45℃ | 10 minutos | 60 minutos | —— |
| Estágio inicial de liofilização | -45 ℃ | 10 minutos | 60 minutos | 0,01 mbar |
| -40 ℃ | 10 minutos | 900 minutos | 0,01 mbar | |
| -35 ℃ | 10 minutos | 60 minutos | 0,01 mbar | |
| -30 ℃ | 20 minutos | 60 minutos | 0,01 mbar | |
| -20 ℃ | 20 minutos | 60 minutos | 0,01 mbar | |
| 0 ℃ | 20 minutos | 60 minutos | 0.01 mbar | |
| teste de pressão acumulada | ||||
| Estágio de secagem analítica | 5 ℃ | 10 minutos | 20 minutos | 0,01 mbar |
| 10 ℃ | 10 minutos | 20 minutos | 0,01 mbar | |
| 15 ℃ | 10 minutos | 20 minutos | 0,01 mbar | |
| 20 ℃ | 10 minutos | 20 minutos | 0,01 mbar | |
| 25 ℃ | 10 minutos | 240 minutos | 0,01 mbar | |
| teste de pressão acumulada | ||||
Pagamento e segurança
Suas informações de pagamento são processadas com segurança. Não armazenamos detalhes do cartão de crédito nem temos acesso às informações do seu cartão de crédito.
Investigação
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Perguntas frequentes
O produto é apenas para fins de pesquisa e não se destina ao uso terapêutico ou diagnóstico em humanos ou animais. Os produtos e o conteúdo são protegidos por patentes, marcas registradas e direitos autorais de propriedade da
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