----Nền sạch, Hoa văn băng ổn định, Kích thước chính xác
DNA Marker là sự kết hợp của các đoạn DNA có trọng lượng phân tử khác nhau. Công dụng chính của chúng là di chuyển cùng với DNA mẫu trong điện di gel agarose để tách các phân tử DNA. Bằng cách so sánh kích thước và độ sáng của các dải mẫu với các dải của DNA Marker, người ta có thể ước tính sơ bộ trọng lượng phân tử và nồng độ của DNA mẫu trong dung dịch.
Tính năng sản phẩm
- Độ ổn định cao, có thể bảo quản ở nhiệt độ phòng từ 3-6 tháng;
- Nền sạch, họa tiết băng ổn định và kích thước chính xác;
- Chứa các dải tham chiếu có nồng độ đã biết để dễ dàng định vị và phân tích bán định lượng;
- Bao gồm đệm tải cho điện di trực tiếp, tiện lợi và nhanh chóng;
- Đi kèm với bộ đệm tải 5× để tải mẫu.
Biểu đồ điện di
Điểm chú ý
- Phương pháp bảo quản: Bảo quản ổn định ở nhiệt độ phòng từ 3 đến 6 tháng; để lâu hơn, bảo quản ở nhiệt độ 4°C hoặc -20°C.
- DNA Marker thích hợp để phân tích các dải DNA trong điện di gel agarose và không được khuyến khích sử dụng trong điện di gel polyacrylamide.
- Lựa chọn nồng độ gel và dung dịch đệm:
| Nồng độ Agarose | Khoảng cách tách hiệu quả (bp) | Bộ đệm được đề xuất |
| 0,5% | 2.000-50.000 | 1×TAE |
| 0,8% | 800-10.000 | 1×TAE |
| 1,0% | 400-8.000 | 1×TAE |
| 1,2% | 300-7.000 | 1×TAE |
| 1,5% | 200-3.000 | 1×TAE/0,5×TBE |
| 2,0% | 100-2.000 | 1×TAE/0,5×TBE |
| 3,0% | 25-1.000 | 0,5×TBE |
【Lưu ý】: Đối với các mảnh lớn, hãy chọn gel có nồng độ thấp và sử dụng hệ thống đệm TAE để điện di; đối với các mảnh nhỏ, hãy chọn gel có nồng độ cao và sử dụng hệ thống đệm TBE để điện di.
- Lựa chọn thuốc nhuộm axit nucleic:
EB (Ethidium Bromide) là thuốc nhuộm huỳnh quang có độ nhạy cao với bước sóng kích thích tối đa là 302 nm, có thể được sử dụng để quan sát axit nucleic trong gel agarose và polyacrylamide. EB xen kẽ với các bazơ trong axit nucleic và được biết là độc hại.
YeaRed (Cat#10202ES76) và YeaGreen (Cat#10204ES76) là thuốc nhuộm axit nucleic mới không độc hại có cấu trúc phân tử dầu độc đáo không thể xuyên qua màng tế bào để vào tế bào, không dễ bay hơi hoặc thăng hoa, do đó con người không hít phải, đảm bảo an toàn cho người thử nghiệm.Kết quả thử nghiệm Ames cũng cho thấy YeaRed và YeaGreen không gây đột biến ở nồng độ nhuộm gel, khiến chúng trở thành giải pháp thay thế an toàn và không độc hại cho EB gây ung thư cao. Ngoài ra, YeaRed có cùng đặc điểm quang phổ với EB, do đó có thể thay thế hoàn hảo EB mà không cần thay đổi hệ thống hình ảnh hiện có.
Hỏi & Đáp
Câu hỏi 1: Tại sao các dải có trọng lượng phân tử cao của DNA Marker lại bị kéo lê và không tách biệt tốt?
A1: Thuốc nhuộm axit nucleic không liên kết đủ với DNA Marker. Vì các dải có trọng lượng phân tử cao cần nhiều thuốc nhuộm axit nucleic hơn, nếu thuốc nhuộm không bão hòa, các dải có trọng lượng phân tử cao dễ bị ảnh hưởng bởi hiệu ứng di chuyển hơn, dẫn đến kéo lê và tách kém. Nên giảm lượng DNA Marker sử dụng (có thể pha loãng với nước 5 lần và sau đó có thể nạp 8-10 μL) hoặc tăng nồng độ thuốc nhuộm axit nucleic.
Câu hỏi 2: Tại sao DNA không có dải hoặc dải yếu?
A2:
- Tải lượng DNA không đủ, hãy tăng lượng tải lên;
- Dải DNA đã hết trên gel;
- Dải DNA bị che khuất bởi thuốc nhuộm theo dõi;
- Thuốc nhuộm axit nucleic không được thêm vào gel;
- Gel agarose để quá lâu, khuyến cáo nên pha chế và sử dụng ngay.
Câu hỏi 3: Tại sao các dải đánh dấu DNA lại khuếch tán?
A3:
- Phân hủy một phần DNA, kiểm tra xem điều kiện bảo quản có quá nóng không;
- Điện áp trong quá trình điện di quá thấp, khiến các dải DNA bị khuếch tán. Nên chạy gel ở mức 110V-130 V trong hơn 45 phút;
- Nồng độ gel agarose không phù hợp, hãy chuẩn bị theo nồng độ gel khuyến cáo trong hướng dẫn;
- Chất lượng gel agarose kém, khuyến cáo nên chuẩn bị gel mới.
Câu hỏi 4: Tại sao các dải mẫu dường như có kích thước khác nhau so với các dải đánh dấu DNA?
A4:
- Sự di chuyển của DNA không chỉ liên quan đến kích thước thực tế mà còn liên quan đến việc nó có kết hợp với protein, trạng thái ion, cấu trúc DNA, gel và các yếu tố khác hay không. Tốc độ di chuyển điện di của axit nucleic liên quan đến tỷ lệ DNA/thuốc nhuộm và khi lượng thuốc nhuộm axit nucleic không đủ, nó có thể dẫn đến lỗi tốc độ di chuyển lớn hơn;
- Nếu mẫu chứa nồng độ ion muối cao, nó cũng có thể gây ra lỗi di chuyển đáng kể;
- Nếu lượng mẫu nạp vào khác đáng kể so với lượng băng đánh dấu DNA hoặc nếu thể tích khác nhau đáng kể, điều này cũng có thể gây ra lỗi di chuyển lớn hơn.
Thông tin đặt hàng
| Định hướng sản phẩm | Tên sản phẩm | Số sản phẩm | Thông số kỹ thuật |
| Dấu hiệu DNA | Máy đánh dấu DNA GoldBand DL2000 | 10501ES60/80 | 100 T/10×100 T |
| Máy đánh dấu DNA GoldBand DL5000 | 10504ES60/80 | 100 T/10×100 T | |
| Thang DNA GoldBand 100bp | 10507ES60/80 | 100 T/10×100 T | |
| Thang DNA GoldBand 1 kb | 10510ES60/80 | 100 T/10×100 T |