Комплексное решение для обнаружения вируса оспы обезьян YEASEN
Первый подтвержденный случай оспы обезьян был зарегистрирован в Великобритании в начале мая, и он быстро распространился в неэндемичных странах и регионах. По состоянию на 21 сентября 2022 года в мире подтверждено 106 стран/регионов, в общей сложности 63 117 случаев. 16 сентября Чунцин подтвердил завезенный случай оспы обезьян, первый случай в материковом Китае, что вызвало общественную обеспокоенность.
Рисунок 1. Глобальная карта вспышек оспы обезьян в 2022 году (по данным CDC)
1. Что такое оспа обезьян?
2. История оспы обезьян
3. Как распространяется
4. Признаки и симптомы
5. Метод обнаружения
6. Соответствие продукта
7. Заказ товара
1. Что такое оспа обезьян?
Вирус оспы обезьян — это двухцепочечный ДНК-вирус общей длиной около 197 кб. Он относится к роду Orthopoxvirus семейства Poxviridae. Вирус). Существуют две ветви вируса оспы обезьян (западноафриканская ветвь и ветвь бассейна Конго). Среди них летальность западноафриканской ветви составляет около 3,6%, а летальность ветви бассейна Конго может достигать 10,6%. Образцы случаев оспы обезьян, обнаруженные в неэндемичных районах с мая 2022 года, анализ секвенирования показал западноафриканскую кладу[1].
Рисунок 2. Фотография оспы обезьян (фотография из CCDC)
2. История оспы обезьян
Оспа обезьян была обнаружена в 1958 году, когда в колониях обезьян, содержащихся для исследований, произошло две вспышки похожей на оспу болезни. Несмотря на название «оспа обезьян», источник болезни остается неизвестным. Однако африканские грызуны и нечеловекообразные приматы (например, обезьяны) могут быть носителями вируса и заражать людей[2].
Первый случай заболевания человека оспой обезьян был зафиксирован в 1970 году. До вспышки 2022 года оспа обезьян была зарегистрирована у людей в нескольких странах Центральной и Западной Африки. Ранее почти все случаи заболевания оспой обезьян у людей за пределами Африки были связаны с международными поездками в страны, где распространено это заболевание, или с импортированными животными. Эти случаи произошли на нескольких континентах[2].
3. Как распространяется
Он может передаваться от животных к человеку, от человека к человеку и из окружающей среды к человеку.
Теперь ясно, что оспа обезьян может заражать людей тремя способами: один — от инфицированных животных к людям. Вирус может проникать в организм через поврежденную кожу, дыхательные пути или слизистые оболочки (глаза, нос или рот). Второй способ — передача через тесный контакт между людьми, включая половой акт, поцелуи, объятия или прикосновение к частям тела, зараженным оспой обезьян, а также контакт с зараженной вирусом одеждой, постельным бельем, полотенцами или посудой и другими предметами, которые также могут быть инфицированы. Третий способ — передача воздушно-капельным путем[3].
4. Признаки и симптомы
Основными клиническими проявлениями являются лихорадка, сыпь и лимфаденопатия.
Наиболее распространенные симптомы на ранней стадии включают лихорадку, головную боль, мышечные боли и увеличение лимфатических узлов. Сыпь появляется через 1–3 дня после начала заболевания. Типичная сыпь сначала появляется на лице и постепенно распространяется на конечности и другие части. Сыпь в основном центробежная., высыпания на лице и конечностях встречаются чаще, чем на туловище, высыпания могут появляться на ладонях и подошвах ног, а количество высыпаний варьируется от нескольких до тысяч; также могут поражаться слизистая оболочка полости рта, пищеварительный тракт, половые органы, конъюнктива и роговица.
Симптомы обычно длятся от 14 до 21 дня, и пациенты обычно избавляются от них самостоятельно. Эритема или гиперпигментация или даже шрамы могут остаться после отпадения корочек. Стоит отметить, что корка остается заразной до тех пор, пока корка не отпадет и под ней не сформируется новый слой кожи[3].
5. Метод обнаружения
Для эффективного предотвращения и контроля эпидемии оспы обезьян и предотвращения импорта и распространения вируса глобальные компании IVD активно отреагировали. Как поставщик сырья для производства реагентов для обнаружения IVD и реагентные растворы, YEASEN предоставляет комплексное решение для эффективного обнаружения вируса оспы обезьян. От извлечения нуклеиновой кислоты до компонентов реагентов (ферментных реагентов и псевдовирусов) и полуфабрикатов наборов (праймерных зондов, ферментных реагентов и плазмидных контролей), YEASEN может поставлять вам стабильно.
