Thiết lập mô hình viêm loét đại tràng dextran (DSS, viêm đại tràng)

Lịch sử phát triển của mô hình DSS

Phát triển thuốc đòi hỏi phải có mô hình động vật để thử nghiệm hiệu quả. Với hơn 50 năm phát triển và tối ưu hóa, mô hình viêm loét đại tràng (UC) Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), trong số nhiều mô hình động vật khác nhau, được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu nguyên nhân và cơ chế bệnh sinh của bệnh viêm ruột (IBD).

Hình 1. Sự phát triển của mô hình viêm loét đại tràng DSS

Cđặc điểm của mô hình UC được xây dựng bởi DSS

Nhiều triệu chứng cấp tính hoặc mãn tính của UC có thể được gây ra, chẳng hạn như tiêu chảy, phân có chất nhầy, máu ẩn trong phân, phân có máu, sụt cân, giảm hoạt động và màu lông xấu, theo các liều DSS khác nhau.

Bảng 1 Đặc điểm mô học của mô hình viêm đại tràng DSS

Loại mô hình viêm đại tràng DSS

mô hình viêm đại tràng cấp tính

Mô hình viêm đại tràng giai đoạn mãn tính

thay đổi mô học

Tăng huyết đại tràng, phù nề, co ngắn, giòn, tăng tỷ lệ trọng lượng trên chiều dài

ruột kết ngắn lại đáng kể

Loét đại tràng ở nhiều mức độ khác nhau

Niêm mạc dày lên, hạch to

Phù niêm mạc, mất tế bào hình đài, sưng và phá hủy hốc

mất tế bào hình chén, mất hốc

Các mức độ khác nhau của sự thâm nhiễm tế bào viêm ở niêm mạc và dưới niêm mạc, tổn thương tế bào biểu mô

Polyp tuyến và những thay đổi giống khối u ở một số ít động vật

Ưu điểm của mô hình DSS UC

  1. Các giao thức dễ thực hiện.
  2. Mô hình DSS UC rất giống với các triệu chứng UC ở người với khả năng lặp lại cao.
  3. Nhiều triệu chứng đặc trưng khác nhau có thể được tạo ra thông qua việc kiểm soát liều DSS được sử dụng, điều này là duy nhất đối với mô hình DSS UC.
  4. Mô hình DSS UC có thể được tạo ra bằng nhiều loại động vật mô hình được sử dụng rộng rãi, chẳng hạn như chuột nhắt, chuột cống, cá ngựa vằn, lợn, ruồi giấm, v.v.
  5. Mô hình ung thư liên quan đến viêm đại tràng do IBD (CAC) có thể được tạo ra bằng cách kết hợp sử dụng azoxymethane (AOM).

Ví dụ xây dựng mô hình DSS UC

  1. Chuột người mẫu（Nhấp để biết chi tiết)

1) Chuột BALB/c, cái, 6-8 tuần tuổi, 25 g;

2) Nước uống vô trùng có chứa 3% DSS và lọc qua màng lọc 0,22 μm;

3) DSS được thực hiện trong 7 ngày;

4) Viêm, chẳng hạn như viêm đại tràng phù nề và sung huyết được quan sát thấy sau khi nhuộm HE.

Hình 2 Kết quả nhuộm HE của các lát cắt viêm đại tràng cấp tính DSS [1]

  1. Mô hình cá ngựa vằn（Nhấp để biết chi tiết)
1）Phôi cá ngựa vằn được lấy từ quá trình sinh sản tự nhiên và được nuôi trong lồng ấp ở nhiệt độ 28 độ C cho đến 1 ngày sau khi thụ tinh (dpf).5℃ trong nước tuần hoàn (60 μg/mL muối biển hòa tan) và bổ sung xanh methylen lên đến 1 dpf;
2）Sau 1 ngày nuôi cấy phôi, sử dụng môi trường nuôi cấy phôi E3 không có xanh methylen để nuôi cấy đến 3 ngày nuôi cấy;
3）Chuẩn bị dung dịch bảo quản DSS 10% với môi trường E3；
4）Pha loãng DSS với môi trường nuôi cấy đến liều tối đa không gây chết (tham chiếu nồng độ DSS: 0,5%);
5) Cá ngựa vằn được xử lý bằng 0,5% DSS từ 3 dpf đến 6 dpf và các chỉ số là.

Hình 3 DSS gây ra phản ứng viêm ở gan cá ngựa vằn [2]

3.Mô hình con lợn（Nhấp để biết chi tiết)

1) Lợn con Yorkshire ở độ tuổi 4-5 ngày;

2) Liều DSS: 1,25g/kg, uống trong 5 ngày;

3) Tỷ lệ hấp thu D-mannitol tăng lên được quan sát thấy.

