Công nghệ khuếch đại axit nucleic đẳng nhiệt có thể được phân loại thành nhiều loại dựa trên các nguyên tắc khuếch đại khác nhau. Phương pháp phổ biến nhất và được áp dụng rộng rãi nhất là công nghệ khuếch đại đẳng nhiệt qua vòng lặp (LAMP) do các học giả Nhật Bản bao gồm Notomi phát triển vào năm 2000. Đặc điểm kỹ thuật của LAMP là thiết kế bốn đoạn mồi nhắm vào sáu vùng trên gen mục tiêu, sử dụng một loại DNA polymerase Bst thay thế sợi để tiến hành phản ứng khuếch đại ở nhiệt độ không đổi 60~65°C. Điều này đạt được 109-1010- khuếch đại gấp 15-60 phút.
Bst DNA polymerase là enzyme cốt lõi trong công nghệ khuếch đại đẳng nhiệt LAMP. Nó có độ ổn định nhiệt mạnh, hoạt động thay thế sợi và hoạt động polymerase, cho phép khuếch đại nhanh chóng, hiệu quả và đặc hiệu khuôn mẫu trong điều kiện nhiệt độ không đổi. Không giống như PCR, đòi hỏi các chu kỳ biến tính nhiệt để khuếch đại, toàn bộ thí nghiệm LAMP có thể được hoàn thành trong vòng một giờ mà không cần các chu kỳ như vậy.
Ưu điểm của sản phẩm
Enzym không chứa Glycerol, thích hợp cho quá trình đông khô
Vận chuyển nhiệt độ môi trường, giảm chi phí
Hoạt động dịch chuyển sợi mạnh, nhạy và ổn định
Bù nước nhanh chóng, dễ dàng vận hành
Điểm nổi bật về hiệu suất
01 Ứng dụng phương pháp nhuộm huỳnh quang
1、Độ nhạy cao và độ đặc hiệu tốt
Trong hệ thống khuếch đại thuốc nhuộm huỳnh quang RT-LAMP, hiệu suất khuếch đại của bánh bột đông khô 14405ES phù hợp với hiệu suất của enzyme Bst dạng lỏng (bao gồm glycerol và không có glycerol), và cả hai đều có thể phát hiện 100% ở độ nhạy 50 bản sao/T. Độ đặc hiệu tốt, không phát hiện trong 48 giếng NTC (Kiểm soát mẫu âm tính).
2、Độ ổn định nhiệt tốt
Trong hệ thống khuếch đại thuốc nhuộm huỳnh quang RT-LAMP, bột đông khô được xử lý bảo quản ở 45°C trong 7 ngày, 45°C trong 15 ngày và nhiệt độ phòng trong 19 ngày. Sau khi tăng tốc nhiệt, hiệu suất sản phẩm vẫn nhất quán với phiên bản lỏng của enzyme Bst không chứa glycerol và không quan sát thấy đỉnh nào trong NTC (Kiểm soát mẫu âm tính).
3、Hỗ trợ đóng băng lại sau khi tăng tốc
Trong hệ thống khuếch đại thuốc nhuộm huỳnh quang RT-LAMP, bột đông khô được xử lý bảo quản ở 45°C trong 7 ngày và 45°C trong 15 ngày. Bột đông khô sau khi xử lý tăng tốc nhiệt sau đó được xử lý đông khô lần thứ hai (bao gồm enzyme đơn và thuốc thử RT-LAMP). Các thí nghiệm cho thấy sau khi xử lý tăng tốc và đông khô lần thứ hai, hiệu suất sản phẩm vẫn nhất quán với phiên bản lỏng của enzyme Bst không chứa glycerol và không quan sát thấy đỉnh nào trong NTC (Kiểm soát mẫu âm tính). Độ ổn định của sản phẩm tốt, hỗ trợ đông khô lần thứ hai và tăng tốc sau đông khô lần thứ hai.
02 Ứng dụng phương pháp đo màu pH
1、Độ nhạy cao và độ đặc hiệu tốt
Trong hệ thống khuếch đại màu pH RT-LAMP, độ nhạy khuếch đại của bánh bột đông khô 14405ES có thể đạt tới 50 bản sao/T (tỷ lệ phát hiện 100%) và độ đặc hiệu tốt, không phát hiện thấy trong 24 giếng NTC (Kiểm soát mẫu âm tính).
2、Độ ổn định nhiệt tốt
Trong hệ thống khuếch đại màu pH RT-LAMP, độ ổn định tăng tốc nhiệt của bột đông khô 14405ES đã được nghiên cứu ở 45°C trong 15 ngày, độ ổn định sau khi đông khô thứ cấp sau khi tăng tốc (tái ngậm nước sau khi tăng tốc ở 45°C trong 7 ngày) và độ ổn định lưu trữ sau khi tái ngậm nước (lưu trữ ở -20°C trong 7 ngày sau khi tái ngậm nước). Các thí nghiệm chỉ ra rằng sản phẩm 14405ES có độ ổn định tốt, không ảnh hưởng đến hiệu suất sản phẩm sau khi tăng tốc nhiệt và hỗ trợ đông khô thứ cấp sau khi tăng tốc.
Đề xuất sản phẩm nổi bật
| Loại sản phẩm | Chức năng sản phẩm | Tên sản phẩm | Số mục |
| Hỗn hợp RT-LAMP | Thuốc nhuộm huỳnh quang | ĐÈN RT Thuốc nhuộm Xét nghiệm Bộ dụng cụ (UDG) Thêm vào đó） | 13762ES |
| Chỉ số pH | ĐÈN RT độ pH Nhạy cảm Thuốc nhuộm Bộ dụng cụ | 13906ES | |
| Chỉ thị pH đông khô | ĐÈN RT độ pH Nhạy cảm Thuốc nhuộm sinh màu Phiên bản Có thể đông khô Bộ dụng cụ | 13920ES | |
| Enzym Bst | Glyxerol | Hieff® Bst Thêm vào đó ADN Polymerase (40 U/μL) | 14402ES |
| Không chứa Glycerol | Đông khô Bst Thêm vào đó ADN Polymerase (60 U/μL，Không chứa Glycerol) | 14405ES | |
| Bộ đệm | Đệm cơ bản (không chứa thuốc nhuộm, v.v.) | 10× Hieff® Bst Thêm vào đó ADN Polymerase Bộ đệm | 15441ES |