Hieff Trans™ Reagente de transfecção lipossomal Perguntas frequentes

(1) P: O soro pode estar presente ao preparar o complexo reagente de transfecção de ácido nucleico?

A: A presença de soro afetará a formação de lipossomas. É recomendado usar meio sem soro (geralmente meio MEM) ao preparar complexos de reagentes de transfecção de ácido nucleico.

(2) P: O reagente de transfecção pode ser congelado?

R: Não. Este reagente deve ser armazenado a 2-8 ℃, e deve-se tomar cuidado para evitar abrir a tampa repetidamente por um longo período, pois a abertura prolongada da tampa causará oxidação do lipossomo e afetará a eficiência da transfecção.

(3) P: O que devo prestar atenção ao usar o reagente de transfecção de ácido nucleico de lipossomo Hieff Trans™?

R: 1) Durante a operação de transfecção, é melhor que a confluência celular atinja 80%-95%, e a densidade específica de revestimento é determinada de acordo com a situação das células;

2) O uso de DNA de alta pureza ajuda a obter maior eficiência de transfecção;

3) Os reagentes de DNA e transfecção devem ser diluídos com meio isento de soro ao preparar complexos de transfecção;

4) Não podem ser adicionados antibióticos ao meio durante a transfecção;

5) A concentração de DNA e a quantidade de reagente lipossomal catiônico devem ser otimizadas para o primeiro uso para obter a máxima eficiência de transfecção. A proporção de DNA para reagente de transfecção é geralmente recomendado como 1:2-1:3.

(4) P: É necessário interromper a transfecção?

R: Não precisa. Os complexos de lipossomas são estáveis ​​por 6 horas. Se o meio celular não for trocado antes da transfecção, para garantir os nutrientes necessários para o crescimento normal das células, é necessário trocar para um novo meio após 4 a 6 horas. No entanto, se o meio tiver sido trocado antes da transfecção, não é necessário trocar o meio após a transfecção do lipossomo.

(5) P: O que devo prestar atenção se quiser melhorar a eficiência da transfecção?

R: a: A densidade de células no momento da transfecção é de 90%-95%.

b: Durante a transfecção, use meio MEM sem soro para diluições de ácidos nucleicos e lipossomas.

c: O meio pode ser trocado 4-6h após a transfecção.

(6) P: A co-transfecção de DNA e siRNA pode ser realizada? Como é o efeito?

A: A co-transfecção pode ser realizada, mas é recomendado realizar a transfecção separada, e a transfecção de DNA deve ser realizada 6 horas após o siRNA. Se operado em conjunto, a eficiência da transfecção de siRNA será pior.

(7) P: O reagente de transfecção pode ser usado para transfecção de embalagem lentiviral?

R: O empacotamento lentiviral é possível, mas a eficiência do empacotamento lentiviral não está necessariamente relacionada à eficiência da transfecção, mas também à seleção dos plasmídeos de empacotamento e à proporção entre os plasmídeos.

(8) P: O reagente de transfecção de ácido nucleico de lipossomo Hieff Trans™ pode ser usado para transfecção de células em suspensão?

A: Hieff Trans™ Liposome Nucleic Acid Transfection Reagent pode ser usado para transfecção de células em suspensão, veja o Protocolo para detalhes. Além disso, também lançamos um reagente de transfecção especificamente para células em suspensão (Cat No. 40805, Liposome nucleic acid transfection reagent for suspension cells).

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