Det första bekräftade fallet av apkoppor rapporterades i Storbritannien i början av maj, och det bröt snabbt ut i icke-endemiska länder och regioner. Den 21 september 2022 har 106 länder/regioner bekräftats över hela världen, med totalt 63 117 fall. Den 16 september bekräftade Chongqing ett importerat fall av apkoppor, det första fallet på Kinas fastland, som väckte social oro.

Figur 1. Global karta över Monkeypox-utbrottet 2022 (från CDC)

1. Vad är Monkeypox?
2. Monkeypoxens historia
3. Hur det sprider sig
4. Tecken och symtom
5. Detektionsmetod
6. Produktmatchning
7. Produktbeställning

1. Vad är Monkeypox?

Monkeypox-virus är ett dubbelsträngat DNA-virus med en total längd på cirka 197 kb. Det tillhör släktet Orthopoxvirus i familjen Poxviridae. Virus). Det finns två grenar av appoxviruset (västafrikanska grenen och grenen av Kongobäckenet). Bland dem är antalet dödsfall i den västafrikanska grenen cirka 3,6 %, och antalet dödsfall i grenen Kongobäcken kan nå 10,6 %. Prover av apkoppor som hittats i icke-endemiska områden sedan maj 2022, sekvensanalys visade den västafrikanska kladden^[1].

Figur 2. Monkeypox bild (bild från CCDC)

2. Monkeypoxens historia

Monkeypox upptäcktes 1958 när två utbrott av en poxliknande sjukdom inträffade i kolonier av apor som hölls för forskning. Trots att den heter "monkeypox" är källan till sjukdomen fortfarande okänd. Men afrikanska gnagare och icke-mänskliga primater (som apor) kan härbärgera viruset och infektera människor^[2].
Det första mänskliga fallet av apkoppor registrerades 1970. Före utbrottet 2022 hade apkoppor rapporterats hos människor i flera central- och västafrikanska länder. Tidigare var nästan alla fall av apkoppor hos människor utanför Afrika kopplade till internationella resor till länder där sjukdomen ofta förekommer eller genom importerade djur. Dessa fall inträffade på flera kontinenter^[2].

3. Hur det sprider sig

Det kan spridas från djur till människor, från människor till människor och från miljön till människor.
Det är nu klart att apkoppor kan infektera människor på 3 sätt: Det ena är från infekterade djur till människor. Viruset kan komma in i kroppen genom trasig hud, luftvägar eller slemhinnor (ögon, näsa eller mun). Den andra överförs genom nära kontakt mellan människor, inklusive samlag, kyssar, kramar eller beröring av kroppsdelar av appox, och kontakt med virusförorenade kläder, sängkläder, handdukar eller serviser och andra föremål som också kan vara infekterade. Den tredje är överföringen av andningsdroppar^[3].

4. Tecken och symtom

De huvudsakliga kliniska manifestationerna är feber, hudutslag och lymfadenopati.
De vanligaste symtomen i det tidiga skedet är feber, huvudvärk, muskelvärk och svullna lymfkörtlar. Utslagen uppträder 1 till 3 dagar efter sjukdomsdebut. Det typiska utslaget uppträder först i ansiktet och sprider sig gradvis till armar och ben och andra delar. Utslagen är mestadels centrifugal., utslag i ansikte och lemmar är vanligare än på bålen, utslag kan uppträda på handflatorna och fotsulorna, och antalet utslag varierar från flera till tusentals; det kan också involvera munslemhinnan, matsmältningskanalen, könsorganen, bindhinnan och hornhinnan.
Symtomen varar i allmänhet 14 till 21 dagar, och patienterna löser dem vanligtvis på egen hand. Erytem eller hyperpigmentering eller till och med ärr kan finnas kvar efter att sårskorporna faller av. Det är värt att notera att sårskorpan förblir smittsam tills sårskorpan faller av och ett nytt lager hud bildas under^[3].

