Разработка лекарств требует животных моделей для проверки эффективности. С более чем 50 годами разработки и оптимизации, модель язвенного колита (ЯК) с декстрансульфатом натрия (ДСН), среди различных животных моделей, широко используется для изучения этиологии и патогенеза воспалительного заболевания кишечника (ВЗК).

Fig1. The development of the DSS ulcerative colitis model

Рисунок 1. Развитие модели язвенного колита DSS

1. Характеристики модели UC построенный ДСС

2. Преимущества модели DSS UC

3. Пример построения модели DSS UC

4. Критерии оценки успешности моделирования

5. Ссылки на этот ресурс

6. Успешный случай моделирования с помощью Yeasen DSS

7. Часто задаваемые вопросы

8. Заказ товара

9. Опубликованные статьи с нашими реагентами

10. С уважением к чтению

1. Характеристики модели UC построенный ДСС

Могут быть вызваны множественные острые или хронические симптомы ЯК, такие как: диарея, слизистый стул, скрытая кровь в кале, обильный кровавый стул, потеря веса, снижение активности и плохой цвет шерсти при различных дозах DSS.

Таблица 1 Гистологическая характеристика модели колита DSS

Категория модели колита DSS модель острого колита Модель хронического колита
Гистологические изменения Гиперемия толстой кишки, отек, укорочение, хрупкость, увеличение соотношения веса к длине Значительно укороченная толстая кишка
Язвы толстой кишки различной степени Утолщение слизистой оболочки, лимфаденопатия
Отек слизистой оболочки, потеря бокаловидных клеток, отек и разрушение крипт Потеря бокаловидных клеток, потеря крипт
Различная степень инфильтрации воспалительных клеток в слизистой оболочке и подслизистой основе, повреждение эпителиальных клеток Аденоматозные полипы и опухолеподобные изменения у небольшого числа животных

2. Преимущества модели DSS UC

👍 1. Протоколы легко реализовать.

👍 2. Модель ЯК DSS очень похожа на симптомы ЯК у человека с высокой повторяемостью.

👍 3. Различные характерные симптомы могут быть вызваны путем контроля вводимой дозы DSS, что было уникальным для модели DSS UC.

👍 4. Модель DSS UC может быть создана с использованием различных широко используемых модельных животных, таких как мыши, крысы, данио-рерио, свиньи, плодовые мушки и т. д.

👍 5. Модель рака, ассоциированного с колитом, вызванным ВЗК, может быть создана с помощью комбинированного использования азоксиметана (АОМ).

3. Пример построения модели DSS UC

3.1 Модель мыши(Нажмите для подробностей)

1) Мыши BALB/c, самки, 6-8 недель, 25 г;

2) Стерильная питьевая вода с 3% DSS и фильтром с 0.Мембрана 22 мкм;

3) DSS назначался в течение 7 дней;

4) Воспаление, например, толстой кишки После окрашивания ГЭ наблюдался отек и застой.

Рис.2 Результаты окраски HE срезов острого колита DSS [1]

3.2 Модель данио-рерио(Нажмите для подробностей)

1) Эмбрионы данио-рерио были получены в результате естественного нереста и выращивались до 1 дня после оплодотворения (dpf) в инкубаторе при температуре 28,5 ℃ в рециркулирующей воде (60 мкг/мл растворимых морских солей) с добавлением метиленового синего до 1 дня после оплодотворения;

2) После 1 дня оплодотворения используйте среду для культивирования эмбрионов E3 без метиленового синего для культивирования до 3 дней оплодотворения;

3) Приготовьте 10% раствор для хранения DSS со средой E3;

4) Разбавьте DSS питательной средой до максимально нелетальной дозы (концентрация DSS: 0,5%);

5) Данио-рерио обрабатывали 0,5% DSS с 3 по 6 день оплодотворения и наблюдали за индексами.

Fig.3 DSS induces an inflammatory response in zebrafish liver

Рис.3 DSS вызывает воспалительную реакцию в печени данио-рерио [2]

3.3 Модель свиньи(Нажмите для подробностей)

1) Йоркширские поросята в возрасте 4-5 дней;

2) Доза DSS: 1,25 г/кг, пероральный прием в течение 5 дней;

3) Наблюдалось увеличение скорости поглощения D-маннитола.

