Từ khóa:

Dư lượng thấp, Trộn sẵn, Đa mục tiêu, Một ống, qPCR, Độ nhạy cao.

Tóm tắt:

Hỗn hợp qPCR thế hệ thứ ba mới có lượng dư cực thấp, được trộn sẵn để đảm bảo độ nhạy cao, hỗ trợ giao thức nhanh trong 30 phút và có khả năng khuếch đại đa kênh trong nhiều tình huống khác nhau.

Lý lịch

Các enzyme phân tử thương mại, chủ yếu được sản xuất thông qua biểu hiện tái tổ hợp ở các chủng được thiết kế (ví dụ, E. coli), thường chứa DNA bộ gen vật chủ còn sót lại. Các yếu tố như môi trường chuẩn bị và sự nhiễm bẩn của con người làm tăng thêm khả năng DNA còn sót lại trong các enzyme này. Điều này có thể dẫn đến việc định lượng không chính xác các axit nucleic vật chủ còn sót lại trong các sản phẩm kiểm soát chất lượng, gây ra rủi ro về an toàn cho sản xuất dược phẩm sinh học. Trong quá trình phát hiện tác nhân gây bệnh, các axit nucleic vi khuẩn nền bị nhiễm bẩn có thể lấn át các axit nucleic mục tiêu có hàm lượng thấp hoặc được phát hiện đồng thời với chúng, làm giảm độ chính xác của xét nghiệm.

Giải pháp tổng thể

Để giải quyết sự can thiệp từ vi khuẩn nền và dư lượng axit nucleic của vật chủ trong việc phát hiện tác nhân gây bệnh, YEASEN Biotech đã phát triển một công nghệ kiểm soát dư lượng cực thấp độc đáo. Chúng tôi thành lập UCF.ME, một cơ sở sản xuất enzyme phân tử cực sạch tuân thủ các tiêu chuẩn GMP, tuân thủ nghiêm ngặt hệ thống quản lý chất lượng ISO 13485 ở mọi giai đoạn. Điều này bao gồm kiểm soát chặt chẽ đối với nhân sự, máy móc, vật liệu (thuốc thử và vật tư tiêu hao), quy trình, môi trường và tiêu chuẩn. Bằng cách tích hợp các biện pháp kỹ thuật hiệu quả, môi trường sản xuất sạch và kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt, chúng tôi cho phép sản xuất quy mô lớn nhiều loại UCF.METMlượng enzyme phân tử còn lại cực thấp.

Hieff UniconTM Hỗn hợp qPCR Pure Pro U+Một ống)(Con mèo#16713ES)là một hỗn hợp qPCR phổ quát được chế tạo tỉ mỉ bởi YEASEN Biotech, có đặc điểm là dư lượng DNA vật chủ thấp. Sản phẩm này dựa trên thế hệ mới của hỗn hợp qPCR trộn sẵn phổ biến (Cat#16713ES) có hiệu quả kiểm soát DNA bộ gen còn lại của vật chủ (Vi khuẩn E. coli), đồng thời kiểm soát mức độ còn lại của các vi khuẩn gây bệnh phổ biến như Pseudomonas aeruginosa và các chất gây ô nhiễm có nguồn gốc từ con người. Vì dung dịch được trộn sẵn này (Mã số # 16713ES) không chỉ kiểm soát hiệu quả mức độ còn lại của tác nhân gây bệnh mà còn giải quyết các vấn đề về độ ổn định trong phát hiện nhiều lần và tính linh hoạt của mục tiêu, nên nó tăng cường các chỉ số hiệu suất chính như độ nhạy và độ đặc hiệu của thuốc thử. Nó cải thiện đáng kể hiệu quả phát hiện và có thể được sử dụng rộng rãi trong các tình huống ứng dụng như phát hiện vi sinh vật gây bệnh.