Hình 4 Nồng độ D-mannitol do DSS gây ra ở lợn con cao hơn so với nhóm đối chứng [3]

4.Mô hình ruồi giấm（Nhấp để biết chi tiết)

1) Drosophila, cái, 5-10 ngày;

2) Cho ăn trung bình được chuẩn bị với dung dịch sucrose 5% chứa 3% DSS và 25 μg/mL thuốc bleomycin;

3) Drosophila được nuôi cấy ở nhiệt độ 29°C trong ba ngày và thay đổi chai nuôi cấy hàng ngày;

4) DSS gây ra sự tăng sinh của các tế bào tiền thân ISC và có tác dụng gây chết ruồi giấm.

Hình 5 DSS gây ra sự tăng sinh của các tế bào tiền thân ISC ở ruồi giấm [4] .

5.Cung thư liên quan đến viêm đại tràngNhấp để biết chi tiết)

1）Chuột BALB/c, đực, 7 tuần tuổi;
2）Vào ngày 1, cân và đánh dấu chuột. Tiêm vào màng bụng chuột dung dịch AOM 10 mg/kg.
3) Đổ đầy nước vào máng uống của lồng chuột. Tính toán lượng nước 7-10 mL cho mỗi con chuột mỗi ngày. Cho ăn trong một tuần.
4) Thay nước uống bằng DSS 2,5% trong một tuần;
5) Cho ăn bằng nước uống thông thường trong hai tuần;
6) Lặp lại các bước 3-4 3 lần.

    Hình 6 Sơ đồ của CAC được gây ra bởi AOM/DSS [5] .

    Tiêu chí đánh giá mô hình

    1. Chỉ số hoạt động của bệnh ( Điểm DAI)

    Mô hình được đánh giá bằng nhiều thông số bao gồm trọng lượng cơ thể, độ nhớt của phân và máu ẩn, qua đó tạo ra DAI tổng thể.

    Bảng 2 Quy tắc chấm điểm DAI

    điểm

    phần trăm giảm cân

    độ đặc của phân

    máu ẩn trong phân

    0

    0

    Bình thường

    Tiêu cực

    1

    1-5%

    phân mềm

    màu xanh nhạt

    2

    5-10%

    phân nhầy

    màu xanh da trời

    3

    10-20%

    phân lỏng

    màu xanh đậm

    4

    >20%

    \

    phân có máu
    1. Điểm thay đổi mô học

    Điểm số được đưa ra cho các chỉ số trên dựa trên những thay đổi về mô học không bao gồm sự hình thành hạch bạch huyết cho mô hình viêm đại tràng cấp tính. Thuốc nhuộm HE được sử dụng là Cat#60524ES60.

    Bảng 3 Điểm thay đổi mô học

    điểm

    Loét

    Thay đổi biểu mô

    thâm nhiễm viêm

    hạch bạch huyết

    0

    0

    Bình thường

    không có

    không có

    1

    1

    mất tế bào hình chén

    Xâm nhập Pericrypt

    1

    2

    2

    mất tế bào hình chén

    Sự thâm nhiễm của lớp cơ niêm mạc

    2

    3

    3

    xóa mật mã

    Sự thâm nhiễm toàn bộ lớp cơ niêm mạc, sự dày lên của lớp niêm mạc

    3

    4

    >3

    Mất hốc rộng rãi hoặc tái tạo dạng polyp

    xâm lấn niêm mạc

    >3
    1. dấu hai chấm chiều dài
    Chiều dài đại tràng ngắn lại là kiểu hình rõ ràng đối với mô hình viêm đại tràng mãn tính, trong khi những thay đổi tương tự có thể được phát hiện vào ngày thứ 8 đối với mô hình viêm đại tràng cấp tính.
      4.Bản tóm tắt

      Các thí nghiệm sơ bộ được khuyến nghị để sử dụng mô hình động vật DSS UC với đối chứng phù hợp. Yêu cầu tối thiểu là 8-10 con vật cho mỗi nhóm.

      Liên kết đến tài nguyên này

      [1]Xiaona Gao, et al. Tạp chí Hóa sinh dinh dưỡng 83 (2020) 108438.
      [2]Jing Ma, et al.Nuôi trồng thủy sản và nghề cá (2021) 548–557.
      [3]Connie J. Kim, et al. Tạp chí Hóa sinh dinh dưỡng 21 (2010) 468–475.
      [4] Fangfang Ren, et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
      [5]Jia-Rong Huang, et al.Frontiers in Pharmacology.2020.11:586885.

        Trường hợp thành công cho mô hình hóa với Yeasen DSS

        Các mô hình viêm đại tràng cấp tính thành công được tạo ra với Yeasen DSS (Cat#60316ES, MW: 36000~50000) trong 7 ngày với kiểu hình nổi bật như thể hiện trong bảng sau.