Рис.4 Концентрация D-маннитола у поросят, вызванная DSS, была выше, чем в контрольной группе [3]

3.4 Модель дрозофилы(Нажмите для подробностей)

1) Дрозофила, самка, 5-10 дней;

2) Кормление середина был приготовлен с 5% раствором сахарозы, содержащим 3% DSS и 25 мкг/мл блеомицин;

3) Дрозофилу культивировали при температуре 29°С в течение трех дней с ежедневной заменой флакона с культурой;

4) DSS индуцировал пролиферацию клеток-предшественников ISC и оказывал летальное воздействие на дрозофилу.

Рис.5 DSS индуцирует пролиферацию клеток-предшественников ISC у дрозофилы [4].

3.5 Колит ассоциированный рак(Нажмите для подробностей)

1)Мыши BALB/c, самцы, возраст 7 недель;

2) В первый день взвесьте и пометьте мышей. Введите мышам внутрибрюшинно 10 мг/кг раствора АОМ.

3) Наполните водой поилку в клетках для мышей. Рассчитывайте 7-10 мл воды на мышь в день. Кормление в течение одной недели.

4) Замените питьевую воду на 2,5% DSS в течение одной недели;

5) Кормить обычной питьевой водой в течение двух недель;

6) Повторите шаги 3-4 3 раза.

Fig.6 Schematic diagram of CAC induced by AOM/DSS [5] .

Рис.6 Схематическая диаграмма CAC, вызванного AOM/DSS [5] .

4. Критерии оценки успешности моделирования

4.1 Индекс активности заболевания (DAI)

Модель оценивалась по нескольким параметрам, включая массу тела, вязкость кала и скрытую кровь, на основании которых рассчитывался общий DAI.

Таблица 2. Правила подсчета баллов DAI

счет

процент потери веса

консистенция стула

скрытая кровь в кале

0

0

Нормальный

Отрицательно

1

1-5%

Мягкий стул

светло-голубой

2

5-10%

Слизистый стул

Синий

3

10-20%

Жидкий стул

Темно-синий

4

>20%

\

Грубый кровавый стул

4.2 Оценка гистологических изменений

Баллы были даны для вышеуказанных показателей на основе гистологических изменений, за исключением образования лимфатических узлов для модели острого колита. Использованный реагент для окрашивания HE — Cat#60524ES60.

Таблица 3 Оценка гистологических изменений

Болезненная язва

Язва (ы)

Эпиизменения воспалительные

Воспалительный инфильтрат

Лимфатический узел(ы)

0

0

Нормальный

Никто

никто

1

1

Потеря бокаловидных клеток

Перикриптовая инфильтрация

1

2

2

Потеря бокаловидных клеток

Инфильтрация мышечной оболочки слизистой оболочки

2

3

3

Удаление крипты

Общая инфильтрация мышечной оболочки слизистой оболочки, утолщение слизистой оболочки

3

4

>3

Обширная потеря крипт или полиповидная регенерация

Подслизистая инвазия

>

4.3 Колон длина

Укороченная длина толстой кишки была очевидным фенотипом для модели хронического колита, тогда как аналогичные изменения можно обнаружить на 8-й день для модели острого колита.

4.4 Резюме

Предварительные эксперименты рекомендуются для использования модели животных DSS UC с соответствующим контролем. Минимальные требования — 8-10 животных на группу. DAI — критерий оценки результатов предварительного исследования.

5. Ссылки на этот ресурс

[1]Сяона Гао и др. Журнал пищевой биохимии 83 (2020) 108438.
[2] Цзин Ма и др. Аквакультура и рыболовство (2021) 548–557.
[3]Конни Дж. Ким и др. Журнал пищевой биохимии 21 (2010) 468–475.
[4] Фанфанг Рен и др. PNAS.2010.107. (49) 21064-21069.
[5] Цзя-Жун Хуан и др. Границы фармакологии. 2020.11:586885.

6. Успешный случай моделирования с помощью Yeasen DSS

Успешные модели острого колита созданы с помощью Yeasen DSS (Кат. № 60316ES, МВт: 36000~50000) через 7 дней с выраженным фенотипом, как показано в следующей таблице.

