Descrição
A fosforilação e desfosforilação de proteínas em células são interruptores regulatórios para muitas atividades biológicas importantes, como transdução de sinal, proliferação celular, diferenciação celular e apoptose. Portanto, controlar a ação das fosfatases é de importância fisiológica significativa na pesquisa de proteínas. Tecidos e células são preenchidos com um grande número de proenzimas, que são totalmente ativadas após a lise e começam a digerir proteínas circundantes. Portanto, proteger o estado de fosforilação de proteínas é extremamente crítico no estudo de vias de fosforilação de proteínas e transdução de sinal.
Este produto é uma mistura especial de múltiplos inibidores de fosfatase, que inibe amplamente fosfatases ácidas/alcalinas não específicas, bem como proteínas tirosina fosfatases específicas, proteínas serina/treonina fosfatases (PPA, PP2A), etc.
O produto é fornecido na forma de tubos A e B, e as duas soluções podem atingir diferentes tipos de fosfatases para exercer efeitos inibitórios sinérgicos.
O tubo A contém Cantharidina, Bromotetramisol e Microcistina-LR, fornecidos como uma solução pronta para uso em DMSO, inibindo a L-isozima da fosfatase alcalina e das proteínas fosfatases serina/treonina, como a proteína fosfatase 1 e 2A (PP1 e PP2A). O tubo B contém Ortovanadato de sódio, Molibdato de sódio, Tartarato de sódio, Imidazol e Fluoreto de sódio, fornecidos como uma solução pronta para uso em ddH2O, inibindo as proteínas fosfatases tirosina, fosfatases ácidas e fosfatases alcalinas.
Este produto pode ser usado para WB, Co-IP, ensaio pull-down, IF, IHC, pesquisa de quinase e várias outras análises.
Componentes
Componentes No. | Nome | 20109ES05 | 20109ES20 | 20109ES70 |
20109 | InStab ™ Coquetel Inibidor de Fosfatase (100×, Solução Estoque) | 1 mL | 10×1 mL | 100×1 mL |
Envio e armazenamento
O produto é enviado com bolsa de gelo e pode ser armazenado em -15~-25°C por 1 ano ou armazenado em 2~8°C por 2 meses.
Instruções
Antes de usar, retire o produto da geladeira e deixe-o aquecer até a temperatura ambiente. Adicione a solução A e a solução B à amostra na proporção de 1:100 (v/v) e misture bem após cada adição.
1. O solvente para o tubo A é DMSO, e para o tubo B é ddH2O. O DMSO dissolve-se mais lentamente, por isso demora mais tempo a dissolver completamente a solução A em comparação com a solução B. A temperaturas mais baixas, a solução A pode ser colocada num recipiente de 25°C banho-maria para dissolução.
2.Misturar as soluções A e B antes do uso pode facilmente formar precipitados, então esse método deve ser evitado. É recomendado adicionar quantidades apropriadas de solução A e solução B separadamente à amostra.
3. Este produto pode tolerar 1% SDS, Triton, NP-40.
Notas
1. É recomendado aliquotar e congelar a solução estoque 100× para evitar ciclos repetidos de congelamento-degelo. Soluções de trabalho devem ser preparadas frescas.
2. Este produto não contém inibidores de protease. Inibidores de protease apropriados podem ser adicionados à amostra a ser analisada de acordo com as necessidades experimentais.
3. O solvente para o tubo A é DMSO, manuseie com cuidado.
4. DTT, EDTA, EGTA, etc., podem afetar o ortovanadato de sódio contido neste produto, portanto, manuseie com cuidado.
5. Use o EPI necessário, como jaleco e luvas, para garantir sua saúde e segurança.!
6. Somente para uso em pesquisa!
Documentos:
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Manuais
Citações e referências:
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