Son yıllarda, bulaşıcı hastalıkların küresel görülme sıklığı artışta olup, patojenler giderek daha çeşitli ve karmaşık hale gelmektedir. Bu senaryodaki önemli bir zorluk, hastaların yaklaşık yarısının bilinmeyen patojenlere sahip olma durumuyla karşı karşıya kalması ve bu patojenlerin hızlı teşhisinin zorlu bir görev haline gelmesidir. Şu anda, klinik patojen tespiti esas olarak geleneksel kültür yöntemlerine, PCR tekniklerine, metagenomik dizilemeye (mNGS) ve patojen hedefli dizilemeye (tNGS) dayanmaktadır.
Gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR, SARS-CoV-2'nin nükleik asit tespitinde öne çıkmıştır. Benzer şekilde, mNGS, SARS-CoV-2'ye karşı mücadeleye yaptığı katkılardan dolayı dikkat çekmiş ve klinik ortamlardan günlük kullanıma geçmiştir. Dizileme hizmetlerinde hız, doğruluk ve maliyet etkinliği gibi hem PCR hem de NGS'nin avantajlarını sunan tNGS, klinik test alanında giderek daha fazla ilgi görmektedir.
Eş zamanlı olarak, biyolojik ürünlerin uygulanması biyomedikal, biyolojik tarım, biyoenerji, biyolojik üretim, çevre koruma ve diğer alanlara doğru genişlemiştir. Biyolojik ürünlerin pazar payı büyümeye devam ettikçe, hükümet organları ve ilgili yetkililer bu ürünler için standart kalite yönetim sistemleri ve standartları oluşturmuştur. Odaklanılan belirli bir alan, biyolojik ürünlerdeki konak hücrelerden gelen nükleik asit kalıntılarının varlığıyla ilgilidir.
Rekombinant protein ilaçları, antikor ilaçları, aşılar ve hücre ve gen terapileri gibi biyolojik ürünler ardışık suşlar veya hücre hatları kullanılarak üretilir ve bu da nihai ürünlerde konak nükleik asitlerinin tutulmasıyla sonuçlanabilir. Kalan konak nükleik asitleri, tümör oluşumuna yol açan kontrolsüz hücre çoğalması veya viral genler tanıtarak bağışıklık tepkilerini şiddetlendirme gibi olumsuz sonuçlara yol açabilir. Bu nedenle, biyolojik ürün güvenliğini sağlamak ve araştırma gereksinimlerini karşılamak için etkili nükleik asit kalıntısı giderme ve titiz kalıntı tespiti çok önemlidir. Sektörde, biyolojik ürünlerde konak nükleik asit kalıntısı tespiti için tespit kitleri geliştirmek amacıyla qPCR/RT-qPCR yöntemleri yaygın olarak kullanılmaktadır.
Ayrıca, ticari moleküler enzimler tipik olarak E. coli gibi rekombinant mühendislik suşları kullanılarak ifade edilir ve bu moleküler enzimlerde konak genomik DNA'sının varlığıyla sonuçlanır. Ek olarak, çevresel ve insan faktörleri, moleküler enzim ürünlerine kontamine DNA sokabilir.
Patojen tespit süreci sırasında, kontaminasyondan kaynaklanan arka plan bakteriyel nükleik asitler, düşük bolluktaki hedef nükleik asitleri gölgede bırakabilir veya hedef nükleik asitlerle birlikte tespit edilebilir. Bu, hedef tespitinin hassasiyetini etkileyebilir veya yanlış pozitif sonuçlara yol açarak tıp uzmanları tarafından yapılan tanı ve tedavi kararlarını karmaşıklaştırabilir.
Konak nükleik asit kalıntısı testi için kalite kontrol ürünlerinin geliştirilmesi ve üretiminde, insanlardan, farelerden, E. coli'den, mayadan ve diğerlerinden gelenler de dahil olmak üzere, moleküler enzimlerde kalan konak nükleik asitlerinin varlığı, konak nükleik asit kalıntısı kalite kontrol ürünlerinin kantifikasyonunda yanlışlıklara yol açabilir. Bu, biyolojik ürünlerin üretiminde potansiyel güvenlik riskleri oluşturur.
EVET UCF.MET.M. ultra düşük kalıntılı moleküler enzim çözeltisi
Arka plan bakteri ve konak nükleik asit kalıntısı girişimi sorununu çözmek için YEASEN UCF.ME için eksiksiz bir Ar-Ge ve üretim platformu kurduT.M. ultra düşük kalıntılı moleküler enzimler. Ve çeşitli UCF'lerin büyük ölçekli üretimini başardı.BENT.M. ultra düşük kalıntılı moleküler enzimler malzeme seçimi, çevre kontrolü, proses optimizasyonu ve kalite güvencesi yoluyla.
EVET UCF.MET.M. ultra düşük kalıntılı moleküler enzim ürünleri
YEASEN, qPCR/RT-qPCR gibi moleküler enzimlerin tam bir setini yeniden oluşturdu, NGS kütüphane binası. Aynı zamanda, UCF.ME™ Ultra düşük kalıntı süreci moleküler enzim ürünlerini işlemek için kullanılır, qPCR/RT-qPCR ve NGS için yüksek performanslı ve ultra düşük konak kalıntılı moleküler enzim hammaddelerinin tam bir setini sağlayabiliriz ile tespit doğruluğunu artırmak.