Таблица 4. Построение различных типов моделей энтерита с помощью DSS

Модель

Моделирование образцов

План моделирования

Результаты моделирования

Использовать оценку

Острый колит

Мыши BALB/c, самки, 6-8 недель, 25 г

3%-5% DSS пьют свободно в течение 7 дней подряд

На 5-й день длина толстой кишки сократилась, появилось окрашивание HE, воспаление было очевидным.

Скорость формования высокая, а время короткое. Соответствует характеристикам модели острого колита

Мыши C57BL/6, самцы, 8 недель, 20 г

3%-5% DSS через зонд, непрерывное введение

Наступает 5-й день: укорочение толстой кишки, потеря веса, кровь в стуле, диарея.

Высокая скорость плесени и короткая продолжительность. Соответствует характеристикам модели острого колита

Хронический колит

Мышь C57BL/6, самец, 8 недель, 22 г

1-2% DSS через зонд, непрерывное введение

Появляется на 40-й день, укорочение толстой кишки, потеря веса, кровь в стуле, диарея

Высокая скорость формования. Соответствует характеристикам модели хронического колита.

Рак толстой кишки

Мышь C57BL/6, самец, 8 недель, 21 г

1%-2% DSS ad libitum в течение 5 дней в течение 3 недель

14 недель с укорочением длины толстой кишки, потерей веса, окрашиванием HE и очевидным воспалением

Высокая скорость формования. Соответствует характеристикам модели рака толстой кишки.

7. Часто задаваемые вопросы

Независимо от модели острого колита DSS или хронического колита DSS, тяжесть и успешность энтерита зависят от вида мышей (различный генетический фон), концентрации DSS и цикла дозирования.

Таблица 5. Распространенные проблемы моделирования колита DSS

Возможные проблемы

Возможная причина

Предлагаемое решение

Высокая смертность у мышей

Концентрация DSS слишком высокая

Уменьшить концентрацию вводимого DSS

Мыши без симптомов энтерита или с незначительными симптомами

Концентрация DSS слишком низкая

Увеличить концентрацию дозировки DSS; уменьшить интервал цикла (10-14 дней)

В одной и той же группе мышей симптомы энтерита сильно различаются

Крышка бутылки засорилась

Ежедневно проверяйте бутылочку для питья у мышей.

8. Заказ товара:

Для самого продаваемого продукта требуется всего 1/3 от цены М* с той же эффективностью и у нас большой запас.

Таблица 6 Заказ продукта

Название продукта Номер кат. Размер
Декстран сульфат натриевая соль для моделирования колита ММ: 36000~50000 60316ES25 25г
60316ES60 100 г
60316ES76 500 г
60316ES80 1 кг

9. Опубликованные статьи с нашими реагентами:

2022

[1]Мэнмэн Сюй, Ин Конг, Наннан Чен и др. Определение сигнатуры иммуносвязанных генов и прогнозирование сети CeRNA при активном язвенном колите[J].Frontiers in Immunology.2022; 13: 855–645. ЕСЛИ=7,561
[2]Луцзюань Син, Лицзюань Фу, Сонгмин Цао и др. Противовоспалительное действие пептидов, полученных из бычьего костного желатина, при РА, вызванном ЛПСW264.7 Клетки макрофагов и мыши C57BL/6, индуцированные декстрансульфатом натрия [J]. Питательные вещества 2022, 14, 1479. ЕСЛИ=5,717
[3]Ван С,  Хуан Дж,  загар КС, и др. Изостевиол натрия улучшает течение хронического колита, вызванного декстраном сульфата натрия, посредством регуляции метаболического профилирования, поляризации макрофагов и пути NF-B [J]. Окислительная медицина и клеточное долголетие. 2022,4636618. ЕСЛИ=5,076
[4]ЮаньгэнгЛи, ПинЮ, ВэньвэньФу и др. Полисахариды из женьшеня Panax CA Meyer облегчают вызванное DSS ВЗК путем ингибирования сигнального пути инфламмасомы JAK2/STAT1/NLPR3 у мышей[J].Журнал функциональных продуктов питания.2022, 105013. ЕСЛИ=4,451
[5]Лэй-НинЧен, ТаоЦзин, Цзы-БинЛинь и др. Метаболомные и транскриптомные реакции яичек мышей на колит, вызванный декстрансульфатом натрия[J].Репродуктивная токсикология.2022, страницы 35-42. ЕСЛИ=3,143