5. Detektionsmetod

För att effektivt förhindra och kontrollera appoxepidemin och förhindra att viruset importeras och sprids, har globala IVD-företag reagerat aktivt. Som leverantör av IVD-detektionsreagensproduktionsråvaror och reagenslösningar tillhandahåller YEASEN en komplett lösning för att effektivt upptäcka appoxviruset. Från nukleinsyraextraktion till reagenskomponenter (enzymreagens och pseudovirus) och halvfärdiga kit (primerprober, enzymreagens och plasmidkontroller), YEASEN kan leverera stabilt till dig.

Figur 3. Virusdetektionsmetod

5.1 Metodfördel

• Effektiv och bekväm drift—en uppsättning kit, inklusive alla komponenter, utan besvärliga operationer, ettstegstillägg
• Hög detektionskänslighet—Gentiskt modifierad antikroppsmetod hot-start Taq-enzym, 1 kopia/reaktion kan också detekteras
• Stark reagensstabilitet - Lagra vid 37 ℃ i 1 vecka, stabil prestanda efter upprepad frysning och upptining
• UDG Pollution Prevention—dUTP/UDG-systemet läggs till systemet för att effektivt förhindra risken för aerosolkontamination.
• Tillämplig på flera plattformar – Lämplig för Bio-Rad CFX96, ABI Q5 och Slan

5.2 Produktmatchning

• Nukleinsyraextraktionsreagenser: MolPure™ Viralt DNA/RNA-kit med magnetpinnar (Katt#18300ES)
• Monkeypox detektionsreagens: Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit(Katt#13862ES/Katt#13863ES)
• Monkeypox pseudovirus: Monkeypox virus Pseudovirus (Cat#12099ES/Cat#12100ES)

6. Rekommenderade produkter

6.1 Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit (Cat#13862ES)

Produktfördelar:
Effektiv och bekväm drift
Hög sensitivitet och bra specificitet
Super stabilitet
Bra repeterbarhet

6.1.1 Case Show:

• Super termisk stabilitet för 37 ℃

MPXV förstärktes genom att placera Cat#13862ES vid 37 ℃ under 7 dagar. Resultaten visade att Ct-värdet och fluorescensvärdet inte påverkades signifikant efter 7 dagar vid 37 ℃, och den termiska stabiliteten var stark.

Figur 4. Yeasen (Cat#13862ES) 37℃ accelererad 7-dagars stabilitetsverifiering

• Super frys-tina stabilitet

MPXV amplifierades genom frysning och upptining av Cat#13862ES vid -20 ℃ 10 gånger, 20 gånger respektive 50 gånger.Resultaten visade att frysning och upptining 10 gånger, 20 gånger och 50 gånger vid -20 ℃ inte hade någon signifikant effekt på Ct-värdet och fluorescensvärdet, och frys- och upptiningsstabiliteten var stark.

Figur 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ frys-upptining stabilitetsverifiering

• Ultrahög känslighet, 1 kopior/μL kan också detekteras

Med användning av Yeasen monkeypox-produkt (Cat#13862ESES), användes 1000 kopior/μL, 100 kopior/μL, 10 kopior/μL, 1 kopia/μL och negativ blank (NTC) för att detektera MPXV. Det kan ses att en enda kopia också kan detekteras (Ct-värdet är runt 38), och NTC-testet med 48 brunnar upprepades, med en stabil baslinje, negativa NTC-toppar och inget svansfenomen, med hög sensitivitet och hög specificitet.

Figur 6. MPXV-känslighetsdetektering

Figur 7. MPXV-specificitetsdetektion

• Reagenser är stabila och reproducerbara

Yeasen monkeypox-detektionskit (Cat#13862ESES) valdes ut för att utföra 10 upprepade tester för låga, medelhöga och höga koncentrationer av positiva prover. Resultaten visade att CV för de positiva proverna i FAM-kanalen var mindre än eller lika med 2 %, och blankkontrollen hade ingen topp- eller svansfenomen. , bra repeterbarhet.

