Сценарии применения продукта

1. Удаление остаточных нуклеиновых кислот в биопрепаратах: в процессе производства биопрепаратов, таких как вирусы, вакцины и белки, можно добавлять UltraNuclease для разрушения остаточных нуклеиновых кислот. Этот шаг не только увеличивает выход вирусов, но и значительно снижает содержание остаточных нуклеиновых кислот, тем самым обеспечивая безопасность и эффективность препаратов.
2. Снижение вязкости: за счет деградации нуклеиновых кислот снижается вязкость клеточных лизатов, что облегчает процессы фильтрации/ультрафильтрации во время очистки частиц, полученных из клеток, таких как вирусы, векторы AAV и тельца включения.
3. Улучшенное разрешение и восстановление: в анализах ELISA, двумерном электрофорезе и иммуноблоттинге улучшается разрешение и восстановление.
4. Предотвращение агрегации клеток: UltraNuclease может эффективно предотвращать агрегацию мононуклеарных клеток периферической крови человека (PBMC).

Влияние различных условий реакции на активность фермента

Для исследования оптимальных условий работы UltraNuclease мы изучили влияние различных буферных систем на активность фермента.

Сравнительный анализ конкурирующих продуктов (от компании А)

Эффективность UltraNuclease соответствует показателям компании A и позволяет достичь эффекта замены.

Стандарт контроля качества соответствует стандарту производства GMP.

Элементы обнаружения	Стандарты качества	Метод обнаружения
Активность ферментов	250-300 МЕ/мкл	Универсальный метод подложки
Специфическая деятельность	≥1.5×106 Ед/мг	Универсальный метод подложки
Чистота белка	≥99%	SDS-ПААГ
Протеаза	Соответствует требованиям	Универсальный метод подложки
Бактериальный эндотоксин	Соответствует требованиям	Метод геля
Белок хозяина	Отрицательно	Метод ИФА
ДНК хозяина	Отрицательно	метод ПЦР
Стерильное тестирование	Стерильный рост	Общее правило 1101
Обнаружение патогенов	Отрицательно (не обнаружено)	Обратитесь к внутреннему методу
Тестирование на микоплазму	Отрицательно (не обнаружено)	Обратитесь к внутреннему методу
Тестирование на тяжелые металлы	Соответствует требованиям	Общее правило 0821

Чтобы соответствовать использованию UltraNuclease, Yeasen также независимо разработала специальный набор для обнаружения UltraNuclease, который может эффективно обнаруживать остаточный фермент и снижать риски. Набор для обнаружения остатков Yeasen UltraNuclease был разработан в соответствии с Руководством по валидации аналитических методов Китайской фармакопеи 2020 г. <9101> и строго соответствует основным требованиям многопараметрического тестирования (линейный диапазон, специфичность, точность, прецизионность, чувствительность, ускоренная стабильность и т. д.).

Остаточное обнаружение ультрануклеазы

На обычных этапах очистки UltraNuclease легко удаляется как примеси. Для того чтобы обнаружить определенное остаточное количество всемогущей UltraNuclease, ее часто используют в качестве стандартного продукта в промышленности, и разрабатывается соответствующий набор для ИФА.

UCF.ME® Ультрануклеаза Набор ELISA, независимо разработанный Yeasen, использует принцип иммуноферментного анализа с двойными антителами (сэндвич-ELISA), который позволяет точно определять остаточное количество UltraNuclease в образцах. Набор стабилен по линейности, повторяемости, скорости восстановления и специфичности.

Принцип работы набора Yeasen UltraNuclease ELISA (двухсайтовый иммуноферментный анализ)

Характеристики продукта:

Соответствие нормативным требованиям: Полностью проверено в соответствии с нормативными требованиями, имеются отчеты о проверке; Гарантия качества: Все исходные материалы для набора разрабатываются независимо, что обеспечивает контроль качества;

Высокая чувствительность: количественный предел всего 23.5 пг/мл;

Высокая точность: высокая внутрипартийная повторяемость и низкая межпартийная изменчивость;

Высокая специфичность: отсутствие перекрестной реакции с другими сконструированными клеточными белками.

Параметры производительности:

Параметры продукта	содержание
Время анализа	3,5 часа
Принцип анализа	Двухцентровой иммуноферментный анализ
Усиление сигнала	Система биотин-стрептавидин
Длина волны обнаружения	450 нм и 630 нм
Чувствительность	23,5 пг/мл
Диапазон обнаружения	0,047~3 нг/мл
Объект обнаружения	Ультрануклеаза
Применимый инструмент	Молекулярные устройства: серии M и i
Приложение	Обнаружение остаточной ультрануклеазы в процессах очистки клеточной и генной терапии и рекомбинантных аденоассоциированных вирусных вакцин

Данные о продукте:

Стандартная кривая набора реагентов:

Фактический эксперимент по извлечению образца:

UltraNuclease была добавлена ​​в 5 мкг/мл растворы для лизиса клеток (HEK293, E.coli, CHO и Vero) независимо с конечной концентрацией 1,5 нг/мл. Точность в различных образцах клеток показала себя превосходной, чем у других поставщиков.

Демонстрация специфики

Заключение: Тестовый набор обладает высокой специфичностью, перекрестной реакции нет; попарные сравнения, «*» Значительное отличие от отрицательного образца; «NS» Нет существенной разницы с отрицательным образцом.

Точность:

Повторяемость:

Концентрация нг/мл	6 дублированных дат на одной пластине						Значение CV
3	2.412	2.390	2.323	2.367	2.476	2.291	2,53%
1.5	1.780	1.883	1.884	1.908	1.876	1.883	2.19%
0,75	1.123	1.215	1.166	1.183	1.140	1.109	3,12%
0,375	0,691	0,706	0,708	0,722	0.722	0,679	2.21%
0,1875	0,449	0,462	0,453	0,460	0,447	0,433	2.13%
0,094	0,306	0,308	0,304	0,311	0,295	0,302	1,65%
0,047	0,242	0,241	0.240	0,241	0,256	0.240	2.37%
0	0,183	0,192	0,189	0,187	0,189	0,189	1,43%

Заключение: было протестировано 6 дубликатов при каждой концентрации на стандартной кривой, и все значения CV% были ниже 5%.

Средняя точность:

Средняя точность
Концентрация образца	1,5 нг/мл	0,375 нг/мл	0,094 нг/мл
Аналитик 1	1.388	0,382	0,079
Аналитик 2	1.458	0,363	0,068
Аналитик 3	1.318	0,37	0,063
Средний	1.388	0,372	0,07
СД	0,070	0,010	0,008
Значение CV	5.04%	2,59%	11,69%

3 аналитика провели эксперимент UCF.ME™ UltraNuclease ELISA, и CV% оказался ниже 15%

Информация о продукте:

Название продукта	Продукт число	Технические характеристики продукта
UCF.ME®UltraNuclease GMP-класса (Бензоназа)	20157ES25/50/60/80/90	25КУ/50КУ/100КУ/1МУ/5МУ
УЦФ.Набор для ИФА ME® UltraNuclease	36701ES59	96Т

Другие сопутствующие товары

Название продукта	Продукт число	Технические характеристики продукта
Соль Активная УльтраНуклеаза GMP класса	20159ES25/50/60/80/90	25КУ/50КУ/100КУ/1МУ/5МУ
Набор для ИФА с солевой активностью ультрануклеазы	36703ES96	96Т