2021

[1]Ли Чжао, Фэй Ван, Чжэнвэй Цай и др. Улучшение платформы использования лекарственных средств с помощью инъекционного мукоадгезивного гидрогеля для лечения язвенного колита[J]. Журнал химической инженерии.424(2021)130464.ЕСЛИ=16,744
[2]Линцзюнь Тонг, Хайнин Хао, Чжэ Чжан и др. Внеклеточные везикулы, полученные из молока, облегчают язвенный колит, регулируя иммунитет кишечника и изменяя состав микробиоты кишечника[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 ЕСЛИ=11,556
[3] Цзинцзин Ган, Юйсяо Лю, Линюй Сан и др. Перорально вводимые частицы доставки нуклеотидов из микрофлюидики для лечения воспалительных заболеваний кишечника [J]. Applied Materials Today. 2021 Декабрь; 25:101231. ЕСЛИ=10,041
[4]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao и др. Микробиота полости рта влияет на эффективность и прогноз лучевой терапии колоректального рака в моделях на мышах[J]. Cell reports.2021, 109886.IF=9,423
[5]Хао ЧАС,  Чжан Х,  Тонг Л,  Лю Q, et al. Lactobacillus plantarum. Влияние внеклеточных везикул, полученных из Q7 о микробиоте кишечника и язвенном колите у мышей[J].Frontiers in Immunology.2021.777147. ЕСЛИ=7,561
[6]Яохуа Фань, Яньцюнь Фань, Куньфэн Лю и др. Съедобное птичье гнездо облегчает язвенный колит, вызванный декстрансульфатом натрия, у мышей C57BL/6J, восстанавливая баланс клеток Th17/Treg[J].Frontiers in Pharmacology.2021.632602. ЕСЛИ=7,561

2020

[1]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Валериановая кислота, полученная из кишечных комменсалов, защищает от лучевых поражений. Gut Microbes,.2020.1–18.IF=10.245
[2] Цзя-Жун Хуан, Шэн-Тэ Ван, Мэн-Нин Вэй и др. Пиперлонгумин облегчает колит у мышей и связанный с колитом колоректальный рак [J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885. ЕСЛИ=7,561
[3]Gao X, Fan W, Tan L и др. Соевые изофлавоны облегчают экспериментальный колит, воздействуя на пути инфламмасомы ERα/NLRP3[J]. Журнал пищевой биохимии, 2020, 83. ЕСЛИ=6,048

До 2020 г.

[1] Oehlers SH, Flores MV, Hall CJ, Crosier KE, Crosier PS. Ретиноевая кислота подавляет выработку кишечной слизи и усугубляет экспериментальный энтероколит. Dis Model Mech. 2012 июль;5(4):457-67. ЕСЛИ=4,973
[2] Kim CJ, Kovacs-Nolan JA, Yang C, Archbold T, Fan MZ, Mine Y. L-триптофан проявляет терапевтическую функцию в свиной модели колита, вызванного декстраном сульфатом натрия (DSS). J Nutr Biochem. 2010 июнь;21(6):468-75. ЕСЛИ=6,048
[3] Карпович, П., Перес, Дж. и Перримон, Н.,. Путь супрессора опухолей Hippo регулирует регенерацию стволовых клеток кишечника. Development (Кембридж, Англия), 2010, 137(24), стр. 4135–4145. ЕСЛИ=6,868
[4] Fan H, Chen W, Zhu J и др. Toosendanin облегчает колит, вызванный декстрансульфатом натрия, путем ингибирования поляризации макрофагов M1 и регулирования NLRP3 инфламмасомы и сигнализации Nrf2/HO-1 [J]. Международная иммунофармакология, 2019, 76: 105909. ЕСЛИ=3,943

С уважением к чтению

Создание модели рака, связанного с колитом, вызванным азоксиметаном (АОМ) и декстрансульфатом натрия (ДСС)

Протокол моделирования язвенного колита у зебровых рыбок с использованием декстрана сульфата натрия (DSS)

Протокол моделирования язвенного колита у дрозофилы с использованием декстрана сульфата натрия (DSS)

Протокол моделирования язвенного колита у поросят с использованием декстрана сульфата натрия (DSS)

Расследование