Figur 8. Repeterbarhetstest

6.2 Monkeypox Virus Real Time qPCR Kit (UDG Plus)(Katt#13863ES)

Produktfördelar:

⑴ Effektiv och bekväm drift
⑵ Hög känslighet och bra specificitet
⑶ Super stabilitet
⑷ Bra repeterbarhet
⑸ UDG Pollution Prevention

6.2.1 Case Show:

• Super termisk stabilitet för 37 ℃

MPXV amplifierades genom att placera Cat#13863ES vid 37 ℃ under 7 dagar respektive 14 dagar. Resultaten visar att efter 7 dagar och 14 dagar vid 37 ℃ finns det ingen signifikant effekt på Ct-värdet och fluorescensvärdet, och den termiska stabiliteten är stark.

Figur 9. Yeasen(Cat#13863ES) 37℃ accelererad 7-dagars, 14-dagars stabilitetsverifiering

• Super frys-tina stabilitet

Cat#13863ES frystes och tinades vid -20 ℃ i 50 gånger för att förstärka MPXV. Resultaten visade att frysning och upptining vid -20 ℃ under 50 gånger inte hade någon signifikant effekt på Ct-värdet och fluorescensvärdet, och frysnings- och upptiningsstabiliteten var stark.

Figur 10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃ frys-upptining stabilitetsverifiering

• Hög känslighet och specificitet

5 kopior/μL MPXV och negativ blank (NTC) testades med Yeasen monkeypox-produkt (Cat#13863ESES). Resultaten visade att baslinjen var stabil, detektionshastigheten för FAM var 100 %, den lägsta detektionsgränsen var 5 kopior/μL, och under de 48-brunnars upprepade testerna av NTC var baslinjen för FAM- och VIC-kanaler stabil, den NTC-negativa toppen hade inte något svansfenomen och den hade hög specificitet.

Figur 11.MPXV Känslighetsdetektering

Figur 12. MPXV-specificitetsdetektion

• God linjäritet av reagenser

Den positiva mallen späddes ut 10 gånger från koncentrationen 1 × 105 kopior/μL, och Yeasen qPCR monkeypox-kit (Cat#13863ES) användes för att upprepa detektionen två gånger. Logaritmen för det initiala kopietalet är abskissan och Ct-värdet är ordinatan. Standardkurvan gjordes och resultaten visade att FAM-kanalen för appoxgenen hade ett linjärt intervall på 10~1×105 kopior/μL och R2>0,99, vilket hade ett bra linjärt samband.

Figur 13. Linjäritetstest

• Stabila och reproducerbara reagenser

Yeasen qPCR monkeypox-kit (Cat#13863ES) valdes för att utföra 10 upprepade tester för låga, medelhöga och höga koncentrationer av positiva och 20 upprepade tester för negativ kontroll (NC) och blankkontroll (NTC). Resultaten visar att: FAM-kanal CV för positiva prover är mindre än 3 %, och den negativa kontrollen och blankkontrollen har inga topp- och svansfenomen; Ct-värdena för VIC-kanal NC är alla mindre än 35, CV är mindre än 0,3 %, och NTC har ingen peaking och inget svansfenomen, och repeterbarheten är god.

Figur 14. Repeterbarhetstest (FAM)

Figur 15. Repeterbarhetstest (VIC)

7. Produktbeställning

Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., grundat 2014, är ett högteknologiskt företag som är engagerat i FoU och produktion av verktygsenzymråmaterial och antigenantikroppar. Dess produkter inkluderar molekylära diagnostiska enzymer, proteiner och antikroppar som används i läkemedel, livsmedelssäkerhetstestning, avel, rättvisa och andra industrier. Vi har åtagit oss att förse kunder inom biovetenskap med högkvalitativa produkter och tjänster. Riktlinjerna för produktköp för Monkeypox Virus är följande:

Tabell 1.Relaterade produkter

Referenser

[1] Kinesiskt centrum för sjukdomskontroll och förebyggande: Monkeypox Health Tips
[2] CDC:Om Monkeypox | Apkoppor | Poxvirus | CDC
[3] Yulin Evening News: Källan till det första appoxfallet på Kinas fastland har identifierats! Nödpåminnelse om Guangxi sjukdomskontroll