Descrição
A PNGase F é uma amido-hidrolase que pode clivar oligossacarídeos complexos, híbridos e de alta manose ligados por asparagina, removendo especificamente glicanos ligados a N. No entanto, a reação enzimática convencional da PNGase F geralmente leva várias horas para liberar N-glicanos de anticorpos. Devido à liberação preferencial de glicanos, a desglicosilação incompleta pode resultar em resultados tendenciosos, com a distribuição de glicanos obtida falhando em representar a verdadeira composição de anticorpos terapêuticos. Portanto, obter rapidamente um perfil preciso de N-glicanos é crucial para o monitoramento da glicosilação durante a produção de anticorpos e proteínas de fusão de anticorpos usadas em bioterapêuticos.
Yeasen PNGase F rápido(Sem glicerol)é um reagente recombinante otimizado capaz de desglicosilar completa e rapidamente anticorpos, imunoglobulinas, proteínas de fusão e outras glicoproteínas em minutos. Esta enzima pode remover rápida e não seletivamente todos os N-glicanos, permitindo análise direta de cromatografia downstream ou espectrometria de massa. Yeasen Fast PNGase F(Sem glicerol) simplifica o procedimento experimental ao mesmo tempo em que reduz o tempo experimental sem comprometer a sensibilidade e a reprodutibilidade.
Recurso
Rápido—Desglicosilação completa e rápida em poucos minutos.
Alta pureza — Sem contaminação por protease ou glicosidase, pureza ≥95%.
Não seletivo—Remova rapidamente e sem preferência todos os N-glicanos.
Boa compatibilidade—Usado diretamente para análise de cromatografia downstream ou espectrometria MS.
Aplicativo
Sequenciamento de glicanos
Análise de glicoproteína
Expressão de glicoproteína recombinante
Especificação
sinônimo em inglês | PNGase F rápido(Sem glicerol) |
Fonte | Expressão recombinante de levedura |
Buffer de armazenamento | 20 mM Tris-HCl pH 7,5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA |
Componentes
Componentes No. | Nome | 20406ES20 | 20406ES50 |
20406-A | PNGase F rápido | 20 μL | 50 μL |
20406-B | PNGase F rápido Tampão(5×) | 80 μL | 200 μL |
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Figuras
| Figura 1. Dois- efeito de clivagem enzimática em etapas (substrato proteico) 1: Marcador de proteína (Cat#20350ES) 2: Concorrente + substrato 3: Concorrente + substrato 4: Yeasen Fast PNGase F + substrato 5: PNGase rápido de Yeasen + substrato F 6: Substrato 7: Yeasen Fast PNGase F 8: Concorrente
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| Figura 2. Dois- efeito de clivagem enzimática em etapas (anticorpo) 1: Marcador de proteína (Cat#20350ES) 2: Concorrente + anticorpo 3: Competidor + anticorpo 4: Anticorpo PNGase F + rápido de Yeasen 5: Anticorpo PNGase F + rápido de Yeasen 6: Anticorpo 7: Yeasen Fast PNGase F 8: Concorrente
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