MolPuro^TM Kit magnético universal de DNA/RNA viral é adequado para extrair ácido nucleico viral de amostras de sangue total ou fluido corporal sem células (como soro, plasma, fluido cerebrospinal, swab nasal/faríngeo, fluido de lavagem alveolar, etc.). Este método adota tecnologia de purificação de esferas magnéticas, sem extração de clorofórmio fenol tóxico, seguro, não tóxico e rápido. Os produtos resultantes podem ser usados ​​diretamente para PCR, qPCR, sequenciamento de segunda geração e outros experimentos. Com o instrumento de extração automática do método de esferas magnéticas, a extração de alto rendimento de ácido nucleico pode ser realizada.

Produto Iinformação

Componentes

Babafado Versão

V pré-embaladoersão

Armazenar

Parte I: Armazenar em temperatura ambiente, transportar em temperatura ambiente, com prazo de validade de 1 ano.

Parte II: Para o componente 18521-G (Protease K), armazene a 2~8℃, transporte em temperatura ambiente.

Notas

1．Os vários tampões neste kit contêm sais de guanidínio. Para sua segurança e saúde, use um jaleco

e luvas descartáveis ​​durante a operação. Manuseie de acordo com as precauções de segurança padrão para evitar contato com a pele, olhos e membranas mucosas. Em caso de contato, lave imediatamente com água abundante e procure atendimento médico.

2．Caso ocorra precipitação na solução, esta deve ser aquecida em banho-maria a 30°C até que o precipitado seja

completamente dissolvido antes do uso.

3．Se a suspensão de esferas magnéticas estiver congelada, não a utilize.

4．Os vários tampões neste kit contêm sais de guanidínio. Não trate com desinfetantes oxidantes, como

como hipoclorito de sódio, pois pode liberar gases tóxicos. Eles devem ser manuseados como resíduos médicos.

5．Durante a eluição, pode haver esferas magnéticas residuais. Ao aspirar amostras, tente evitar inalar as

contas magnéticas.

Instruções

1. Tipos de espécimes aplicáveis: sangue total, soro, plasma, líquido cefalorraquidiano, swabs nasais/faríngeos,

fluido de lavagem broncoalveolar e outras amostras.

2. Armazenamento e transporte de amostras: As amostras podem ser usadas imediatamente para testes ou armazenadas a -70 °C ou

menor para testes futuros com prazo de validade de 6 meses. Evite congelamento e descongelamento repetidos. Os espécimes devem ser transportados usando logística de cadeia fria.

3. Requisitos de congelamento e descongelamento: Congelamento e descongelamento rápidos para evitar ciclos repetidos.

Etapas da operação

A solução foi verificada quanto à precipitação e se as esferas magnéticas poderiam ser ressuspensas antes dos experimentos.

Manual Extração

1. Transfira 200-300 μL da amostra para um tubo de centrífuga de 1,5 mL, adicione 600 μL de líquido de ligação de lise,

20μL de protease K e 20μL de suspensão de esferas magnéticas, depois misture no vórtice por 30 segundos em alta velocidade. Incube a 50°C com agitação por 5-7 minutos; se a incubadora não tiver uma função de agitação, misture no vórtice três vezes durante a incubação, cada uma por 15 segundos.

2. Transfira para um suporte magnético de 1,5 mL para separação magnética até que a solução fique límpida e transparente, depois aspire e descarte a solução.

3. Adicione 700 μL da solução de lavagem A, agite no vórtice por 10 segundos para dispersar as esferas magnéticas, depois transfira para o suporte magnético para separação magnética até que a solução fique límpida e aspire e descarte a solução.

4. Adicione 700 μL da solução de lavagem B, agite no vórtice por 10 segundos para dispersar as esferas magnéticas, depois transfira para o suporte magnético para separação magnética até que a solução fique límpida e aspire e descarte a solução.

5. Repita a etapa 4 com outros 700 μL de solução de lavagem B.

6. Centrifugue brevemente para coletar gotículas na parede do tubo, transfira para o suporte magnético até ficar claro, aspire e descarte o líquido residual. Seque ao ar por 3-5 minutos.

Nota: O resíduo de etanol pode inibir reações enzimáticas subsequentes, portanto, garanta que o etanol evapore completamente durante a secagem. Não seque por muito tempo para evitar afetar a eluição subsequente.

7. Adicione 50-100 μL de líquido de eluição, agite em vórtice em alta velocidade por 2-3 minutos para dispersar as esferas magnéticas. Incube a 60°C por 5 minutos, depois agite em vórtice em alta velocidade por 60 segundos.

8. Centrifugue brevemente para coletar as gotículas na tampa do tubo e colocá-las no tubo, transfira para o suporte magnético até que as esferas magnéticas estejam totalmente adsorvidas e, em seguida, transfira cuidadosamente o líquido para um novo tubo de centrífuga para obter a solução de ácido nucleico.

9. A solução de ácido nucleico pode ser armazenada a -20°C por curto prazo ou a -80°C por longo prazo.

Automatizado Extração

Yeasen Instrumento de extração e purificação automática de ácido nucleico AP-96N (para mais tipos de instrumentos, entre em contato com o suporte técnico)

1. Antes do experimento, pré-embalar o placa de furo profundo com oscilação de força várias vezes para evitar resíduos líquidos na membrana de vedação. A solução foi verificada quanto à precipitação e se as esferas magnéticas poderiam ser ressuspensas.

2. Coloque cada placa de 96 poços no instrumento de extração de ácido nucleico em ordem e coloque a manga da haste magnética de 96 furos profundos.

Posição 1: clivagem da placa de ligação

Posição 2: tábua de enxágue

Posição 3: lavagem + placa de esferas magnéticas

Posição 4: prato de lavagem

Posição 6: placa de eluição

3. Adicione 200-300 µL da amostra e 20 µL de protease K aos poços da placa de ligação de lise.

4. Execute o seguinte procedimento. Após o procedimento, transfira o eluato da placa de eluição para um novo tubo de centrífuga. A solução pode ser colocada em -20℃ para armazenamento de curto prazo e -80℃ para armazenamento de longo prazo.

Programa de instrumento de extração de ácido nucleico de canal AP-96N