Descrição
As neurotoxinas botulínicas e tetânicas (BoNTs e TeNT) são metaloproteases de zinco que hidrolisam e inativam proteínas necessárias para a neurotransmissão. O domínio da protease está localizado na cadeia leve da neurotoxina. Entre os substratos conhecidos de BoNTs e TeNT estão a proteína sinaptossomal-25 (SNAP25) e a proteína de membrana associada à vesícula (VAMP). Este substrato incorpora uma proteína fluorescente verde (GFPuv) e porções de SNAP25B e VAMP2 humanas que contêm os locais de clivagem de todos os BoNTs e TeNT conhecidos. As cadeias leves de BoNTs -A, -C e -E clivam a sequência SNAP25B, enquanto BoNTs -B, -D, -F, -G e TeNT clivam dentro da sequência VAMP2. O substrato pode ser usado em um ensaio de deslocamento de gel SDSPAGE para detectar clivagem pelas proteases de neurotoxina. Alternativamente, o substrato pode ser acoplado a microplacas ativadas por maleimida através do resíduo de cisteína C-terminal para gerar um formato de ensaio de alto rendimento. Um substrato e formato de ensaio semelhantes foram usados para rastrear inibidores dessas proteases de neurotoxina.
Produto Propriedades
Sinônimos | Proteína de Fluorescência Verde, GFP/SNAP25B/VAMP-2 |
Adesão | P42212 |
Identificação genética | 7011691 |
Fonte | Derivado de E. coli eGFP, com um Met N-terminal. |
Peso molecular | Aproximadamente 26.9 kDa. |
Sequência AA | MVSKGEELFT GVVPILVELD GDVNGHKFSV SGEGEGDATY GKLTLKFICT TGKLPVPWPT LVTTLTYGVQ CFSRYPDHMK QHDFFKSAMP EGYVQERTIF FKDDGNYKTR AEVKFEGDTL VNRIELKGID FKEDGNILGH KLEYNYNSHN VYIMADKQKN GIKVNFKIRH NIEDGSVQLA DHYQQNTPIG DGPVLLPDNH YLSTQSALSK DPNEKRDHMV LLEFVTAAGI TLGMDELYK |
Marcação | Nenhum |
Aparência física | Pó branco liofilizado (liofilizado) filtrado estéril. |
Pureza | > 95% por análises de SDS-PAGE e HPLC. |
Endotoxina | < 1,0 UE por 1μg de proteína pelo método LAL. |
Formulação | Liofilizado de uma solução concentrada filtrada de 0,2 μm em PBS, pH 7,4. |
Reconstituição | Recomendamos que este frasco seja centrifugado brevemente antes de ser aberto para levar o conteúdo ao fundo. Reconstitua em água destilada estéril ou tampão aquoso contendo 0,1% BSA para uma concentração de 0,1-1,0 mg/mL. As soluções de estoque devem ser divididas em alíquotas de trabalho e armazenadas a ≤ -20°C.Diluições adicionais devem ser feitas em soluções tamponadas apropriadas. |
Shippie e Sarmazenamento
Os produtos são enviados com bolsa de gelo e podem ser armazenados em -20℃ a -80℃ para 1 ano.
Recomenda-se dividir a proteína em quantidades menores quando usada pela primeira vez e evitar ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.
Cuidadoe
1. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.
2. Para sua segurança e saúde, use jalecos e luvas descartáveis durante a operação.
3. Somente para uso em pesquisa!
Pagamento e segurança
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Investigação
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Perguntas frequentes
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