Обзор
Целентеразин — это природный флуоресцеин, который широко распространен в природе и является молекулой хранения световой энергии большинства морских люминесцентных организмов (более 75%). Целентеразин может использоваться в качестве субстрата для многих ферментов люциферазы, таких как люцифераза морских почек (Rluc), люцифераза, секретируемая гауссиями (Gluc), и фотопротеинов, включая экворин и обелию. В отличие от системы люциферин/люцифераза светлячков, система целентеразин/люцифераза не требует аденозинтрифосфата (АТФ), что упрощает изучение биофлуоресценции in vivo. Поэтому целентеразин обычно используется в качестве люминесцентного субстрата для флуоресцентных анализов, основанных на анализах репортерных генов и анализах на живых животных.
Основным коммерческим целентеразином, который в настоящее время используется, является нативный целентеразин. Также синтезировано много производных целентерезина, таких как целентеразин h, целентеразин 400a, целентеразин cp, целентеразин f, целентеразин hcp, целентеразин n и т. д. Теоретически эти целентерезины можно использовать в одних и тех же экспериментах, но из-за различий в длине световой волны, проницаемости клеточной мембраны и квантовой эффективности света они демонстрируют разные экспериментальные эффекты в одном и том же приложении.
Виды целентеразина
Также известна как свободная кислота целентеразин. Является субстратом многих ферментов люциферазы, таких как люцифераза Renilla (Rluc) и люцифераза Gaussia (Gluc), а также кофактором люминесцентного белка медузы.
Сценарии применения: Определение концентрации ионов кальция в живых клетках, анализ генной отчетности, исследование BRET (биолюминесцентный резонансный перенос энергии), ИФА, HTS и хемилюминесцентное определение уровней активных форм кислорода в тканях или клетках и т. д.
Он является субстратом многих ферментов люциферазы, таких как люцифераза Renilla (Rluc) и люцифераза Gaussia (Gluc), а также кофактором люминесцентного белка медуз.
Сценарий применения: Интенсивность свечения более чем в 10 раз выше, чем у Coelenterasine Native, что подходит для анализа репортерных генов и определения концентрации ионов кальция в живых клетках.
целентеразин hcp
Это одно из производных Coelenterazine Native. Интенсивность флуоресценции комплекса Coelenterazine hcp-Aequorin в 190 раз выше, чем у комплекса Coelenterazine Native, с высоким квантовым выходом и быстрым Ca2+ скорость реакции, которая очень подходит для определения уровня ионов кальция.
Сценарий применения: Подходит для определения уровня ионов кальция.
Также известный как DeepBlue CTM, он является одним из производных Coelenterazine Native. Он является хорошим субстратом для люциферазы Renilla (Rluc), а длина волны его излучения составляет около 400 нм, что мало влияет на сигнал белка рецептора GFP и не может быть окислено секретируемой люциферазой Gaussia (Gluc).
Сценарий применения: Это предпочтительный субстрат целентеразина для исследований BRET (биолюминесцентного резонансного переноса энергии).
Это предпочтительный субстрат для экворина, и единственное структурное отличие от нативного целентеразина заключается в том, что гидроксильная группа в его фенольной группе R-1 заменена на фтор (F).По сравнению с общим числом фотонов, производимых комплексом целентеразина нативного и апоэкворина, этот комплекс производит только 80% энергии фотонов. Преимущество заключается в том, что для создания комплекса экворина требуется совсем немного времени. При контакте с Ca2+, он излучает свет быстро и с высокой производительностью, с интенсивностью производства в 20 раз превышающей интенсивность природного целентеразина. Кроме того, он обладает хорошей проницаемостью клеток.
Сценарий применения: При чрезвычайно высоком содержании Ca2+ Для изучения экспериментов по регенерации белка медуз требуется чувствительность обнаружения, рекомендуется использовать субстраты.
Целентеразин ср
Это производное Coelenterazine Native. Фотопротеиновый комплекс, образованный с белком Apoaequorin, в 15 раз более светящийся, чем Coelenterazine Native, и имеет более быстрый Ca2+ скорость реакции.
Сценарий применения: Его можно использовать для высокопроизводительного скрининга препаратов, содержащих рецепторы, сопряженные с G-белком (GPCR).
Целентеразин n
Интенсивность его флуоресценции слабее у всех производных целентеразина, а скорость реакции на Ca2+ значительно ниже, чем у нативного целентеразина.
Целентеразин е
Производное Coelenterazine Native, которое структурно имеет на одну этиловую группу больше, чем Coelenterazine Native. Как субстрат для люциферазы Renilla, его интенсивность флуоресценции составляет 137% от интенсивности Coelenterazine Native. Coelenterazine e обладает высокой in vitro реактивностью люминесцентного белка медузы и двойными пиками испускания (405 и 465), что позволяет определять Ca2+ концентрация в диапазоне pCa5-7 по соотношению двух длин волн. Этот метод не зависит от концентрации целентеразина, что повышает точность обнаружения. Поскольку проницаемость клеток этого производного низкая, он не имеет этого преимущества для внутриклеточных экспериментов.
