Протокол моделирования язвенного колита у поросят с использованием декстрана сульфата натрия (DSS)

Повышенная проницаемость кишечника является одним из этиологических факторов ВЗК и, таким образом, может использоваться в качестве биомаркера для оценки тяжести поражения тонкого и толстого кишечника. D-маннитол, инертная небольшая углеводная молекула, которая может всасываться по всей оси крипты-ворсинки, использовался для оценки проницаемости кишечника in vivo[1].

Figure 1. Piglet

Рисунок 1. Поросенок

1. Построение модели

2. Результаты

3. Ссылки на этот ресурс

4. Успешный случай моделирования с помощью Yeasen DSS

5. Заказ товара

6. Опубликованные статьи с нашими реагентами

7. Отношение к чтению

1. Построение модели

1.1 Животная модель

Поросята йоркширской породы в возрасте 4-5 дней

1.2 Материал

DSS(Yeasen#60316ES,MW36000-50000)

1.3 Протокол

a) Йоркширские поросята содержались индивидуально в металлических напольных загонах с прорезиненными полами в контролируемом помещении с 12-часовым циклом света/тьмы. Температура в помещении поддерживалась на уровне 26℃ и дополнялась обогревательной лампой;
б) Поросята получали рацион из коммерческой смеси заменителя молока три раза в день, аналогичный уровню их потребления ad libitum;
c) Животным хирургическим путем устанавливали внутрижелудочный катетер. Катетер прикрепляли к силиконовой заплатке (примерно 8×12 мм), которая затем пришивалась к стенке желудка с вставлением примерно на 30 мм внутрь просвета желудка. Каждое животное помещали в индивидуальный жилет с дорсальным карманом для временного хранения внешнего сегмента катетера;
г) Животные были разделены на группу положительного контроля (Pos), группу отрицательного контроля (Neg) и экспериментальную группу (Trp);
e) Положительная контрольная группа (Pos): перфузия DSS (5 дней) + физиологический раствор (5 дней); Отрицательная контрольная группа (Neg): перфузия физиологическим раствором (10 дней); Экспериментальная группа (Trp): инфузия DSS (5 дней) + терапевтические препараты (5 дней);
е) доза DSS: 1,25 г/кг, пероральный прием в течение 5 дней;
ж) В конечной точке животные были седированы с помощью ингаляционного анестетика изофлурана и умерщвлены посредством внутрисердечной инъекции этанола (пентобарбитала) в дозе 0,3 мл/кг массы тела (МТ).
h) Ткани толстой кишки немедленно промывали холодным физиологическим раствором (154 мМ, pH 7,4), содержащим 0,1 мМ фенилметилсульфонилфторида (ФМСФ), и брали образцы для гистологического исследования или мгновенно замораживали в жидком азоте для последующего анализа.

2. Результаты

2.1 Анализ кишечной проницаемости

Figure 2. DSS-induced D-mannitol concentration in piglets was higher than that in the control group

Рисунок 2. Концентрация D-маннитола, вызванная DSS, у поросят была выше, чем в контрольной группе.

Под действием DSS концентрация D-маннитола у поросят увеличилась, а кишечный барьер был разрушен.

2.2 Патологический срез, окрашенный гематоксилином и эозином

Figure 3. H&E pathological staining section (A: Neg group; B: Pos group)

Рисунок 3. Патологический участок, окрашенный H&E (A: отрицательная группа; B: положительная группа)

Тяжесть воспаления толстой кишки оценивалась по шкале воспаления и гистологическим измерениям.В группе Pos, получавшей лечение с помощью DSS, структура кармана была нарушена, воспалительные клетки проникли в слизистую и подслизистую оболочку, образовался абсцесс кармана и воспаление кармана.

2.3 Выявление воспалительных факторов

Figure 4. Detection of inflammatory factors

Рисунок 4. Выявление воспалительных факторов

Концентрация двух цитокинов в группе Pos, получавшей лечение DSS, увеличилась[1].

3. Ссылки на этот ресурс

[1]Конни Дж. Ким и др. Журнал пищевой биохимии 21 (2010) 468–475.

4. Успешный случай моделирования с помощью Yeasen DSS

Yeasen обеспечивает высокое качество ДСС (Кат. № 60316ES): чистота (98%), содержание серы 17–19%, свободная сера <0,2%, что подтверждается большим количеством литературных данных.

Таблица 1. Построение различных типов моделей энтерита с помощью DSS

Модель

Моделирование образцов

План моделирования

Результаты моделирования

Использовать оценку

острый колит

Мыши BALB/c, самки, 6-8 недель, 25 г

3%-5% DSS пьют свободно в течение 7 дней подряд

На 5-й день появился длина толстой кишки была укорочена, окрашивание HE, и воспаление было очевидным

Скорость формования высокая, а время короткое. Соответствует характеристикам модели острого колита

Мыши C57BL/6, самцы, 8 недель, 20 г

3%-5% DSS через зонд, непрерывное введение

Наступает 5-й день: укорочение толстой кишки, потеря веса, кровь в стуле, диарея.

