Beskrivning
T7 RNA-polymeras använder dubbelsträngat DNA som innehåller T7-promotorsekvensen (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') som mall och NTP:er som substrat för att syntetisera RNA som är komplementärt till den omvända DNA-strängen nedströms om promotorn. Både linjärt dubbelsträngat DNA med trubbiga ändar eller 5'-överhäng kan fungera som mallsubstrat för T7 RNA-polymeras, vilket innebär att linjäriserade plasmider eller PCR-produkter kan användas som mallar för RNA-syntes in vitro.
Detta kit använder en sandwich-enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA)-princip för att detektera kvarvarande T7-RNA-polymeras. T7 RNA-polymerasstandarder och testprover läggs till mikroplattsbrunnar förbelagda med anti-T7 RNA-polymerasantikroppar (36705-A). Utspädda biotinmärkta T7 RNA-polymerasdetektionsantikroppar (36705-C) tillsätts sedan, följt av Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36705-D), vilket bildar en antikropp + antigen + antikropp-biotin + SA-HRP-komplex. Efter tvätt tillsätts TMB-substrat (36705-H) för färgutveckling. TMB katalyseras av HRP till övergång från färglös till blå och slutligen till gul vid tillsats av stopplösning (36705-I). Intensiteten hos den gula färgen är positivt korrelerad med mängden T7 RNA-polymeras som detekteras i provet.
Komponenter
| Inga. | Namn | 36705ES48 | 36705ES96 |
| 36705-A | Anti-T7 RNA Polymeras-belagda mikrotiterremsor | 48 T | 96 T |
| 36705-B* | Standard: T7 RNA-polymeras | 1 flaska | 2 flaska |
| 36705-C | Upptäckt Antikropp:biotin-konjugerad Antikroppar | 60 μL | 120 μL |
| 36705-D | Streptavidin-HRP | 30 μL | 60 μL |
| 36705-E | Spädningsbuffert 1 | 25 ml | 45 ml |
| 36705-F | Tvättbuffertkoncentrationhastighet (20×) | 25 ml | 50 ml |
| 36705-G | Spädningsbuffert 2 | 15 ml | 30 ml |
| 36705-H | TMB-substrat | 8 ml | 15 ml |
| 36705-I | Stoppa lösning | 5 ml | 10 ml |
| 36705-J | Plattförseglare | 3 st | 5 st var |
*Standarden 36705-B är ett lyofiliserat pulver.
Kompatibel med T7 RNA-polymeras: 10625, 10628 och 10629.
Valideringsdata
Tabell 1. Linjäritetsområde: 1–32 ng/mL ，R2=0,999 ，CV≤5 %.
| Std | Koncn.( ng/ml) | AVG( ng/ml) | Återhämtning(%） | CV % |
| Std1 | 32 | 31,965 | 99,9 % | 2,2 % |
| Std2 | 16 | 16.070 | 100,5 % | 5,0 % |
| Std3 | 8 | 7,812 | 97,7 % | 2,1 % |
| Std4 | 4 | 4,192 | 104,8 % | 0,8 % |
| Std5 | 2 | 2,020 | 101,8 % | 3,5 % |
| Std6 | 1 | 1,173 | 117,3 % | 0,0 % |
| NC | 0 | / | / | / |
Tabell 2. Hög specificitet
| Proteinnamn | Koncn. | Upptäckt eller inte |
| Ppositiv Ckontroll | 1 ng/ml | Upptäckt |
| Negativ Ckontroll | 0 ng/ml | nd |
| UltraNuclease | 10 μg/ml | nd |
| Salt Aktiv UltraNuclease | 10 μg/ml | nd |
| DNas jag | 10 μg/ml | nd |
| Murin RNas-inhibitor | 10 μg/ml | nd |
| Vaccinia Capping Enzyme | 10 μg/ml | nd |
| Oorganiskt pyrofosfatas | 10 μg/ml | nd |
| mRNA Cap 2 ´-O-Methyltransferas | 10 μg/ml | nd |
| 1% BSA | 10 mg/ml | nd |
Tabell 3. LOQ: Kvantifieringsgränsen för denna produkt bestäms genom att späda ut den lägsta koncentrationspunkten på standardkurvan, där variationskoefficienten (CV) vid den lägsta koncentrationen är mindre än 20 %. Detta definieras som gränsen för kvantifiering, som är 1 ng/ml.
| Std6 teoretiskt värde (ng/ml) | Std 6 testmedelvärde (ng/ml) | Test upprepningar | CV % | Återhämtning |
| 1 | 0,858 | 24 | 12,6 % | 85,8 % |
Tabell 4. LOD: Detektionsgränsen för denna produkt definieras som standardkoncentrationen som motsvarar medelvärdet för detektering av den negativa kontrollen (NC) plus två gånger standardavvikelsen. Genom att mäta 24 NC-standarder, beräkna medelvärdet och standardavvikelsen, bestäms detektionsgränsen till 0,318 ng/ml.
| Medelvärde(OD） | SD(OD） | Medelvärde +2SD (OD) | Medelvärde +2SD (ng/ml) |
| 0,0527 | 0,0038 | 0,0604 | 0,3176 |
Frakt och förvaring
Förvaras vid 2-8°C. Hållbarheten är 1 år oöppnad och 6 månader efter öppnande.
Vid mottagande av produkten, kontrollera att alla komponenter är kompletta och förvara dem omedelbart vid motsvarande lagringstemperatur.
Betalning och säkerhet
Din betalningsinformation behandlas säkert. Vi lagrar inte kreditkortsuppgifter och har inte heller tillgång till din kreditkortsinformation.
Förfrågan
Du kanske också gillar
Vanliga frågor
Produkten är endast avsedd för forskningsändamål och är inte avsedd för terapeutisk eller diagnostisk användning hos människor eller djur. Produkter och innehåll skyddas av patent, varumärken och upphovsrätt som ägs av Yeasen Biotechnology. Varumärkessymboler anger ursprungsland, inte nödvändigtvis registrering i alla regioner.
Vissa applikationer kan kräva ytterligare immateriella rättigheter från tredje part.
Yeasen är dedikerad till etisk vetenskap, och anser att vår forskning bör behandla kritiska frågor samtidigt som den säkerställer säkerhet och etiska standarder.