Сценарий применения: Очень полезный субстрат для Ca2+ Низкая чувствительность обнаружения.
Целентеразин 2-метил
Это мощный клеточный антиоксидант. Он может эффективно воздействовать на внутриклеточные активные формы кислорода, такие как синглетный кислород и супероксид-анионы, а окислительный стресс является промежуточным звеном в процессе апоптоза. Кроме того, соединение обладает характеристиками нетоксичности и мембранной проницаемости, поэтому его можно использовать для изучения апоптоза.
Применение продукта:
1) Как важный инструмент для изучения апоптоза;
2) Его также можно использовать для хемилюминесценции для определения уровней супероксид-аниона и пероксинитрит-аниона.
| Название продукта | Молекулярный вес | Молекулярная формула | Эм (нм) | РЛК* | Относительная интенсивность | Время полунарастания (мс)** |
| 423.46 |
| 466 | 1.00 | 1 | 6-30 | |
| 407.48 |
| 466 | 0,75 | 16 | 6-30 | |
| целентеразин hcp | 399.48 |
| 445 | 0,65 | 500 | 2-5 |
| Целентеразин ср | 415.48 |
| 442 | 0,63 | 28 | 2-5 |
| 425.46 |
| 472 | 0,80 | 20 | 6-30 | |
| Целентеразин n | 457.52 |
| 468 | 0,25 | 0,15 | 6-30 |
| Целентеразин е | 449,5 |
| 405 и 465 | 0,5 | 4 | 0,15-0.3 |
| 2-метилцелентеразин | 331.37 |
| / | / | / | / |
| 391.48 |
| 400 | / | / | / |
Информация о продукте
| Название продукта | Номер по каталогу | Технические характеристики |
| 40901ES01/02/03/08 | 100мг/500мг/1г/5г | |
| 40902ES01/02/03/09 | 100мг/500мг/1г/5г | |
| 40903ES01/02/03 | 100мг/500мг/1г | |
| 40904ES02/03/08 | 1×500 мкг/2×500 мкг/5мг | |
| 40905ES02/03 | 1×500 мкг/2×500 мкг | |
| 40906ES02/03/08 | 1×500 мкг/2×500 мкг/5мг | |
| 40908ES02/03 | 1×500 мкг/2×500 мкг |
Опубликованная литература от пользователей (неполная статистика)
- Xie J, Zheng H, Chen S, Shi X, Mao W, Wang F. Рациональный дизайн активируемого репортера для количественной визуализации аберрантного сплайсинга РНК in vivo. Mol Ther Methods Clin Dev. 2020;17:904-911. Опубликовано 18 апреля 2020 г.
- Lin GY, Lin L, Cai XQ и др. Высокопроизводительная скрининговая кампания выявляет малую молекулу-агонист пептидного рецептора семейства релаксина 4 [опубликовано онлайн до выхода в печать, 31 марта 2020 г.]. Acta Pharmacol Sin. 2020;10.1038/s41401-020-0390-x.
- Шао Л., Чэнь И., Чжан С., Чжан З., Цао И., Ян Д., Ван М. В. Модулирующие эффекты RAMP на сигнальные профили семейства рецепторов глюкагона, Acta Pharmaceutica Sinica B.
- Хайфэн Чжэн, Си Чэнь, Синань Ван, Цзиньронг Се, Цзе Тянь и Фу Ван. Интронный репортер биолюминесценции для визуализации в реальном времени сплайсинга пре-мРНК у живых субъектов. CAnal. Chem. 2019, 91, 12392−12398
- Пейюй Сюй, Сидзе Хуан, Чунью Мао, ..., Си Чэн, Ян Чжан, Х. Эрик Сюй. Структуры комплексов рецептор дофамина D3 человека-Gi. 2021, Molecular Cell 81, 1147–1159.
- Мошуань Цзи, Синань Ван, Хайфэн Чжэн, Вэньцзе Мао, Сяоруй Ши, Си Чен, Чу Тан и Фу Ван Ци. Секретный репортер для мониторинга пироптотической гибели клеток в крови. Анальный. хим.
- F Hu, Y Zhang, Q Liu, Z Wang. PurA помогает Edwardsiella piscicida избегать активации сигнала NF-κB. Иммунология рыб и моллюсков, 2022 - Elsevier
- Хайфэн Чжэн, Синань Ван, Си Чен, Сяоруй Ши, Цзиньжун Се, Вэньцзе Мао, Цзе Тянь и Фу Ван. Функциональная биовизуализация в реальном времени динамики нейрон-специфических микроРНК во время дифференцировки нейронов с использованием репортера двойной люциферазы. АКС хим. Neurosci.DOI: 10.1021/acschemneuro.8b00614