Комплексное решение для обнаружения вируса оспы обезьян YEASEN

Первый подтвержденный случай оспы обезьян был зарегистрирован в Великобритании в начале мая, и он быстро распространился в неэндемичных странах и регионах. По состоянию на 21 сентября 2022 года в мире подтверждено 106 стран/регионов, в общей сложности 63 117 случаев. 16 сентября Чунцин подтвердил завезенный случай оспы обезьян, первый случай в материковом Китае, что вызвало общественную обеспокоенность.

Figure 1. 2022 Monkeypox Outbreak Global Map(From the CDC)

Рисунок 1. Глобальная карта вспышек оспы обезьян в 2022 году (по данным CDC)

1. Что такое оспа обезьян?
2. История оспы обезьян
3. Как распространяется
4. Признаки и симптомы
5. Метод обнаружения
6. Соответствие продукта
7. Заказ товара

1. Что такое оспа обезьян?

Вирус оспы обезьян — это двухцепочечный ДНК-вирус общей длиной около 197 кб. Он относится к роду Orthopoxvirus семейства Poxviridae. Вирус). Существуют две ветви вируса оспы обезьян (западноафриканская ветвь и ветвь бассейна Конго). Среди них летальность западноафриканской ветви составляет около 3,6%, а летальность ветви бассейна Конго может достигать 10,6%. Образцы случаев оспы обезьян, обнаруженные в неэндемичных районах с мая 2022 года, анализ секвенирования показал западноафриканскую кладу[1].

Figure 2. Monkeypox picture (picture from CCDC)

Рисунок 2. Фотография оспы обезьян (фотография из CCDC)

2. История оспы обезьян

Оспа обезьян была обнаружена в 1958 году, когда в колониях обезьян, содержащихся для исследований, произошло две вспышки похожей на оспу болезни. Несмотря на название «оспа обезьян», источник болезни остается неизвестным. Однако африканские грызуны и нечеловекообразные приматы (например, обезьяны) могут быть носителями вируса и заражать людей[2].
Первый случай заболевания человека оспой обезьян был зафиксирован в 1970 году. До вспышки 2022 года оспа обезьян была зарегистрирована у людей в нескольких странах Центральной и Западной Африки. Ранее почти все случаи заболевания оспой обезьян у людей за пределами Африки были связаны с международными поездками в страны, где распространено это заболевание, или с импортированными животными. Эти случаи произошли на нескольких континентах[2].

3. Как распространяется

Он может передаваться от животных к человеку, от человека к человеку и из окружающей среды к человеку.
Теперь ясно, что оспа обезьян может заражать людей тремя способами: один — от инфицированных животных к людям. Вирус может проникать в организм через поврежденную кожу, дыхательные пути или слизистые оболочки (глаза, нос или рот). Второй способ — передача через тесный контакт между людьми, включая половой акт, поцелуи, объятия или прикосновение к частям тела, зараженным оспой обезьян, а также контакт с зараженной вирусом одеждой, постельным бельем, полотенцами или посудой и другими предметами, которые также могут быть инфицированы. Третий способ — передача воздушно-капельным путем[3].

4. Признаки и симптомы

Основными клиническими проявлениями являются лихорадка, сыпь и лимфаденопатия.
Наиболее распространенные симптомы на ранней стадии включают лихорадку, головную боль, мышечные боли и увеличение лимфатических узлов. Сыпь появляется через 1–3 дня после начала заболевания. Типичная сыпь сначала появляется на лице и постепенно распространяется на конечности и другие части. Сыпь в основном центробежная., высыпания на лице и конечностях встречаются чаще, чем на туловище, высыпания могут появляться на ладонях и подошвах ног, а количество высыпаний варьируется от нескольких до тысяч; также могут поражаться слизистая оболочка полости рта, пищеварительный тракт, половые органы, конъюнктива и роговица.
Симптомы обычно длятся от 14 до 21 дня, и пациенты обычно избавляются от них самостоятельно. Эритема или гиперпигментация или даже шрамы могут остаться после отпадения корочек. Стоит отметить, что корка остается заразной до тех пор, пока корка не отпадет и под ней не сформируется новый слой кожи[3].

5. Метод обнаружения

Для эффективного предотвращения и контроля эпидемии оспы обезьян и предотвращения импорта и распространения вируса глобальные компании IVD активно отреагировали. Как поставщик сырья для производства реагентов для обнаружения IVD и реагентные растворы, YEASEN предоставляет комплексное решение для эффективного обнаружения вируса оспы обезьян. От извлечения нуклеиновой кислоты до компонентов реагентов (ферментных реагентов и псевдовирусов) и полуфабрикатов наборов (праймерных зондов, ферментных реагентов и плазмидных контролей), YEASEN может поставлять вам стабильно.

