Produktintroduktion

Kollagenas är en klass av endonukleaser som specifikt kan känna igen Pro-X-Gly-Pro-sekvensen (som förekommer ofta i kollagen och sällan finns i andra proteiner), och klyver peptidbindningen mellan den neutrala aminosyran (X) och glycin (Gly) i denna sekvens, och kan hydrolysera kollagen i bindväv.

Många proteaser är kapabla att hydrolysera enkelsträngade och denaturerade kollagenpeptider, men kollagenas är det enda proteaset som kan bryta ned naturliga kollagenfibrer med en tresträngad supercoiled struktur och finns allmänt i bindväv, varav den mest potenta är det "råa" kollagenaset som utsöndras av den anaeroba histolytiska bakterien Clostridium .

Yeasen kollagenas härrör från Clostridium histolyticum, som är ett enzym "grovt" extrakt, som inte bara innehåller kollagenas som kan bryta ned naturligt kollagen och retikulära fibrer, utan också innehåller några andra proteaser såsom polysackaridaser, lipaser, etc., som effektivt kan hydrolysera andra proteiner och polysackarider i vävnaderna, polysackarider och extracellulära matrix. epitelvävnad, så det är mer lämpligt för vävnadssmältning.

För närvarande är det bakteriella kollagenaset på marknaden huvudsakligen uppdelat i fem typer beroende på skillnaden i aktiviteten av kollagenas: kollagenas typ I, typ II, typ III, typ IV och typ V.

Val av kollagenas

Produktnamn	Utseende	Enzymaktivitet	Tillämpningsområde
Typ I kollagenas)	Brunt eller brunt kristallint pulver	≥250 U/mg fast substans	Innehåller (kollagenas, kaseinas, clostridia och trypsin) aktivitet för isolering av epitel-, lung-, fett- och binjurevävnadsceller.
Typ II kollagenas)	Brunt eller brunt kristallint pulver	≥125 U/mg fast substans	Innehåller mer klostridasaktivitet och är lämplig för isolering av lever-, ben-, sköldkörtel-, hjärt- och spottkörtelvävnadsceller
Typ III kollagenas)	Brunt eller brunt kristallint pulver	≥100 U/mg fast substans	Den innehåller låg proteolytisk aktivitet, som är effektiv för kopplingsdelen av matsmältningsvävnad, och används ofta för dissociering av däggdjursvävnadsceller
Typ IV kollagenas)	Brunt eller brunt kristallint pulver	≥125 CDU/mg fast*	Innehåller låg trypsinaktivitet och används ofta i cellförberedelser för ö- och receptorintegritet
Typ V kollagenas)	Brunt eller brunt kristallint pulver	≥125 CDU/mg fast*	Innehåller minst 7 proteaskomponenter, som kan användas för isolering av bukspottkörtelövävnad och separering av bindväv i enstaka celler

*CDU = kollagen digestion enheter

Produktegenskaper

1. Hög matsmältningseffektivitet: det råa enzymextraktet av Clostridium histolyticum har hög matsmältningseffektivitet för vävnader.
2. Beroende på aktivatorer: kollagenas måste förlita sig på aktiviteten hos aktiverande enzymer som tvåvärda katjoner som Ca²⁺och Zn²⁺.
3. Påverkad av inhibitorer: inhibitorer av kollagenas inkluderar EDTA, EGTA, etc.; den andra är tungmetalljoner (Hg²⁺, Pb²⁺, Cd²⁺); Det finns även vissa kemiska medel som cystein, histidin, DTT, 2-merkaptoetanol, o-fenantrolin etc. som också har hämmande effekter på kollagenas.
4. Stark interferensresistens: kollagen kommer inte att påverkas av serumet som används för att odla celler.

Försiktighetsåtgärder för användning

1. Användning: Lös upp i Hank's, Earle's eller andra balanserade saltlösningar, den rekommenderade arbetskoncentrationen är 0,05% ~0,5% (w/v)
2. Förvaringstemperatur: 2-8°C
3. Användningsförslag:

(1) För studiet av kollagenstruktur och biosyntes används ofta kollagenaspreparat med högre renhet, och inga andra proteolytiska aktiviteter används.

(2) För vävnadsdissociation används ofta råa kollagenaspreparat, såsom elastas, trypsin eller papain.

FAQ

1. Dålig matsmältning under experimentet

(1) Om det orsakas av svag enzymaktivitet eller otillräckliga kalciumjoner, bör kollagenas förvaras under låg temperatur och torra förhållanden, och kollagenaslösning bör frysas efter alikvotering

(2) Om det orsakas av otillräckliga kalciumjoner bör koncentrationen av kalciumjoner i kollagenaslösningen vara 5 mM

2. Celldöd inträffar under användning

(1) Om det finns ett överskott av proteas, bör proteaskontakttiden minskas eller albumin eller inaktiverat serum bör tillsättas

(2) Om pH ändras, bör en buffert (t.ex. HBSS) användas; Kontrollera och justera ditt pH ofta

(3) Om det finns för lite syre bör matsmältningslösningen ventileras med steril luft

3. Celler skadades under experimentet

Om det orsakas av för mycket proteas ska mängden proteas minskas eller albumin eller inaktiverat serum tillsättas

Beställning

Katalognummer	Produktnamn	Storlek
40507ES60	Kollagenas I	100 mg, 1 g
40508ES60	Kollagenas II	100 mg, 1 g
40509ES60	Kollagenas III	100 mg
40510ES60	Kollagenas IV	100 mg, 1 g
40511ES60	Kollagenas V	100 mg

Relaterade produktrekommendationer

Katalognummer	Produktnamn	Storlek
40123ES60	PerfCel™l Trypsin-EDTA (0,25%), fenolröd	100 ml
40124ES60	PerfCell™ Trypsin utan EDTA (0.25%), inget fenolrött	100 ml
40126ES60	PerfCell™ Trypsin (0,25 %), fenolröd	100 ml
40127ES60	PerfCell™ Trypsin-EDTA (0,25%), fenolröd	100 ml
40101ES25	Trypsin 1:250 (pulver)	25 g
40512ES10/60	PerfCell™ rekombinant trypsin（pulver）	10 mg/100 mg
20416ES60	Rekombinant trypsin（MS-SAFE）	100 µg
40134ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 ml
40135ES60	PerfCell Tryzyme™Express	100 ml
40506ES60	ACCUTASE	100 ml
40104ES60/80	Dispase II	100 mg/1 g