(1) P: Qual é a diferença entre transfecção de DNA e transfecção de siRNA?

R: 1. Como existem apenas 20 pares de bases, o siRNA é muito menor que o DNA, com milhares ou até mais de 10.000 pares de bases.

2. Os reagentes e métodos de transfecção usados ​​para transfectar DNA não são adequados para transfecção de siRNA.

3. A transfecção de siRNA tem requisitos mais rigorosos quanto à citotoxicidade dos reagentes de transfecção do que a transfecção de DNA.

(2) P: O reagente de transfecção precisa ser trocado após a transfecção?

R: Para a mudança de meio, duas situações podem ser distinguidas:

1. Se não houver troca de meio antes da transfecção, o meio deve ser trocado cerca de 6 horas após a transfecção para garantir os nutrientes necessários para o crescimento celular;

2. Se houver uma alteração antes da transfecção O meio pode ser trocado normalmente quando o meio estiver com deficiência de nutrientes.

(3) P: Qual é a eficiência do reagente de transfecção PEI para transfectar siRNA e plasmídeo?

R: Este reagente de transfecção PEI é especialmente desenvolvido para siRNA, e a transfecção de plasmídeo não é recomendada.

(4) P: O reagente de transfecção pode ser congelado?

R: Não congele, porque o reagente de transfecção é um reagente de transfecção catiônico PEI. Congelar em baixa temperatura destruirá a atividade do reagente de transfecção PEI. Portanto, é melhor armazená-lo a 4 graus para manter a melhor eficiência de transfecção.

(5) P: Como melhorar a eficiência da transfecção?

A: a: Densidade de células no momento da transfecção, 30%-50%.

b: O meio sem soro Opti-MEM deve ser usado para diluição de siRNA e lipossomas durante a transfecção.

c: O meio pode ser trocado 4-6h após a transfecção.

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