Figure 3. Virus detection method

Рисунок 3. Метод обнаружения вирусов

5.1 Преимущество метода

  • Эффективная и удобная эксплуатация — набор комплектов, включающий все компоненты, без громоздких операций, добавление в один шаг
  • Высокая чувствительность обнаружения — метод генетически модифицированных антител с горячим стартом фермента Taq, также может быть обнаружено 1 копия/реакция
  • Высокая стабильность реагента — хранить при температуре 37℃ в течение 1 недели, стабильные характеристики после многократного замораживания и оттаивания.
  • Предотвращение загрязнения UDG — система dUTP/UDG добавляется в систему для эффективного предотвращения риска аэрозольного загрязнения.
  • Применимо к нескольким платформам — подходит для Bio-Rad CFX96, ABI Q5 и Slan

5.2 Соответствие продукта

6. Рекомендуемые продукты

6.1 Набор для ПЦР в реальном времени для определения вируса оспы обезьян (кат. № 13862ES)

Преимущества продукта:
Эффективная и удобная эксплуатация
Высокая чувствительность и хорошая специфичность
Супер стабильность
Хорошая повторяемость

6.1.1 Демонстрация случая:

  • Супертермическая стабильность при 37℃

MPXV был амплифицирован путем помещения Cat#13862ES при 37℃ на 7 дней. Результаты показали, что значение Ct и значение флуоресценции не были значительно затронуты 7 днями при 37℃, а термостабильность была высокой.

Figure 4. Yeasen(Cat#13862ES)37℃ accelerated 7-day stability verification

Рисунок 4. Yeasen (Cat#13862ES) ускоренная 7-дневная проверка стабильности при 37℃

  • Суперустойчивость к замораживанию-оттаиванию

MPXV был амплифицирован путем замораживания и оттаивания Cat#13862ES при -20 ℃ в течение 10, 20 и 50 раз соответственно.Результаты показали, что замораживание и оттаивание 10, 20 и 50 раз при температуре -20 ℃ не оказало существенного влияния на значение Ct и значение флуоресценции, а стабильность при замораживании и оттаивании была высокой.

Figure 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ freeze-thaw stability verification

Рисунок 5. Проверка стабильности при замораживании-оттаивании Yeasen (Cat#13862ES) при 20℃

  • Сверхвысокая чувствительность, можно обнаружить даже 1 копию/мкл

Используя продукт Yeasen monkey pox (Cat#13862ESES), 1000 копий/мкл, 100 копий/мкл, 10 копий/мкл, 1 копия/мкл и отрицательный бланк (NTC) были использованы для обнаружения MPXV. Можно увидеть, что одна копия также может быть обнаружена (значение Ct составляет около 38), и 48-луночный тест NTC был повторен со стабильной базовой линией, отрицательными пиками NTC и без явления хвоста, с высокой чувствительностью и высокой специфичностью.

Figure 6. MPXV sensitivity detection

Рисунок 6. Определение чувствительности MPXV

Figure 7. MPXV specificity detection

Рисунок 7. Определение специфичности MPXV

  • Реагенты стабильны и воспроизводимы

Набор для обнаружения оспы обезьян Yeasen (Cat#13862ESES) был выбран для проведения 10 повторных тестов для низких, средних и высоких концентраций положительных образцов. Результаты показали, что CV положительных образцов в канале FAM был меньше или равен 2%, а пустой контроль не имел пиков и явлений размытия. , хорошая повторяемость.

Figure 8. Repeatability Test

Рисунок 8. Тест на повторяемость

6.2 Набор для ПЦР в реальном времени для определения вируса оспы обезьян (UDG Plus)(Кат. № 13863ES)

Преимущества продукта:

⑴ Эффективная и удобная эксплуатация
⑵ Высокая чувствительность и хорошая специфичность
⑶ Суперстабильность
⑷ Хорошая повторяемость
⑸ Предотвращение загрязнения UDG

6.2.1 Демонстрация случая:

  • Супертермическая стабильность при 37℃

MPXV был амплифицирован путем помещения Cat#13863ES при 37℃ на 7 и 14 дней соответственно. Результаты показывают, что после 7 и 14 дней при 37℃ не наблюдается существенного влияния на значение Ct и значение флуоресценции, а термостабильность высокая.

