Isotermisk nukleinsyraförstärkningsteknologi (INAAT) används främst inom molekylärbiologi för att identifiera och analysera nukleinsyror. Den används främst för DNA, RNA, cellulära proteiner, joner, molekyler etc. INAAT ger en snabb, känslig och korrekt diagnos av genetiska och infektionssjukdomar. Dess förstärkta produkter kan användas i biosensorer, bioavbildning och biomedicin. Dessutom används INAAT för att upptäcka olika sjukdomar som influensa, HIV, tuberkulos, klamydia, gonorré (CT/NG), hepatit A och hepatit B etc. enligt tekniken kan isotermisk amplifiering delas in i LAMP, RPA, CPA, SDA, RCA, HDA etc. Så vad är LAMP? Vilka är fördelarna med RT-LAMP?

1. Vad är LAMPA?
2. Vilka är fördelarna med RT-LAMP?
3. Vilka är funktionerna i "Cat#13762 RT-LAMP Dye Assay Kit (UDG plus)"?
4. Vilka egenskaper har "Cat#13906 RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit"?
5. Kan det frystorkas till frystorkade pärlor?
6. Vilka produkter kan vi rekommendera?

1. Vad är LAMPA?

LAMP är för närvarande en mycket använd teknologi inom området isotermisk förstärkning. Den använder 4-6 primrar som kan identifiera 6 specifika regioner på målgenen och förlitar sig på den starka strängförskjutningsaktiviteten hos Bst DNA-polymeras. Den interna förstärkningen av målprodukten kan nå 10⁹-10¹⁰ gånger. Det finns många LAMP-detektionsmetoder, inklusive färgmetoden, pH-kolorimetrisk metod, grumlighetsmetod, HNB, calcein, etc. Vårt företags nyutvecklade fluorescensmetoder och pH-detektionssatser har hög känslighet, god primertillämpbarhet och utmärkt prestanda i specificitet, tolerans och stabilitet. Jämfört med liknande produkter har det uppenbara fördelar.

2. Vilka är fördelarna med RT-LAMP?

Lätt att använda: kort reaktionstid, låga krav på laboratoriemiljö, kan användas med mikrofluidchip eller bärbara detektorer för snabb detektering;
Känslighet: 50 kopior/T, 25 μL system;
Bra primertillämpbarhet: N-2-primer, E-genprimer, intern referensprimeramplifiering, etc. har god tillämpbarhet;
Specificitet: 48-brunnars NTC har inga toppar alls, och specificiteten är stark;
Tolerans: god tolerans mot vissa nukleinsyrafrisättningsmedel;
Hög stabilitet: stabil vid 37°C i 5 dagar med god stabilitet, och tål upprepad frysning och upptining mer än 10 gånger;
Marknadsfördel: Prestandan är överlägsen liknande inhemska och utländska konkurrerande produkter, och kostnadsprestandan är hög.

3. Vilka funktioner har "Cat#13762 RT-LAMP Dye Assay Kit (UDG plus)"?

3.1 Hög känslighet

Figur 1. Känslighetstest

Röd: 50 kopior/T, svar mindre än 15 minuter
Blå: 25 exemplar/T, svar mindre än 15 minuter
De två kopiorna på 50 exemplar/T respektive 25 exemplar/T testades. Testresultaten visade att inom 15 minuter fungerade resultaten av 50 kopior/T bättre och upptäcktsgraden nådde 100 %.

3.2 Primers lämplighet

Figur 2. Lämplighetsdetektering för N5 Locked Nucleic Acid Primer

Lila: Yeasen  Blå: N Company

Figur 3.N primer lämplighetsanalys

Grön: Yeasen     Röd: N Company

Figur 2, Figur 3: I den specifika detekteringen av N5-låsta nukleinsyraprimrar och N-primrar, enligt 50 kopior/T, utfördes motsvarande detektion med användning av Yeasen- och N-märken. Resultaten visade att användbarheten av N5-låsta nukleinsyraprimrar var bättre än för N-märken. Tillämpbarheten av N-primers är densamma för de två produkterna.

Figur 4. Detektion av lämplighet för ACTIN Primer

Lila: Yeasen     Blå: N Company

15 ng av 293DNA testades med avseende på lämplighet för ACTIN-primer med Yeasen- och N-märken. Resultaten visade att Yeasen hade utmärkt användbarhet.

3.3 Specificitet

Figur 5. 48-brunnars NTC-specifik analys

48-brunnars NTC-detektion användes i den specifika detektionen av produkten, och ingen topp detekterades, vilket tyder på att specificiteten var bättre.

3.4 Tolerans

Figur 6. Nukleinsyrafrisättande toleransanalys

Röd: Matrix DEPC H₂O
Grönt: 50 % vardera av nukleinsyrafrisättningsmedel och DEPC H₂O
Blå: 100 % nukleinsyrafrisättningsmedel
Använder matris DEPC H₂O, nukleinsyrafrisättningsmedel och DEPC H₂O med 50 % respektive 100 % nukleinsyrafrisättningsmedel testades. Resultaten visar att denna produkt har utmärkt tolerans mot nukleinsyrafrisättningsmedel.

3.5 Stabilitet

Figur 7. Stabilitetstestning vid samma temperatur

Röd: 37℃ 0 dag Blå: 37℃ 1 dag Grön: 37℃ 3 dagar Lila: 37℃ 5 dagar
0 dagar vid 37°C som kontroll och stabilitetstester utfördes under 1, 3 och 5 dagar vid samma temperatur, vilket indikerar att det fortfarande kan bibehålla en relativt stabil effekt vid 37°C under 5 dagar.

Figur 8. -20℃ upprepat frys-upptiningsstabilitetstest

Röd: Upprepa frys-upptining 0 gånger
Blå: Upprepa frys-upptining 5 gånger
Grön: Upprepa frys-upptining 10 gånger

Figur 9. Upprepad frys-upptining stabilitetstest av torris

Röd: Upprepa frys-upptining 0 gånger
Lila: Upprepa frys-tina 5 gånger
Upprepad frys-tina stabilitetstest vid -20°C och torris. Det visade sig att stabiliteten för frys-upptining upprepades 10 gånger vid -20°C och 5 gånger på torris.

3.6 Jämförelse av liknande produkter

Figur 10. Jämförelse av effekterna av liknande produkter

Röd: Yeasen  Blå: Märke N1  Grön: Märke N2
Genom att använda primer N-genprimern, i fallet med 50 kopior/T, med Yeasen, varumärke N1 och varumärke N2 för produktjämförelseverifiering, presterade Yeasen-produkterna bra.

6. Vilka produkter kan vi rekommendera?

Produkterna som tillhandahålls av Yeasen är följande.

Tabell 1.Produktinformation