        Bảng 4 Xây dựng các loại mô hình viêm ruột khác nhau với DSS

        Người mẫu

        Mẫu mô hình

        Kế hoạch mô hình hóa

        Kết quả mô hình hóa

        Sử dụng đánh giá

        viêm đại tràng cấp tính

        Chuột BALB/c, cái, 6-8 tuần tuổi, 25 g

        3%-5% DSS uống thoải mái trong 7 ngày liên tục

        Ngày thứ 5 xuất hiện, chiều dài của đại tràng bị ngắn lại, nhuộm HE và tình trạng viêm rõ ràng.

        tốc độ đúc nhanh và thời gian ngắn. Phù hợp với đặc điểm của mô hình viêm đại tràng cấp tính

        Chuột C57BL/6, đực, 8 tuần tuổi, 20 g

        3%-5% DSS bằng ống thông dạ dày, quản lý liên tục

        Ngày thứ 5 xảy ra, ruột kết ngắn lại, sụt cân, có máu trong phân, tiêu chảy

        Tỷ lệ nấm mốc cao và thời gian ngắn. Phù hợp với đặc điểm của mô hình viêm đại tràng cấp tính

        viêm đại tràng mãn tính

        Chuột C57BL/6, đực, 8 tuần tuổi, 22 g

        1-2% DSS bằng ống thông dạ dày, dùng liên tục

        Ngày thứ 40 xuất hiện, ruột kết ngắn lại, sụt cân, có máu trong phân, tiêu chảy

        Tỷ lệ đúc cao. Phù hợp với đặc điểm của mô hình viêm đại tràng mãn tính

        ung thư ruột kết

        Chuột C57BL/6, đực, 8 tuần tuổi, 21 g

        1%-2% DSS tùy ý trong 5 ngày trong 3 tuần

        14 tuần với chiều dài đại tràng ngắn lại, sụt cân, nhuộm HE và tình trạng viêm rõ ràng

        Tỷ lệ đúc cao. Phù hợp với đặc điểm mô hình ung thư ruột kết

        FCâu hỏi thường gặp

        Bất kể mô hình viêm đại tràng DSS cấp tính hay mô hình viêm đại tràng DSS mãn tính, mức độ nghiêm trọng và thành công của viêm ruột đều liên quan đến loài chuột (nền tảng di truyền khác nhau), nồng độ DSS và chu kỳ dùng thuốc.

        Bảng 5 Các vấn đề thường gặp của mô hình viêm đại tràng DSS

        những vấn đề có thể xảy ra

        lý do có thể

        Giải pháp đề xuất

        tỷ lệ tử vong cao ở chuột

        Nồng độ DSS quá cao

        Giảm nồng độ DSS được sử dụng

        Chuột không có hoặc có ít triệu chứng viêm ruột

        Nồng độ DSS quá thấp

        Tăng nồng độ liều DSS; giảm khoảng cách chu kỳ (10-14 ngày)

        Trong cùng một nhóm chuột, các triệu chứng của bệnh viêm ruột rất khác nhau

        nắp chai bị tắc

        Kiểm tra bình nước uống của chuột hàng ngày

        Pđặt hàng sản phẩm

        Sản phẩm bán chạy chỉ cần 1/3 giá của Ông * với hiệu quả như nhau và chúng tôi luôn có sẵn một lượng hàng lớn.

        Psản phẩm Ntôi

        MỘTbài viết Nmàu nâu sẫm

        Đặc điểm kỹ thuật

        Muối natri Dextran Sulfate ColitCare™ (DSS), Cấp độ viêm đại tràng MW: 36000~50000

        60316ES25/60/76/80

        25 g/100g/500g/1kg

        Azoxymetan (AOM)

        60751ES03/08/10

        1mg/5mg/10mg

        MolPure® Bộ xét nghiệm ADN phân

        18820ES08/50/70

        5 T/50 T/200 T

        MolPure® Bộ xét nghiệm DNA đất/phân Mag48 FA

        18528ES48

        48 T

        MolPure®Bộ xét nghiệm ADN đất/phân Mag

        18526ES20/50/70

        20 T/50 T/200 T

        Bộ nhuộm Hematoxylin và Eosin

        60524ES60

        2×100ml

        Bộ xét nghiệm máu ẩn trong nước tiểu phân

        60403ES60

        100T

        Dung dịch nhuộm Alcian Blue Periodic Acid-Schiff (AB-PAS)

        60534ES50/60

        6×50mL/6×100mL/

        Pbài viết đã xuất bản với thuốc thử của chúng tôi

        2024

        [1] Zhong D, Jin K, Wang R, et al. Hydrogel dựa trên vi tảo cho bệnh viêm ruột và lo âu và trầm cảm liên quan. Adv Mater. 2024 26 tháng 1:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4

