Технология изотермической амплификации нуклеиновых кислот (INAAT) в основном используется в молекулярной биологии для идентификации и анализа нуклеиновых кислот. Она в основном используется для ДНК, РНК, клеточных белков, ионов, молекул и т. д. INAAT обеспечивает быструю, чувствительную и точную диагностику генетических и инфекционных заболеваний. Ее амплифицированные продукты могут использоваться в биосенсорах, биовизуализации и биомедицине. Кроме того, INAAT используется для обнаружения различных заболеваний, таких как грипп, ВИЧ, туберкулез, хламидиоз, гонорея (CT/NG), гепатит A и гепатит B и т. д. В зависимости от технологии изотермическую амплификацию можно разделить на LAMP, RPA, CPA, SDA, RCA, HDA и т. д. Так что же такое LAMP? Каковы преимущества RT-LAMP?

1. Что такое ЛАМПА?
2. Каковы преимущества RT-LAMP?
3. Каковы особенности "Cat#13762"? Набор для анализа красителей RT-LAMP (UDG plus)"?
4. Каковы особенности набора красителей «RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit» (кат. № 13906)?
5. Можно ли его лиофилизировать, превратив в лиофилизированные гранулы?
6. Какие продукты мы можем порекомендовать?

1. Что такое ЛАМПА?

В настоящее время LAMP является широко используемой технологией в области изотермической амплификации. Она использует 4-6 праймеров, которые могут идентифицировать 6 конкретных областей на целевом гене, и опирается на сильную активность смещения цепи ДНК-полимеразы Bst. Внутренняя амплификация целевого продукта может достигать 10⁹-10¹⁰ раз. Существует множество методов обнаружения LAMP, включая метод красителя, колориметрический метод pH, метод мутности, HNB, кальцеин и т. д. Недавно разработанный метод флуоресценции и наборы для обнаружения pH нашей компании обладают высокой чувствительностью, хорошей применимостью праймера и превосходными показателями специфичности, переносимости и стабильности. По сравнению с аналогичными продуктами он имеет очевидные преимущества.

2. Каковы преимущества RT-LAMP?

Простота эксплуатации: короткое время реакции, низкие требования к лабораторной среде, можно использовать с микрофлюидными чипами или портативными детекторами для быстрого обнаружения;
Чувствительность: 50 копий/Т, система 25 мкл;
Хорошая применимость праймеров: праймер N-2, праймер гена E, амплификация внутреннего референтного праймера и т. д. имеют хорошую применимость;
Специфичность: 48-луночный NTC не имеет пиков вообще, а специфичность высокая;
Переносимость: хорошая переносимость некоторых агентов, высвобождающих нуклеиновые кислоты;
Высокая стабильность: стабилен при температуре 37°C в течение 5 дней и может выдерживать многократное замораживание и оттаивание более 10 раз;
Рыночное преимущество: производительность превосходит аналогичные отечественные и зарубежные продукты-конкуренты, а соотношение цены и качества высокое.

3. Каковы особенности набора для анализа красителей RT-LAMP (UDG plus, кат. № 13762)?

3.1 Высокая чувствительность

Рисунок 1. Тест на чувствительность

Красный: 50 копий/T, ответ менее 15 минут
Синий: 25 копий/T, ответ менее 15 минут
Были протестированы два числа копий 50 копий/T и 25 копий/T соответственно. Результаты теста показали, что в течение 15 минут результаты 50 копий/T были лучше, а уровень обнаружения достиг 100%.

3.2 Пригодность грунтовки

Рисунок 2. Определение пригодности запертого праймера нуклеиновой кислоты N5

Фиолетовый: Йесен  Синий: Компания N

Рисунок 3.Анализ пригодности N-праймера

Зеленый: Йесен     Красный: Компания N

Рисунок 2, Рисунок 3: При специфическом обнаружении запертых праймеров нуклеиновой кислоты N5 и праймеров N, в соответствии с 50 копиями/T, соответствующее обнаружение проводилось с использованием брендов Yeasen и N. Результаты показали, что применимость запертых праймеров нуклеиновой кислоты N5 была лучше, чем у брендов N. Применимость праймеров N одинакова для двух продуктов.

Рисунок 4. Определение пригодности праймера ACTIN

Фиолетовый: Йесен     Синий: Компания N

15 нг 293DNA были протестированы на пригодность праймера ACTIN с использованием брендов Yeasen и N. Результаты показали, что Yeasen обладает превосходной применимостью.

3.3 Специфичность

Рисунок 5. 48-луночный анализ NTC-специфического типа

Для специфического обнаружения продукта использовалось 48-луночное обнаружение NTC, и пик не был обнаружен, что указывает на лучшую специфичность.

3.4 Толерантность

Рисунок 6. Анализ толерантности к релизеру нуклеиновой кислоты

Красный: Матрица DEPC H₂О
Зеленый: по 50% каждого агента высвобождения нуклеиновой кислоты и DEPC H₂О
Синий: 100% агент высвобождения нуклеиновых кислот
Используя матрицу DEPC H₂O, агент высвобождения нуклеиновой кислоты и DEPC H₂O с 50% и 100% агентом высвобождения нуклеиновой кислоты были протестированы соответственно. Результаты показывают, что этот продукт имеет отличную толерантность к агентам высвобождения нуклеиновой кислоты.

3.5 Стабильность

Рисунок 7. Тестирование стабильности при той же температуре

Красный: 37℃ 0 день Синий: 37℃ 1 день Зеленый: 37℃ 3 дня Фиолетовый: 37℃ 5 дней
0 дней при 37°C в качестве контроля, а испытания на стабильность проводились в течение 1, 3 и 5 дней при той же температуре, что свидетельствует о том, что препарат может сохранять относительно стабильный эффект при 37°C в течение 5 дней.

Рисунок 8. Испытание на устойчивость к многократному замораживанию-оттаиванию при температуре -20℃

Красный: Повторите замораживание-оттаивание 0 раз
Синий: Повторите замораживание-оттаивание 5 раз.
Зеленый: Повторите замораживание-оттаивание 10 раз.

Рисунок 9. Испытание на устойчивость к многократному замораживанию-оттаиванию сухого льда

Красный: Повторите замораживание-оттаивание 0 раз
Фиолетовый: Повторите замораживание-оттаивание 5 раз.
Повторный тест на стабильность замораживания-оттаивания при -20°C и сухом льду. Было обнаружено, что стабильность замораживания-оттаивания была повторена 10 раз при -20°C и 5 раз на сухом льду.

3.6 Сравнение похожих продуктов

Рисунок 10. Сравнение эффектов аналогичных продуктов

Красный: Йесен  Синий: Марка N1  Зеленый: Марка N2
При использовании праймера гена N в случае 50 копий/T с использованием Yeasen, марки N1 и марки N2 для сравнительной проверки продуктов продукты Yeasen показали хорошие результаты.

6. Какие продукты мы можем порекомендовать?

Компания Yeasen предлагает следующую продукцию.

Таблица 1.Информация о продукте