Высокая скорость плесени и короткая продолжительность. Соответствует характеристикам модели острого колита

хронический колит

Мышь C57BL/6, самец, 8 недель, 22 г

1-2% DSS через зонд, непрерывное введение

Появляется на 40-й день, укорочение толстой кишки, потеря веса, кровь в стуле, диарея

Высокая скорость формования. Соответствует характеристикам модели хронического колита.

рак толстой кишки

Мышь C57BL/6, самец, 8 недель, 21 г

1%-2% DSS ad libitum в течение 5 дней в течение 3 недель

14 недель с укорочением длины толстой кишки, потерей веса, окрашиванием HE и очевидным воспалением

Высокая скорость формования. Соответствует характеристикам модели рака толстой кишки

5. Заказ товара

Для самого продаваемого продукта требуется всего 1/3 от цены M* при той же эффективности, и мы держим большой запас.

Таблица 2. Заказ продукта

Название продукта Номер кат. Размер
Декстрансульфат натриевая соль для моделирования колита ММ: 36000~50000 60316ES25 25г
60316ES60 100 г
60316ES76 500 г
60316ES80 1 кг

6. Опубликованные статьи с нашими реагентами

[1]Ли Чжао, Фэй Ван, Чжэнвэй Цай и др. Улучшение платформы использования лекарств с помощью инъекционного мукоадгезивного гидрогеля для лечения язвенного колита[J]. Журнал химической инженерии.424(2021)130464.IF=16.744
[2]Линцзюнь Тонг, Хайнин Хао, Чжэ Чжан и др. Внеклеточные везикулы, полученные из молока, облегчают язвенный колит, регулируя иммунитет кишечника и изменяя состав микробиоты кишечника[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 ЕСЛИ=11,556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Кишечные комменсалы, полученные из валериановой кислоты, защищают от лучевых поражений. Gut Microbes,.2020.1–18.IF=10.245
[4] Цзинцзин Ган, Юйсяо Лю, Линюй Сан и др. Перорально вводимые частицы доставки нуклеотидов из микрофлюидики для лечения воспалительных заболеваний кишечника [J]. Applied Materials Today. 2021 Декабрь; 25:101231 ЕСЛИ=10,041
[5]Мэнмэн Сюй, Ин Конг, Наннан Чен и др. Определение сигнатуры иммуносвязанных генов и прогнозирование сети CeRNA при активном язвенном колите[J].Frontiers in Immunology.2022; 13: 855–645. ЕСЛИ=7,561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao и др. Микробиота полости рта влияет на эффективность и прогноз лучевой терапии колоректального рака в моделях на мышах[J].Cell reports.2021, 109886.IF=9,423
[7]Хао ЧАС,  Чжан Х,  Тонг Л,  Лю Q, et al. Lactobacillus plantarum. Влияние внеклеточных везикул, полученных из Q7 о микробиоте кишечника и язвенном колите у мышей[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8]Яохуа Фань, Яньцюнь Фань, Куньфэн Лю и др. Съедобное птичье гнездо облегчает язвенный колит, вызванный декстрансульфатом натрия, у мышей C57BL/6J, восстанавливая баланс клеток Th17/Treg[J].Frontiers in Pharmacology.2021.632602.IF=7.561
[9] Цзя-Жун Хуан, Шэн-Тэ Ван, Мэн-Нин Вэй и др. Пиперлонгумин облегчает колит у мышей и связанный с колитом колоректальный рак [J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885. ЕСЛИ=7,561
[10]Gao X, Fan W, Tan L и др. Соевые изофлавоны облегчают экспериментальный колит, воздействуя на пути инфламмасомы ERα/NLRP3[J]. Журнал пищевой биохимии, 2020, 83.IF=6.048
[11]Луцзюань Син, Лицзюань Фу, Сонгмин Цао и др. Противовоспалительное действие пептидов, полученных из бычьего костного желатина, при РА, вызванном ЛПСW264.7 Клетки макрофагов и мыши C57BL/6, индуцированные декстрансульфатом натрия [J]. Питательные вещества 2022, 14, 1479. ЕСЛИ=5,717
[12] Ван С,  Хуан Дж,  загар КС, и др. Изостевиол натрия улучшает течение хронического колита, вызванного декстраном сульфата натрия, посредством регуляции метаболического профилирования, поляризации макрофагов и пути NF-B [J]. Окислительная медицина и клеточное долголетие. 2022,4636618. ЕСЛИ=5,076

7.С уважением к чтению

Создание модели язвенного колита с декстрансульфатом натрия (ДСН)

Создание модели рака, связанного с колитом, вызванным азоксиметаном (АОМ) и декстрансульфатом натрия (ДСС)

Протокол моделирования язвенного колита у дрозофилы с использованием декстрана сульфата натрия (DSS)

Протокол моделирования язвенного колита у зебровых рыбок с использованием декстрана сульфата натрия (DSS)

Расследование