Beskrivning
Hifair™ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) är ett multiplex kvantitativt PCR-kit baserat på RNA som mall. Under experimentets gång utfördes omvänd transkription och kvantitativ PCR i samma rör, vilket förenklade den experimentella operationen och minskade risken för kontaminering.
I detta kit syntetiserades den första strängens cDNA effektivt av värmeresistent HifairTM V Omvänt transkriptas och kvantitativt amplifierad av UNICON™ HotStart Taq DNA-polymeras. Satsen innehåller huvudsakligen optimerad MP-buffert, enzymblandning etc. Buffertlösningen innehåller redan Mg2+ och dNTP. Dessutom tillsätts de faktorer som effektivt kan hämma den icke-specifika PCR-amplifieringen och förbättra amplifieringseffektiviteten för flera qPCR-reaktioner, vilket kan säkerställa amplifieringseffektiviteten och utföra upp till multipla amplifieringsreaktioner. dUTP/UDG-systemet lades till för att effektivt förhindra risken för aerosolkontamination.
Drag
1. Gbra mångsidighet: Den är lämplig för qPCR-amplifiering och detektion av nukleinsyror från patogena mikroorganismer, mänskliga genom, växter och andra arter.
2. Hög känslighet: Det noggrant optimerade buffertsystemet förbättrar detektionskänsligheten för mallar med låg koncentration upp till 250 kopior/ml.
3. dUP/UDG-system: dUTP/Värmelabilt UDG anti-föroreningssystem introduceras för att effektivt bryta ned aerosolföroreningar av produkter, minska falska positiva och säkerställa autentiska resultat.
4. Stöding snabbt program: kompatibelt med snabbt 40 min program.
5. Super stabilitet: stabile vid 37 ℃ i 14 dagar, upprepad frysning och upptining 10 gånger.
Komponenter
| Komponenter | Namn | 16630ES60 (100 T) | 16630ES80 (1000 T) | 16630ES92 (10 000 T) |
| 16630-A | 5×Hifair MP-buffert | 500 μL | 5 ml | 50 ml |
| 16630-B | Hifair enzym Blanda | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
| 16630-C | GC-Enhancer | 500 μL | 5 ml | 50 ml |
Notera: 1) 5×HifairTM MP-buffert är förkortningen av HifairTM V Multiplex One Step RT-qPCR-probbuffert, som inkluderar dNTP, dUTP, Mg2+, stabilisatorer, förstärkare och mer.
2) Hifair Enzyme Mix huvudsakligen innehåller värmetålig HifairTM V omvänt transkriptas, UNICONTM HotStart Taq DNA-polymerer och UDGase.
3) GC-förstärkare är valfritt. Hitta gratisversionen av GC Enhancer: Katt: 16901ES.
4) 16630-A och 16630-B är likvärdiga med 16901-A och 16901-B, resp.
Specifikationer
| PCR-metod | Ett steg RT-qPCR |
| Typ av prov | RNA |
Lagring
Than produkt skall vara lagras på -25°C~-15°C för 1 år.
Siffror
Figur 1. Hög detektionshastighet
Instruktioner
1. Reaktion Sammansättning
| Komponenter | Volym (μL) | Slutlig koncentration |
| 5×Hifair™ MP-buffert | 5 | 1 × |
| Hifair Enzyme Mix | 1 | - |
| GC-Enhancer | 0-5 | - |
| Primer Mix (10 μM) | 0,4 varje | 0,16 μM |
| Sondmix (10 μM) | 0,2 varje | 0,08 μM |
| RNA | 1-5 | - |
| RNase-fritt H2O | till 25 | - |
Notera:Var noga med att blanda väl före användning, undvik överdrivna bubblor orsakade av våldsamma vibrationer.
a) Primerkoncentration: Primer mix inklusive multiplex primer, beroende på situationen kan den optimala primerkoncentrationen vara mellan 0,1 och 1,0 μM.
b) Sondkoncentration: Sondblandning inklusive multiplex sondmärkningsdifferens fluorescerande grupp, beroende på situationen kan den optimala sondkoncentrationen vara mellan 0,05 och 0.5 μM.
c) Mallutspädning: qPCR är mycket känslig och det rekommenderas att späda mallen. Kontroll Ct-värdet är lämpligt mellan 20 och 35.
d) Systemförberedelse: ett huvud med filterelement. Undvik korskontaminering och aerosolkontamination.
2. Optimerat cykelprotokoll
| Reaktionsstadium | Temperatur | Tid | Cykel | |
| 1 | Omvänd transkription | 50°Ca | 15 min | 1 |
| 2 | Initial denaturering | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifieringsreaktion | 95°C | 15 sek | 45 cykler |
| 60°Cb | 30 sekc |
Notera:a) Romvänd transkription: Temperaturen kan välja 42°C eller 50°C i 10-15 minuter.
b) Amplifieringsreaktion: Temperaturen justeras enligt Tm-värdet för de designade primrarna.
c) Upptagning av fluorescenssignal: Ställ in den experimentella proceduren enligt kraven i instrumenthandboken.
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.