Masa 1 YEASEN UCF.ME listesiT.M. ultra düşük kalıntılı moleküler enzim ürünleri
| Ürün Sınıflandırması | Ürün Adı | Katalog No. | Kriterleri E. koli basili gDNA kalite kontrolü |
| UCF.BENT.M. qPCR/RT-qPCR için ultra düşük kalıntılı enzim ürünleri | Yüksek UCF.MET.M. Hotstart Hassas Taq DNA Polimerazı (5 (U/μL) | 14314ES | ＜0,005 kopya/U |
| Hifair UCF.MET.M. V Ters Transkriptaz (200 U/μL) | 14608ES | <0,005 kopyalar/U | |
| UCF.BENT.M. Fare RNaz İnhibitörü (40 U/μL) | 14672ES | ＜0,001 kopya/U | |
| UCF.BENT.M. Yüksek Afiniteli RNaz İnhibitörü (40 U/μL) | 14675ES | ＜0,001 kopya/U | |
| UCF.BENT.M. Urasil DNA Glikosilaz (UDG/UNG), ısıya duyarlı, 1 U/μL | 14466ES | ＜0,1 kopya/U | |
| UCF.BENT.M. Urasil DNA Glikosilaz (UDG/UNG), 1 U/μL | 14454ES | ＜0,1 kopya/U |
Kısmi veri sunumu（UCF.MET.M. Örnek olarak Hotstart Sensitive Taq DNA Polimerazı）
- Rkalıntıile ilgili koli basili gDNA <0.005 kopya/U
- koli basiliUCF.ME'nin farklı gruplarının gDNA kalıntılarıT.M.Taq enzimi (Cat#14314ES) tespit edildi. Sonuç şunu gösterdi: E. koli basili gDNA kalıntıları Taq DNA polimeraz kalıntıları 0,005 kopya/U'nun oldukça altındaydı.
Figür 1: Tespiti E. coli bakterisi GUCF.ME'nin DNA kalıntısıT.M. Taq enzimi (Cat#14314ES)
- Hiçbir kalıntı plazmit DNA'sı tespit edilmedi
UCF.ME'nin plazmit DNA kalıntılarıT.M. Taq enzimi (Cat#14314ES) ve marka A'nın Taq DNA polimerazı tespit edildi. Sonuçlar marka A'nın Taq DNA polimerazında plazmid DNA kalıntısı olduğunu gösterdi. UCF.ME'de plazmid DNA tespit edilmediT.M. Taq enzimi (Kat#14314ES).
Şekil 2: Plazmit DNA kalıntısı tespitinin sonuçları
- On bir çeşit yaygın arka plan bakterisi tespit edilmedi
UCF.ME'yi kullanınT.M. Taq enzimi (Cat#14314ES) primerler ve problarla birleştirildi Psödomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii, Serratia marcescens, Klebsiella pnömonisi, Stenotrofomonas maltophil, Streptokok pnömonisi, Enterokok bakterisi, Stafilokok aureus, E. koli basili, Enterokok faecalis qPCR ön karışımını hazırlamak için. NTC (Şablon Kontrolü Yok) tespit edildi, sonuçlar yukarıdaki 11 yaygın arka plan bakterisinin hiçbir kalıntısının UCF.ME'de tespit edilmediğini gösterdiT.M. Taq enzimi (Kat#14314ES).
Şekil 3: 11 yaygın arka plan bakterisinin test sonuçları (alanla sınırlıdır, Psödomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii, Serratia marcescens Ve Klebsiella pnömonisi (örnek olarak gösterilmiştir)
- Müşterinin test vakası sunumu
Ticari Taq enzimi ve YEASEN UCF.MET.M. Müşterinin NTC'sini tespit etmek için Taq enzimi (Cat#14314ES) kullanıldı E. koli basili spesifik primer ve sonuçlar ticari Taq enziminin 22 tekrarlanan deneyde 5 kez zirveye ulaştığını gösterdi. UCF.MET.M. Taq enzimi (Cat#14314ES) 22 tekrarlamada zirveye ulaşmadı ve bu da UCF.ME'ninT.M. Taq enzimi (Cat#14314ES) dışarıyı tespit etmedi E. koli basili gDNA'sı.
Figür 4: Dseçim sonucu E.koli basili gDNA kalıntısı (müşterinin test vakası)
Sol: Ticari olarak temin edilebilen konvansiyonel Taq enzimi; Sağ: UCF.MET.M. Taq enzimi (Cat#14314ES)
İlgili ürün önerisi
| Ürün Sınıflandırması | Ürün Adı | Katalog No. |
| Konak nükleik asit kalıntısı tespit kiti | 41332ES | |
| 41331ES | ||
| 41307ES | ||
| E. coli bakterisi Konak Hücre DNA Kalıntısı Tespit Kiti (2G) | 41308ES | |
| Hansenula polymorpha Konak Hücre DNA Kalıntısı Tespit Kiti | 41317ES | |
| E. coli bakterisi Konak Hücre RNA Kalıntısı Tespit Kiti | 41318ES |