        [2] Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis điều chỉnh khả năng dung nạp miễn dịch ở bệnh viêm đại tràng thông qua con đường AhR-IDO1-Kyn được kích hoạt bởi L-lysine. Nat Commun. 2024 ngày 13 tháng 2;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.IF= 16.6

        [3] Xuân Chương, Hạ Cao, Xiangzhou Yi,et al. Các hạt nano dựa trên inulin đa mục tiêu với cannabidiol để ngăn ngừa hiệu quả bệnh viêm loét đại tràng[J]. Materials Today Bio.2024, 25100965. IF=8.2

        2022

        [1] Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Xác định chữ ký gen liên quan đến miễn dịch và dự đoán mạng lưới CeRNA trong viêm loét đại tràng hoạt động[J]. Biên giới trong miễn dịch học. 2022; 13: 855645.NẾU=7.561

        [2] Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. Tác dụng chống viêm của các peptide có nguồn gốc từ gelatin xương bò trong RA do LPS gây raW264.7 Tế bào đại thực bào và chuột C57BL/6 được kích thích bằng natri dextran sulfat[J]. Chất dinh dưỡng 2022, 14, 1479. NẾU=5.717

        [3] Vương S,  Hoàng J,  Tan KS, et al.Isosteviol Sodium cải thiện tình trạng viêm đại tràng mãn tính do Dextran Sodium Sulfate gây ra thông qua việc điều chỉnh hồ sơ chuyển hóa, phân cực đại thực bào và con đường NF-B[J].Y học oxy hóa và tuổi thọ tế bào. 2022,4636618.NẾU=5.076

        [4] YuangengLi, PingYu, WenwenFu, et al. Polysaccharides từ Panax ginseng CA Meyer làm giảm IBD do DSS gây ra bằng cách ức chế con đường truyền tín hiệu inflammasome JAK2/STAT1/NLPR3 ở chuột[J]. Tạp chí Thực phẩm Chức năng. 2022, 105013.NẾU=4,451

        [5] Lei-NingChen, TaoJing, Zi-BinLin, et al. Phản ứng chuyển hóa và phiên mã của tinh hoàn chuột đối với viêm đại tràng do dextran sulfat natri gây ra[J]. Độc chất sinh sản. 2022, Trang 35-42.NẾU=3,143

        2021

        [1] Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Cải thiện nền tảng sử dụng thuốc với hydrogel dính niêm mạc tiêm để điều trị viêm loét đại tràng[J]. Tạp chí kỹ thuật hóa học. 424 (2021) 130464.NẾU=16.744

        [2] Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Các túi ngoại bào có nguồn gốc từ sữa làm giảm viêm loét đại tràng bằng cách điều chỉnh miễn dịch đường ruột và định hình lại hệ vi khuẩn đường ruột[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 NẾU=11,556

        [3] Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Các hạt cung cấp nucleotide được đưa vào cơ thể qua đường uống từ vi chất lỏng để điều trị bệnh viêm ruột[J]. Applied Materials Today. 2021 tháng 12; 25:101231 NẾU=10.041

        [4] JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. Vi khuẩn đường miệng ảnh hưởng đến hiệu quả và tiên lượng của xạ trị ung thư trực tràng ở mô hình chuột[J]. Báo cáo tế bào. 2021, 109886.NẾU=9,423

        [5] Hào H,  Trương X,  Tống L,  Liu Q, et al.Lactobacillus plantarumTác dụng của các túi ngoại bào có nguồn gốc từ Câu hỏi 7 về vi khuẩn đường ruột và viêm loét đại tràng ở chuột [J]. Biên giới trong miễn dịch học. 2021.777147 .NẾU=7.561

        [6] Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. Tổ yến ăn được làm giảm viêm loét đại tràng do natri dextran sulfat gây ra ở chuột C57BL/6J bằng cách khôi phục sự cân bằng tế bào Th17/Treg[J]. Biên giới trong dược lý học. 2021.632602.NẾU=7.561

        2020

        [1] Lý, Y., Đồng, J., Tiểu, H., Trương, S., Vương, B., Cui, M., & Fan, S. Axit valeric có nguồn gốc từ vi khuẩn cộng sinh đường ruột bảo vệ chống lại các tổn thương do bức xạ. Vi khuẩn đường ruột, 2020 .1–18.NẾU=10,245

        [2] Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumine làm giảm viêm đại tràng ở chuột và ung thư trực tràng liên quan đến viêm đại tràng[J]. Biên giới trong dược lý học. 2020.586885.NẾU=7.561

        [3] Gao X, Fan W, Tan L, et al. Isoflavone đậu nành cải thiện tình trạng viêm đại tràng thực nghiệm bằng cách nhắm mục tiêu vào các con đường ERα/NLRP3 inflammasome[J]. Tạp chí Hóa sinh Dinh dưỡng, 2020, 83.NẾU=6.048

        Cuộc điều tra