Рисунок 3. Метод обнаружения вирусов
5.1 Преимущество метода
- Эффективная и удобная эксплуатация — набор комплектов, включающий все компоненты, без громоздких операций, добавление в один шаг
- Высокая чувствительность обнаружения — метод генетически модифицированных антител с горячим стартом фермента Taq, также может быть обнаружено 1 копия/реакция
- Высокая стабильность реагента — хранить при температуре 37℃ в течение 1 недели, стабильные характеристики после многократного замораживания и оттаивания.
- Предотвращение загрязнения UDG — система dUTP/UDG добавляется в систему для эффективного предотвращения риска аэрозольного загрязнения.
- Применимо к нескольким платформам — подходит для Bio-Rad CFX96, ABI Q5 и Slan
5.2 Соответствие продукта
- Реагенты для экстракции нуклеиновых кислот: MolPure™ Набор для магнитного мазка для определения вирусной ДНК/РНК (Кат. № 18300ES)
- Реагент для обнаружения оспы обезьян: Набор для ПЦР в реальном времени для определения вируса оспы обезьян(Кат. № 13862ES/Кат. № 13863ES)
- Псевдовирус оспы обезьян: Псевдовирус вируса оспы обезьян (Cat#12099ES/Cat#12100ES)
6. Рекомендуемые продукты
6.1 Набор для ПЦР в реальном времени для определения вируса оспы обезьян (кат. № 13862ES)
Преимущества продукта:
Эффективная и удобная эксплуатация
Высокая чувствительность и хорошая специфичность
Супер стабильность
Хорошая повторяемость
6.1.1 Демонстрация случая:
-
Супертермическая стабильность при 37℃
MPXV был амплифицирован путем помещения Cat#13862ES при 37℃ на 7 дней. Результаты показали, что значение Ct и значение флуоресценции не были значительно затронуты 7 днями при 37℃, а термостабильность была высокой.
Рисунок 4. Yeasen (Cat#13862ES) ускоренная 7-дневная проверка стабильности при 37℃
-
Суперустойчивость к замораживанию-оттаиванию
MPXV был амплифицирован путем замораживания и оттаивания Cat#13862ES при -20 ℃ в течение 10, 20 и 50 раз соответственно.Результаты показали, что замораживание и оттаивание 10, 20 и 50 раз при температуре -20 ℃ не оказало существенного влияния на значение Ct и значение флуоресценции, а стабильность при замораживании и оттаивании была высокой.
Рисунок 5. Проверка стабильности при замораживании-оттаивании Yeasen (Cat#13862ES) при 20℃
-
Сверхвысокая чувствительность, можно обнаружить даже 1 копию/мкл
Используя продукт Yeasen monkey pox (Cat#13862ESES), 1000 копий/мкл, 100 копий/мкл, 10 копий/мкл, 1 копия/мкл и отрицательный бланк (NTC) были использованы для обнаружения MPXV. Можно увидеть, что одна копия также может быть обнаружена (значение Ct составляет около 38), и 48-луночный тест NTC был повторен со стабильной базовой линией, отрицательными пиками NTC и без явления хвоста, с высокой чувствительностью и высокой специфичностью.
Рисунок 6. Определение чувствительности MPXV
Рисунок 7. Определение специфичности MPXV
-
Реагенты стабильны и воспроизводимы
Набор для обнаружения оспы обезьян Yeasen (Cat#13862ESES) был выбран для проведения 10 повторных тестов для низких, средних и высоких концентраций положительных образцов. Результаты показали, что CV положительных образцов в канале FAM был меньше или равен 2%, а пустой контроль не имел пиков и явлений размытия. , хорошая повторяемость.
Рисунок 8. Тест на повторяемость
6.2 Набор для ПЦР в реальном времени для определения вируса оспы обезьян (UDG Plus)(Кат. № 13863ES)
Преимущества продукта:
⑴ Эффективная и удобная эксплуатация
⑵ Высокая чувствительность и хорошая специфичность
⑶ Суперстабильность
⑷ Хорошая повторяемость
⑸ Предотвращение загрязнения UDG
6.2.1 Демонстрация случая:
-
Супертермическая стабильность при 37℃
MPXV был амплифицирован путем помещения Cat#13863ES при 37℃ на 7 и 14 дней соответственно. Результаты показывают, что после 7 и 14 дней при 37℃ не наблюдается существенного влияния на значение Ct и значение флуоресценции, а термостабильность высокая.
