A expressão recombinante em Escherichia coli é um meio relativamente simples e econômico de produzir algumas proteínas e DNA plasmídico. Durante o processo de produção do produto usando Escherichia coli, há uma alta possibilidade de contaminação de proteínas de células hospedeiras (HCPs) de Escherichia coli, o que pode reduzir a eficácia de medicamentos terapêuticos e causar toxicidade adversa ou respostas imunológicas. Portanto, durante a produção e purificação de medicamentos terapêuticos para humanos ou animais, é necessário minimizar o conteúdo dessa impureza tanto quanto possível.

ELISA é um método simples, altamente sensível e objetivo para detectar HCPs. Este kit usa o princípio experimental do imunoensaio enzimático (ELISA) de sanduíche de anticorpo duplo para detectar a quantidade residual de E. coli HCP. Para detectar resíduos de E. coli HCP, adicione o padrão de E. coli HCP e a amostra a ser testada ao rótulo de enzima pré-revestido com placa de anticorpo anti-E. coli HCP (36712-A). Em seguida, adicione anticorpo de detecção de E. coli HCP marcado com biotina diluído (36712-C) e, finalmente, adicione Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36712-D) para formar o complexo anticorpo+antígeno+anticorpo ‐Biotina+ SA‐HRP. Após lavar a placa, adicione solução de revelação de cor TMB (36712-G) para revelar a cor. O TMB foi transformado de incolor para azul sob a catálise da enzima HRP e finalmente transformado em amarelo sob a ação da solução de parada (36712-H). A tonalidade de amarelo é positivamente correlacionada com a quantidade de E. coli HCP detectada na amostra. Este kit pode ser usado para otimizar o processo de purificação de produtos biológicos, controlar impurezas no processo intermediário e detectar a liberação de produtos finais.

Componentes