При использовании традиционных высокоточных ферментов для ПЦР неизбежно приходится сталкиваться с некоторыми сложными проблемами. Например, точность может быть недостаточной, что приводит к мутациям или делециям в целевых основаниях даже после секвенирования амплифицированных фрагментов. Время амплификации также относительно велико; иногда амплификация фрагмента размером 5 кб может занять около 2 часов. Теперь XiaoYi представляет быструю высокоточную ПЦР, которая решит ваши проблемы! -- Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (премикс для сверхбыстрой ПЦР высокой точности).
The 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (с красителем) содержит предварительно добавленный индикатор электрофореза, позволяющий напрямую использовать продукты ПЦР для электрофореза. Амплифицированные продукты имеют тупые концы. Эта высокоточная смесь ферментов обладает преимуществами быстроты, простоты, высокой чувствительности, строгой специфичности и стабильности. В реакционной системе необходимо добавлять только праймеры и матрицы. Кроме того, продукт также содержит специфический протектор, который гарантирует, что высокоточная премикс для ПЦР сохраняет стабильную активность даже после многократного замораживания и оттаивания.
Характеристики продукта
- Высокий Верность: Низкий несоответствие ставка, с а база несоответствие соотношение из 231/300,000 в высокий ГК склонный к мутациям последовательности;
- Быстрый Усиление Скорость: Расширение ставка как быстрый как 5 секунды за кб;
- Широкий Применимость: Способный из покрытие гены с 20-80% ГК содержание, терпит мышь лизаты и 20% кровь;
- Хороший Стабильность: Может быть хранится в 37°С для 7 дней без влияющий продукт производительность;
- Быстрый и Удобный: Просто добавлять грунтовки и шаблон для усиление, приходит с загрузка краситель для прямой электрофорез.
Демонстрация производительности продукта
Высокая точность, низкий уровень несоответствия
Используя геномы различных видов в качестве шаблонов, для амплификации были отобраны шесть фрагментов, богатых GC, которые сильно подвержены мутациям/потерям оснований. Соответствующие продукты ПЦР были клонированы в векторы, и 100 отдельных клонов для каждой последовательности были отобраны для секвенирования, чтобы подтвердить случаи несовпадения оснований/мутации. Результаты показали, что быстрая высокоточная мастер-смесь ПЦР (10164ES) имела превосходную скорость несовпадения оснований/мутации по сравнению с отечественными и международными брендовыми реагентами.
Время расширения может достигать 5 секунд./кб
Используя быстрый высокоточный ферментный премикс (10164ES) и Продукт T, фрагменты различной длины (0,4-10 кб) были амплифицированы из 100 нг человеческой геномной ДНК-матрицы со скоростью расширения 5 сек/кб, при этом требуемое время расширения должно было составлять 5 сек/кб. Результаты показали, что быстрый высокоточный ферментный премикс (10164ES) может амплифицировать фрагменты в пределах 10 кб со скоростью расширения 5 сек/кб.
Может амплифицировать фрагменты генов с различным содержанием GC
Использование быстрого высокоточного ферментного премикса (10164ES) для амплификации фрагментов генов с содержанием GC 23-76% из шаблонов геномной ДНК человека, с установленным временем удлинения 5 сек/кб. Результаты показали, что продукт обладает хорошей специфичностью амплификации и способен амплифицировать фрагменты с различным содержанием GC.
Способен амплифицировать фрагменты генов с различным содержанием GC
Использование быстрого высокоточного ферментного премикса (10164ES) для амплификации фрагментов различной длины из разных образцов с установленным временем удлинения 5-10 секунд на килобазу. Результаты показывают, что этот продукт демонстрирует превосходную специфичность амплификации и совместим с амплификацией различных фрагментов из разных шаблонов.
Примечание: 1. Геномная ДНК мыши 1 кб; 2. Геномная ДНК мыши 2 кб; 3. Геномная ДНК мыши 6 кб; 4. Геномная ДНК кукурузы 1 кб; 5. Геномная ДНК риса 2 кб-A; 6. Геномная ДНК риса 2 кб-B; 7. ДНК клеток человека 293 1 кб; 8. ДНК клеток человека 293 2 кб; 9. ДНК клеток человека 293 3 кб; 10. ДНК клеток человека 293 12 кб; 11. Бульон E. coli 8 кб; 12. Бульон E. coli 16 кб; 13. Геномная ДНК риса 10 кб-A; 14. Геномная ДНК риса 10 кб-B; 15. Геномная ДНК риса 10 кб-C; 16. Геномная ДНК риса 20 кб-A; 17. Геномная ДНК риса 20 кб-B; 18. Прямая амплификация крови человека 3 кб.
Высокая скорость обнаружения амплификации шаблона у разных видов
Используя быстрый высокоточный ферментный премикс (10164ES), были амплифицированы различные фрагменты содержимого GC в диапазоне от 0,5 до 10 кб в Arabidopsis, рапсе и картофеле со временем удлинения 5 сек/кб. Результаты показали, что быстрый высокоточный ферментный премикс (10164ES) может обеспечить успешную амплификацию.
Используя быстрый премикс фермента высокой точности (10164ES), были амплифицированы случайные последовательности (случайно выбранные) из Arabidopsis, рапса, плодовых мушек, Caenorhabditis elegans и данио-рерио с размерами фрагментов в диапазоне 0,5-10 кб и охватывающими 20-80% содержания GC. Время удлинения было установлено на уровне 5 сек/кб. Результаты показали, что быстрый премикс фермента высокой точности (10164ES) имеет высокую скорость обнаружения.
Хорошая устойчивость
Используя быстрый высокоточный ферментный премикс (10164ES), который был ускорен нагреванием и хранился при 37℃ в течение 3 и 7 дней соответственно, для амплификации фрагментов ДНК размером 3 кб и 5 кб из 100 нг геномной ДНК человека, со временем удлинения, установленным на 5 сек/кб. Результаты показывают, что продукт обладает хорошей стабильностью.
Отзывы клиентов о пробной версии
Животное гДНК-120bp-50%GC
Оценка клиента: Процесс ПЦР быстрый, полосы соответствующие и могут быть напрямую загружены в электрофорез агарозного геля. Полосы марки N смещены вверх, что может быть связано с влиянием ее собственного буфера, и поскольку буфер загрузки не добавлялся, этот продукт может заменить высокоточный фермент в моем текущем экспериментальном протоколе.
Растение кДНК-729bp-45.13%GC
Оценка клиентов: По сравнению с маркой T, полосы клонирования более четкие и однородные, а весь процесс ПЦР происходит быстрее. Нет необходимости добавлять дополнительный краситель при запуске геля, что очень удобно и экономит время.
Микробный гДНК-1158、1953bp-58.8%、52.9%GC
Оценка клиентов: По сравнению с брендом V эффект сопоставим, но лично я нахожу его даже лучше.
Растение кДНК-2000bp-40%GC
Оценка клиента: Эффект очень хороший, полоска прозрачная.
Руководство по выбору высокоточной ПЦР
| Позиционирование продукта | Название продукта | Кот# |
| 5с/кб, обеспечивает точность и скорость (с Краситель) | 10164ES | |
| 5с/кб, обеспечивает точность и скорость (без красителя) | 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix | 10163ES |
| 83×Taq, высокая скорость обнаружения (с красителем) | 2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (с красителем) | 10154ES |
| 83×Taq один фермент + буфер раздельный | 10153ES |