Ưu điểm của sản phẩm

  • Dư lượng nền thấp – Không phát hiện thấy Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa và dư lượng DNA bộ gen có nguồn gốc từ con người trong 48 giếng.
  • Độ ổn định pha trộn trước đặc biệt: Ổn định ở nhiệt độ 37°C trong tối đa 14 ngày, ở nhiệt độ 4°C trong tối đa 28 ngày và sau 50 chu kỳ đông lạnh-tan băng.
  • Tính linh hoạt tuyệt vời của thuốc thử – Tương thích với nhiều bộ mồi-dò đa năng (đã được xác nhận cho hơn 40 loại mục tiêu khác nhau), với hiệu suất khuếch đại tuyệt vời.
  • Độ nhạy và độ đặc hiệu cao – Độ nhạy có khả năng phát hiện 250 bản sao/mL, với độ đặc hiệu đảm bảo không có đỉnh trong 48 giếng âm tính.
  • Hỗ trợ các giao thức nhanh – Tương thích với các giao thức nhanh, có thể nhận được kết quả chỉ sau 30 phút.
  • Hệ thống chống nhiễm bẩn dUTP/UDG – Tích hợp hệ thống chống nhiễm bẩn dUTP/UDG để ngăn ngừa hiệu quả tình trạng nhiễm bẩn do khí dung.
  • Khả năng tương thích với nhiều nền tảng và hệ thống – Tương thích với các nền tảng như Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong và các nền tảng khác.

Điểm nổi bật về hiệu suất

1、Tỷ lệ vi khuẩn nền cực thấp

Dựa trên đánh giá mức độ dư lượng vi khuẩn nền thuốc thử, việc sử dụng YEASEN'S dư lượng cực thấp phổ quát ptrộn lại hỗn hợp qPCR (Cat#16713ES) và thuốc thử thông thường (không có kiểm soát dư lượng) cho NTC (Không có Kiểm soát Mẫu) khuếch đại trong Escherichia coli (Vi khuẩn E. coli) hệ thống, với 16713ES cũng trải qua quá trình khuếch đại NTC trong cả hệ thống DNA bộ gen Pseudomonas aeruginosa và con người. Kết quả cho thấy Cat#16713ES không biểu hiện sự khuếch đại trong 48 giếng của NTC, chỉ ra lượng DNA nền không đáng kể (E. coli, P. aeruginosa và DNA của người) trong thuốc thử.

2、Độ ổn định vượt trội của hỗn hợp trộn sẵn hoàn toàn

Dựa trên việc điều tra tính ổn định của đã trộn sẵn thuốc thử, Cat#16713ES được xử lý theo ba cách (4°C, 37°C và đông lạnh-tan băng). Các nhóm thử nghiệm được xử lý ở 4°C và 37°C trong 7 ngày, tương ứng, và trải qua 50 chu kỳ đông lạnh-tan băng. Độ ổn định được đánh giá so với nhóm đối chứng (được lưu trữ ở -20°C) trong bốn hệ thống khuếch đại đa kênh (Nhóm 1, 2 và 4 là hệ thống khuếch đại 4-plex, và Nhóm 3 là hệ thống khuếch đại 3-plex), với một số nhóm khuếch đại được đánh giá thêm về độ ổn định sau 14 ngày tăng tốc ở 37°C. Kết quả đã chứng minh rằng Độ lệch giá trị Ct (giá trị ΔCt) giữa thuốc thử thực nghiệm và thuốc thử đối chứng nằm trong phạm vi ±0,5 và độ lệch giá trị huỳnh quang là trong vòng 15%, chỉ ra rằng YEASENThuốc thử được trộn sẵn có độ ổn định tuyệt vời trong khuếch đại đa kênh.

3、Tính linh hoạt tuyệt vời của thuốc thử

Dựa trên việc điều tra các tình huống ứng dụng đa dạng của thuốc thử, YEASEN (Cat#16713ES) đã được sử dụng cùng với một số thuốc thử thông thường để xác nhận hiệu suất khuếch đại trong các tình huống mục tiêu khác nhau. Kết quả chứng minh rằng sản phẩm thể hiện hiệu suất khuếch đại tốt trên nhiều mục tiêu khác nhau bao gồm mầm bệnh, nguồn gốc con người và thực vật, cho thấy mức độ cao tính linh hoạt của thuốc thử.

