HiActi™ Cytokiner validerade i odlade organoider

År 2021 kommer organoider att listas som ett nyckelprojekt i den nationella nyckelforsknings- och utvecklingsplanen "14:e femårsplanen". Organoider är så heta, och sättet att få dem har också blivit i fokus. Olika organoider kräver olika cytokiner under odling. Genom att lägga till cytokiner som främjar eller hämmar specifika signalvägar kan stamceller fås att differentiera till önskade organoider. Det mest klassiska cytokinodlingsprotokollet i organoidkultur är WNER (respektive: Wnt-3a, Noggin, EGF och R-Spondiner), och ökningen eller minskningskombinationen av dessa 4 faktorer kan tillämpas på nästan alla organoidodlingsexperiment.

Cytokiner som vanligtvis används i organoidkultur

R-Spodin 1

Fungera: R-Spodin 1 tillhör Rspo-familjen av Wnt-regulatorer, som inkluderar 4 medlemmar, nämligen Rspo1-4. Denna familj är en mikromiljöfaktor som upprätthåller vuxna stamceller i flera organ. RSPO1 är ett utsöndrat aktivatorprotein. Rspo-1 uttrycks i vissa regioner av det utvecklande centrala nervsystemet och finns även i binjuren, äggstockarna, testiklarna, sköldkörteln och luftstrupen.

Som en aktivator av Wnt-signalvägen spelar Rspo1 en roll i många aspekter genom att förbättra Wnt-signaleringen. Det är ett vanligt använt odlingsmedium för magepitelorganoider, organoider i tunntarm och tjocktarm, leverorganoider, prostataorganoider, pankreatiska organoider och bröstorganoider. faktor.

Wnt-3a

Fungera: Wnt-3a tillhör Wnt-familjen av signalproteiner och spelar en viktig roll för att upprätthålla integriteten hos embryonala och vuxna vävnader. Wnt-familjen är mycket konserverad och rik på cystein. Wnts förmedlar Wnt-signalvägen genom att binda till cellmembranreceptorer och/eller genom att binda till intilliggande cellmembranreceptorer. Wnt-signalvägen kan delas in i kanonisk väg och icke-kanonisk väg, man är involverad i den kanoniska signalvägen som förmedlas av β-catenin, inklusive Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt10a och Wn; den andra är inte icke-kanoniska signalvägar beroende av β-catenin, inklusive Wnt4, Wnt5a, Wnt6 och Wnt11. Som det mest representativa signalproteinet i Wnt-familjen är Wnt3a brett distribuerat och spelar en nyckelroll för att reglera pleiotropa cellulära funktioner, inklusive självförnyelse, proliferation, differentiering och motilitet.

EGF

Fungera: EGF är en potent tillväxtfaktor som stimulerar multipel epitelutveckling, angiogenes, hämning av magsyrasekretion, fibroblastproliferation och kolonibildning av epidermala celler i kultur. EGF är en grundande medlem av EGF-familjen, som även inkluderar TGF-α, två regulatoriska proteiner (AR), β-cellsprotein (BTC), epidermalt protein (EPR), heparinbindande EGF-liknande tillväxtfaktor (HB-EGF), Epiproteiner och neureguliner (NRG1-6). Fysiologiskt finns EGF i olika kroppsvätskor, inklusive blod, mjölk, urin, saliv, sperma, bukspottkörteljuice, cerebrospinalvätska och fostervatten. EGF är en högaffinitetsligand för EGF-receptorn (ErbB). EGF binder och inducerar dimeriseringen av EGF-receptorn, vilket leder till aktivering av proteintyrosinkinassignaleringsvägen, och transducerar därigenom EGF-familjens signal.

Noggin

Fungera: Noggin kan hämma TGF-β-familjens ligander och förhindra dem från att binda till motsvarande receptorer.Noggin upptäcktes ursprungligen som en antagonist av BMP-4 och visades sedan modulera aktiviteten hos andra BMP (BMP-2, 7, 13 och 14). Noggin är mycket konserverat bland ryggradsdjur. Utsöndrade Noggin-proteiner reglerar aktiviteten hos benmorfogenetiska proteiner under utveckling. Roll för BMP-signalantagonisten Noggin i utvecklingen av osteolytiska benmetastaser från prostatacancer.

bFGF/FGF-2

Fungera: bFGF, en medlem av FGF-superfamiljen av mitogena proteiner. Det är en mycket specifik kemotaktisk och mitogen faktor för många celltyper och verkar vara involverad i ombyggnaden av skadade vävnader såsom sårläkning, vaskulär reparation, traumatisk hjärnskada. bFGF är en viktig komponent i humant embryonalt stamcellsodlingsmedium. Dessutom är bFGF-proteinet ett heparinbindande katjoniskt protein involverat i olika patologiska tillstånd, inklusive angiogenes och tillväxten av solida tumörer. Därför anses bFGF vara ett mål för cancerkemoprevention och terapeutiska strategier. bFGF används ofta som en viktig komponent i cellodlingsmedium, såsom humant embryonalt stamcellsodlingsmedium, serumfritt odlingssystem.

FGF-10

Fungera: Fibroblasttillväxtfaktor 10 (FGF-10) är en heparinbindande tillväxtfaktor som tillhör FGF-familjen. Proteiner i denna familj spelar en central roll i prenatal utveckling, postnatal tillväxt och regenerering av olika vävnader genom att främja cellproliferation och differentiering. FGF-10 utsöndras av mesenkymala celler och binder till extracellulär FGF-BP, FGF-10 binder företrädesvis och aktiverar epitelial FGF R2 (IIIb), och interagerar svagt med FGF R1 (IIIb).

Qkvalitetsledningssystem av HiActi™ cytokin

Kvalitetsledningssystem

• Certifierade enligt ISO 13485:2016, cytokiner tillverkas genom en helt sluten ultraren produktionsprocess för att säkerställa proteinernas renhet och stabilitet.
• Följ systemet med "God tillverkningssed för droger"
• Har ett certifikat för godkännandekvalitet (COA)
• Aseptisk teknologi och sekundär steriliseringsfiltrering
• Läkemedelsprodukt råvaror produktionsbas

Kvalitetssäkringsledning

• Särskild person ansvarar för utbildningssystemet för ledningspersonal
• Upprätta rutiner för underhåll och kalibrering av utrustning
• Råvaru- och leverantörsledningssystem
• Komplettera batchproduktionsjournaler, batchinspektionsjournaler, förpackningsjournaler etc.
• Kvalitetsdokument har granskats och inspekterats av QA
• Komplettera batchproduktion och inspektionsregister
• Validering av analysmetoder

Kvalitetskontrollsystem

• Följ den tredje allmänna regeln i 2020 års upplaga av Folkrepubliken Kinas farmakopé: kvalitetskontroll av råvaror och hjälpämnen för produktion av biologiska produkter

Organoid kulturvalidering

Yeasen cytokiner har verifierats på mänskliga tumörorganoider såsom lungcancer, livmoderhalscancer, äggstockscancer, bukspottkörtelcancer och tarmcancer, och normala organoider såsom organoider i tunntarm hos människor och mus.

Relaterad produktinformation