Figure 9. Yeasen(Cat#13863ES)37℃ accelerated 7-day, 14-day stability verification

Рисунок 9. Yeasen (Cat#13863ES) 37℃ ускоренная 7-дневная, 14-дневная проверка стабильности

  • Суперустойчивость к замораживанию-оттаиванию

Cat#13863ES был заморожен и разморожен при -20℃ в течение 50 раз для амплификации MPXV. Результаты показали, что замораживание и размораживание при -20℃ в течение 50 раз не оказало существенного влияния на значение Ct и значение флуоресценции, а стабильность замораживания и размораживания была высокой.

Figure 10. Yeasen(Cat#13863ES)-20℃ freeze-thaw stability verification

Рисунок 10. Проверка стабильности при замораживании-оттаивании Yeasen (Cat#13863ES) при -20℃

  • Высокая чувствительность и специфичность

5 копий/мкл MPXV и отрицательный бланк (NTC) были протестированы с использованием продукта оспы обезьян Yeasen (Cat#13863ESES). Результаты показали, что базовая линия была стабильной, уровень обнаружения FAM составил 100%, минимальный предел обнаружения составил 5 копий/мкл, и во время 48-луночного повторного тестирования NTC базовая линия каналов FAM и VIC была стабильной, отрицательный пик NTC не имел никакого явления размытия, и он имел высокую чувствительность и высокую специфичность.

Figure 11.MPXV Sensitivity detection

Рисунок 11. Определение чувствительности MPXV

Figure 12. MPXV specificity detection

Рисунок 12. Определение специфичности MPXV

  • Хорошая линейность реагентов

Положительный шаблон был разбавлен в 10 раз от концентрации 1×105 копий/мкл, и набор Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) использовался для повторного обнаружения дважды. Логарифм исходного числа копий - это абсцисса, а значение Ct - это ордината. Была построена стандартная кривая, и результаты показали, что канал FAM гена monkeypox имел линейный диапазон 10~1×105 копий/мкл, и R2>0,99, что имело хорошую линейную связь.

Figure 13. Linearity Test

Рисунок 13. Тест на линейность

  • Стабильные и воспроизводимые реагенты

Набор Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) был выбран для проведения 10 повторных тестов для низких, средних и высоких концентраций положительного и 20 повторных тестов для отрицательного контроля (NC) и пустого контроля (NTC). Результаты показывают, что: канал FAM CV положительных образцов составляет менее 3%, а отрицательный контроль и пустой контроль не имеют пиков и феномена хвоста; значения Ct канала VIC NC все менее 35, CV составляет менее 0,3%, а NTC не имеет пиков и феномена хвоста, и повторяемость хорошая.

Figure 14. Repeatability Test(FAM)

Рисунок 14. Тест на повторяемость (FAM)

Figure 15. Repeatability Test(VIC)

Рисунок 15. Тест на повторяемость (VIC)

7. Заказ товара

Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., основанная в 2014 году, является высокотехнологичным предприятием, занимающимся НИОКР и производством сырья для инструментальных ферментов и антигенных антител. Ее продукция включает молекулярные диагностические ферменты, белки и антитела, используемые в фармацевтике, тестировании безопасности пищевых продуктов, селекции, правосудии и других отраслях. Мы стремимся предоставлять клиентам в области наук о жизни высококачественные продукты и услуги. Руководство по покупке продукта для вируса оспы обезьян следующее:

Таблица 1.Сопутствующие товары

Тип продукта

Продукт Описание

Продукт Имя

Номер статьи

Спецификация

НАБОР

Смесь ферментов

Набор для ПЦР в реальном времени на вирус оспы обезьян (запросить)

13862ES03

24Т

13862ES48

48Т

13862ES59

96Т

Набор для ПЦР в реальном времени для определения вируса оспы обезьян

13863ES25

25Т

13863ES60

100т

13863ES80

1000Т

Псевдовирус

Ген F3L

Вирус оспы обезьян F3L-Pseudovirus (запросить)

12099ES03

1 мл

12099ES08

5 × 1 мл

Б6Р Ген

Вирус оспы обезьян B6R-псевдовирус (запросить)

12100ES03

1 мл

12100ES08

5 × 1 мл

Ссылки

[1] Китайский центр по контролю и профилактике заболеваний: Советы по охране здоровья от оспы обезьян
[2] CDC:О обезьяньей оспе | Обезьянья оспа | Поксвирус | CDC
[3] Yulin Evening News: Источник первого случая оспы обезьян в материковом Китае был определен! Чрезвычайное напоминание о контроле заболеваний в Гуанси

Расследование