4、Độ nhạy khuếch đại vượt trội

Dựa trên đánh giá độ nhạy của thuốc thử, một đánh giá đã được tiến hành về tỷ lệ phát hiện Cat#16713ES trong hệ thống khuếch đại đa kênh (4-plex) sử dụng các mẫu ở nồng độ cực thấp (250 bản sao/mL). Kết quả cho thấy rằng YEASEN'Cat#16713ES thể hiện tuyệt vời Độ nhạy khuếch đại, với giới hạn phát hiện ít nhất là 250 bản sao/mL.

5、Khả năng tương thích với nhiều giao thức nhanh

Dựa trên nghiên cứu về hiệu suất khuếch đại của giao thức nhanh của thuốc thử, bảy mẫu gradient (1~10^6 bản sao/μL) đã được xác nhận bằng cả giao thức thông thường (1 giờ 6 phút) và giao thức nhanh (30 phút) trên cùng một thiết bị PCR định lượng (ABI Q5). Kết quả chứng minh rằng hiệu quả khuếch đại của giao thức nhanh vẫn được duy trì trên 99%và độ lệch giá trị Ct (giá trị ΔCt) giữa các giao thức thông thường và nhanh là trong vòng ±0,5, với độ lệch giá trị huỳnh quang trong vòng ±10%và các đường cong khuếch đại hiển thị hình chữ “S”.

Chia sẻ thuốc thử phát hiện IVD

Là nhà cung cấp các công cụ khoa học đời sống, YEASEN Biotech đã cung cấp nguyên liệu thô chất lượng cao và tiết kiệm chi phí cho các công ty IVD trong một thời gian dài. Ngoài việc phổ biến đã được trộn sẵn hoàn toàn hỗn hợp chính qPCR/RT-qPCR, chúng tôi cung cấp nhiều loại thuốc thử phát hiện qPCR/RT-qPCR khác, giúp IVD khách hàng doanh nghiệp cùng nhau giải quyết vấn đề phát hiện hiệu quả các bệnh gây ra cho người và động vật.

Loại sản phẩm

Chức năng sản phẩm

Tên sản phẩm

Số mục

hỗn hợp qPCR

Thế hệ thứ 3 hoàn toàn mới, được trộn sẵn hoàn toàn, độ nhạy cao hỗ trợ thử nghiệm nhanh chóng

Hieff UniconTM Universal TaqMan Pro U+ qPCR MixMột ống)

16710ES

Độ nhạy cao phổ quát (nồng độ 5×)

Hieff UniconTM Hỗn hợp chính qPCR Multiplex TaqMan phổ quátUDG cộng)

13891ES

Thế hệ thứ 2 nhanh chóng hoàn toàn được trộn sẵn

Hieff UniconTM Superpro Ⅰ TaqMan qPCR Master MixUDG cộng)

11827ES

Không có vật chủ, dư lượng cực thấp

Hieff UniconTM Purepro Ⅰ TaqMan qPCR Master MixUDG cộng)

11853ES

Đông khô phổ biến độ nhạy cao

Hieff UniconTM Universal TaqMan Multiplex qPCR Master MixUDG cộng)

11893ES

Hỗn hợp RT-qPCR

Độ nhạy cao phổ quát nhanh chóng

Bộ dụng cụ thăm dò RT-qPCR một bước HifairTM C203P1UDG cộng thêm)

16630ES

hoàn toàn được trộn sẵn phổ biến

HifairTM Bộ dụng cụ thăm dò RT-qPCR một bước V MultiplexUDG cộng)

11899ES

Đông khô nhanh phổ biến

Bộ dụng cụ RT-qPCR một bước HifairTM Lyo Multiplex

11831ES

Cuộc điều tra