Fibronectina humana recombinante _ 40113es

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Descrição

Fibronectina (FN) é uma glicoproteína extracelular que existe na forma solúvel em fluidos corporais ou na forma insolúvel na matriz extracelular. Como uma das principais moléculas de adesão celular, a FN desempenha um papel fundamental em muitos processos fisiológicos importantes, como embriogênese, cicatrização de feridas, hemostasia e trombose. Alterações na expressão, degradação e combinação de fibronectina estão intimamente relacionadas a um grande número de ocorrências patológicas, incluindo câncer e fibrose.

Aplicações da fibronectina (FN):

1) Como uma matriz de cultura celular; sua função é promover o crescimento celular, aumentar a taxa de adesão celular, melhorar o nível do metabolismo celular, encurtar o tempo de crescimento celular; aumentar a taxa de fusão celular na tecnologia de hibridoma, etc.

2) Diagnóstico e tratamento de doenças; sua função é reparo e cicatrização de feridas, diagnóstico e tratamento de câncer, tratamento do sistema vascular e doenças cardiovasculares e cerebrovasculares, etc.

Este produto é uma fibronectina humana recombinante derivada de células de endosperma de arroz, existente em forma monomérica, e pode ser usada como uma matriz de cultura de células para substituir Matrigel, colágeno de cauda de rato, fibronectina derivada do sangue, etc., para aumentar a taxa de adesão celular, melhorar o nível de metabolismo celular e encurtar o ciclo de crescimento celular. Também pode ser adicionado diretamente ao meio de cultura para substituir ou reduzir a quantidade de soro usado, promover a adesão celular, migração, crescimento móvel e manter o status celular.

Este produto é um pó liofilizado, de qualidade para cultura de células, com características de pequenas diferenças entre lotes e sem risco potencial de infecção viral.

Produto Propriedades

Número CAS

86088-83-7

Fonte

Rgelo

Peso molecular

200~210 kDa

Aparência física

Pó branco liofilizado (liofilizado) filtrado estéril.

Pureza

> 95% por SDS-PAGE

pH

6,0~8,0

Atividade Biológica

O ED50 conforme determinado por um ensaio de adesão celI usando células de melanoma de camundongo B16-F1 é menor que 1,1 μg/mL, correspondendo a uma atividade específica de > 1,17 X 107 UI/mg.

Endotoxina

< 0.5 UE/μg

Envio e armazenamento

Este produto deve ser armazenado a -25~-15℃ por 3 anos.

Reconstituição

Dissolva a fibronectina humana recombinante (rFN) em 1×PBS para preparar uma solução de armazenamento com uma concentração de 1 mg/mL. Armazene a -20°C em alíquotas de acordo com doses de uso único para evitar congelamento e descongelamento repetidos. É eficaz por 3-6 meses.

Instruções de uso

1. Experimento de revestimento (tomando como exemplo uma placa de 6 poços, para outras placas de cultura, consulte a Tabela 1)

1.1 Retire uma quantidade apropriada de fibronectina humana recombinante (rFN) e dilua-a para a concentração da solução de trabalho com 1×PBS estéril, pH 7,2~7,4, e a faixa de referência de concentração final é 50~100 μg/mL. Após misturar, adicione-a à placa de 6 poços, 800 μL/poço, para garantir que a solução de trabalho cubra completamente o fundo da placa de 6 poços.

1.2 Coloque a placa de 6 poços com solução de trabalho rFN a 4 ℃ durante a noite ou 37 ℃ para revestimento por 1 h.

1.3 Colete a solução de trabalho na placa de 6 poços e armazene-a a 4 ℃. Ela pode ser usada para revestir outros frascos/placas de cultura dentro de uma semana.

1.4 Retire a placa de 6 poços revestida com rFN, adicione meio de cultura celular normal e inocule diretamente as células. O rFN promove a adesão e o crescimento celular.

1.5 Se a placa de 6 poços revestida não for usada por enquanto, armazene em recipiente fechado a 4℃. Recomenda-se usá-la dentro de uma semana.

Tabela 1. Quantidades recomendadas de adição de rFN para diferentes frascos/placas de cultura

Pratos/placas para cultura de células

Área inferior (cm2)

Dosagem recomendada

Placa de 96 poços

0,32

50μL/poço

Placa de 24 poços

2

200μL/poço

Placa de 12 poços

4.5

400μL/poço

Placa de 6 poços

9.6

800μL/poço

Prato de 35mm

8

600μL/poço

Prato de 60 mm

21

1.6mL/prato

Garrafa T-25

25-28

2 mL/ frasco

No experimento de revestimento/galvanização, a quantidade de solução de trabalho de fibronectina humana recombinante (rFN) adicionada deve ser ajustada de acordo com o tamanho da placa/frasco de cultura, conforme mostrado na Tabela 1 abaixo.

2. Experimento de cultura celular

Durante a cultura celular, adicionar rFN diretamente ao meio de cultura celular pode promover a adesão celular, migração e manter o status celular. A faixa de referência de concentração final é de 5~50 μg/mL.

Notas

1. Este produto é somente para uso em pesquisa.

2. Por favor, opere com jalecos e luvas descartáveispara sua segurança.

Cuidadoe

1. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

2. Para sua segurança e saúde, use jalecos e luvas descartáveis ​​durante a operação.

3. Somente para uso em pesquisa!

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Investigação

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