Рисунок 9. Yeasen (Cat#13863ES) 37℃ ускоренная 7-дневная, 14-дневная проверка стабильности
-
Суперустойчивость к замораживанию-оттаиванию
Cat#13863ES был заморожен и разморожен при -20℃ в течение 50 раз для амплификации MPXV. Результаты показали, что замораживание и размораживание при -20℃ в течение 50 раз не оказало существенного влияния на значение Ct и значение флуоресценции, а стабильность замораживания и размораживания была высокой.
Рисунок 10. Проверка стабильности при замораживании-оттаивании Yeasen (Cat#13863ES) при -20℃
-
Высокая чувствительность и специфичность
5 копий/мкл MPXV и отрицательный бланк (NTC) были протестированы с использованием продукта оспы обезьян Yeasen (Cat#13863ESES). Результаты показали, что базовая линия была стабильной, уровень обнаружения FAM составил 100%, минимальный предел обнаружения составил 5 копий/мкл, и во время 48-луночного повторного тестирования NTC базовая линия каналов FAM и VIC была стабильной, отрицательный пик NTC не имел никакого явления размытия, и он имел высокую чувствительность и высокую специфичность.
Рисунок 11. Определение чувствительности MPXV
Рисунок 12. Определение специфичности MPXV
-
Хорошая линейность реагентов
Положительный шаблон был разбавлен в 10 раз от концентрации 1×105 копий/мкл, и набор Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) использовался для повторного обнаружения дважды. Логарифм исходного числа копий - это абсцисса, а значение Ct - это ордината. Была построена стандартная кривая, и результаты показали, что канал FAM гена monkeypox имел линейный диапазон 10~1×105 копий/мкл, и R2>0,99, что имело хорошую линейную связь.
Рисунок 13. Тест на линейность
-
Стабильные и воспроизводимые реагенты
Набор Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) был выбран для проведения 10 повторных тестов для низких, средних и высоких концентраций положительного и 20 повторных тестов для отрицательного контроля (NC) и пустого контроля (NTC). Результаты показывают, что: канал FAM CV положительных образцов составляет менее 3%, а отрицательный контроль и пустой контроль не имеют пиков и феномена хвоста; значения Ct канала VIC NC все менее 35, CV составляет менее 0,3%, а NTC не имеет пиков и феномена хвоста, и повторяемость хорошая.
Рисунок 14. Тест на повторяемость (FAM)
Рисунок 15. Тест на повторяемость (VIC)
7. Заказ товара
Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., основанная в 2014 году, является высокотехнологичным предприятием, занимающимся НИОКР и производством сырья для инструментальных ферментов и антигенных антител. Ее продукция включает молекулярные диагностические ферменты, белки и антитела, используемые в фармацевтике, тестировании безопасности пищевых продуктов, селекции, правосудии и других отраслях. Мы стремимся предоставлять клиентам в области наук о жизни высококачественные продукты и услуги. Руководство по покупке продукта для вируса оспы обезьян следующее:
Таблица 1.Сопутствующие товары
Тип продукта | Продукт Описание | Продукт Имя | Номер статьи | Спецификация |
НАБОР | Смесь ферментов | Набор для ПЦР в реальном времени на вирус оспы обезьян (запросить) | 13862ES03 | 24Т |
13862ES48 | 48Т | |||
13862ES59 | 96Т | |||
Набор для ПЦР в реальном времени для определения вируса оспы обезьян | 13863ES25 | 25Т | ||
13863ES60 | 100т | |||
13863ES80 | 1000Т | |||
Псевдовирус | Ген F3L | Вирус оспы обезьян F3L-Pseudovirus (запросить) | 12099ES03 | 1 мл |
12099ES08 | 5 × 1 мл | |||
Б6Р Ген | Вирус оспы обезьян B6R-псевдовирус (запросить) | 12100ES03 | 1 мл | |
12100ES08 | 5 × 1 мл |
Ссылки
[1] Китайский центр по контролю и профилактике заболеваний: Советы по охране здоровья от оспы обезьян
[2] CDC:О обезьяньей оспе | Обезьянья оспа | Поксвирус | CDC
[3] Yulin Evening News: Источник первого случая оспы обезьян в материковом Китае был определен! Чрезвычайное напоминание о контроле заболеваний в Гуанси