A proteína natural A é uma proteína da superfície da parede celular encontrada no Staphylococcus aureus, é semelhante à proteína G isolada do gênero G ou C Estreptococo, liga-se maioria mamífero IgG por interagindo principalmente com o Fc região de imunoglobulina (Ig), mas diferem em sua especificidade de ligação. Pode ser usado para a separação e purificação de uma variedade de anticorpos (anticorpo monoclonal e anticorpo policlonal). A proteína A e a proteína G diferem em suas propriedades de ligação a diferentes subclasses de imunoglobulina (veja o Apêndice 1 para detalhes).
Este produto usa proteína A geneticamente modificada, que não só mantém suas propriedades de afinidade de Ig, mas também remove o domínio de ligação não principal da própria proteína natural para reduzir a ligação não específica. A Resina de Agarose SuRi rProtein A, que é um gel de agarose altamente reticulado como matriz e proteína A recombinante resistente a álcalis modificada como um ligante, tem alta estabilidade físico-química. Anticorpos de alta pureza podem ser obtidos de amostras de ascite, soro e meio de cultura por cromatografia de afinidade de uma etapa com este produto, que é conveniente de usar e amplamente utilizado.

Componentes

Especificações

Envio e Armazenar

Os produtos são enviados com bolsa de gelo.   Pode ser armazenado de forma estável a 2~8℃ por 5 anos.

Instruções

1. Preparação do tampão

Recomenda-se que o seguinte os tampões devem ser filtrados com uma membrana de filtro de 0,22 μm ou 0,45 μm antes do uso. Tampão de equilíbrio/ligação/lavagem: 0,15 M NaCl, 20 mM Na2 HPO4, pH 7,0

Tampão de eluição: 0,1 M glicina, pH 3,0

Tampão neutralizante: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. Preparação da amostra

Garantir que o amostra solução tem o apropriado iônico força e pH antes carregando o coluna, qualquer por diluindo a amostra de soro, ascite ou solução de cultura de células com um tampão de ligação/lavagem, ou por diálise da amostra com um tampão de ligação/lavagem.

3. Embalagem de coluna

Carregue o SuRi rProtein UM Resina de Agarose em uma coluna cromatográfica adequada, tomando cuidado para evitar bolhas.

4. Purificação de amostra

1) Balança: A coluna cromatográfica é equilibrado com um vinculativo Tampão de 5 vezes o coluna volume, então que a embalagem está no mesmo sistema de buffer que a proteína alvo e desempenha o papel de proteger a proteína.

2) Amostra carregando: O amostra era carregado para o bem equilibrado rProteína UM Agarose Resina para garantir completo contato entre a proteína alvo e a resina, melhora a recuperação taxa da proteína alvo e coletar o efluente para ser testado.

3) Lavagem: Lavar com 10-15 vezes o coluna volume do lavando Tampão, remover o impureza proteína a menos que especificamente adsorvido, colete a solução de lavagem.

4) Eluição: Eluição com 5-10 vezes coluna volume do eluição Tampão, coletar eluente, que é, o alvo proteína componente.

5) Limpeza CIP e preservação: Geralmente usar 0,1-0,5 M NaOH maior que 3CV, e o contato tempo é 15 mínimo; Então enxágue com solução de balanceamento 5CV até ficar neutro. Finalmente, é equilibrado com 20% etanol de 5 vezes a coluna volume, e então armazenado  em 20%  etanol  de o  mesmo  volume  no  4°C  para  evitar  o  embalagem  de  ser contaminado por bactérias.

5. Detecção de SDS-PAGE

O amostras obtido em o purificação processo (incluindo original amostras, efluente componentes, lavando e componentes de eluição, etc.) foram detectados por SDS-PAGE para determinar o efeito de purificação.

Notas

1. Não refrigerar o produto.
2. A resina de agarose rProteinAA deve ser totalmente revertida várias vezes antes do uso, para que a resina de agarose seja misturada uniformemente.
3. Durante todas as operações, a amostra precisa ser operada a 4°C ou no gelo.
4. Para sua segurança e saúde, use jalecos e luvas descartáveis ​​para a operação.
5. Somente para uso em pesquisa.

Tabela anexa 1: Resumo da capacidade de ligação deproteínas f A e G para Ig em diferentes espécies

SuRi rProteína Uma Agarose Resina