介绍
荧光素酶报告基因检测试剂盒作为药物研发中不可或缺的核心工具，能够实时监测基因表达和信号转导，在高通量筛选、疗效评估、靶点验证等关键环节发挥着至关重要的作用。该技术的应用大大提高了药物筛选和评价的效率，加速了新药的发现和开发。
荧光素酶报告基因检测原理
荧光素酶报告基因检测技术通过催化荧光素氧化为氧化荧光素并产生生物发光，可以定量分析萤火虫荧光素酶活性，该技术在miRNA靶基因验证、启动子转录活性调控等领域具有重要的应用价值。通过在荧光素酶基因的上下游插入靶基因的调控元件，构建荧光素酶报告质粒，转染细胞并进行相应的刺激或处理，随后通过裂解细胞并测定荧光素酶活性，可以评估不同刺激条件下调控元件的活性变化，从而更深入地了解基因的调控机制 表达。
单荧光素酶和双荧光素酶检测应用之间的差异
报告基因检测主要分为单荧光素酶报告基因检测和双荧光素酶报告基因检测。在具体应用中，如何判断实验是采用单荧光素酶还是双荧光素酶检测系统呢？我们来看看它们的区别。
单荧光素酶报告基因检测系统
报告基因数量： 单个萤火虫荧光素酶报告基因；
转染类型： 单个报告基因质粒，经转染后通过药物筛选，构建稳定表达荧光素酶的报告基因细胞株；
检测流程： 只需检测萤火虫荧光素酶信号，操作简单，检测周期短，适合高通量药物筛选；
应用场景分析： 通常通过构建稳定的过表达单克隆细胞株来实现，此类细胞株的表达水平相对稳定均一，不受转染效率、细胞存活率等实验变异的影响。操作简单，且由于只检测萤火虫荧光素酶信号，数据分析更为便捷。加上检测时间短的优势，特别适合高通量药物筛选，满足大规模样本检测的需求。
双荧光素酶报告基因检测系统
报告基因数量： 萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶双报告基因；
转染类型： 两个报告基因质粒共转染，主要通过瞬时转染方式；
检测流程： 需要先探测萤火虫信号，再探测海肾信号，并将两者的比值（萤火虫/海肾）用于最终的数据计算；
应用场景分析： 一般是通过瞬时转染，与共转染含有海肾荧光素酶基因的质粒作为内参，为实验提供基准，从而减少细胞存活率、转染效率等外界因素的干扰。通过比例计算，可以校正细胞数量、转染效率、细胞活性的变化，提高实验结果的准确性。是基因表达调控、信号转导途径、药物筛选等领域的重要工具。
产品系列
| 产品名称 | 生物一步法 | 稳扎稳打 | 明亮-一步 |
| 产品代码 | |||
| 应用场景 及特点 | 该套件在信号强度和稳定性之间取得了相对的平衡，既能维持较高的信号强度，又能在一定时间内保持信号强度的相对稳定。 | 半衰期可达5小时以上，尤其在前2小时内，发光值变化极小，适合超高通量或384孔板检测。 | 高灵敏度和高信号强度。适用于需要高灵敏度的实验。 |
| 信号半衰期 | 60 分钟 | 5 小时 | 30分钟 |
| 操作特性 | 一步 | 一步 | 一步 |
产品优势
信号半衰期长： 信号半衰期可达5小时以上，满足高通量实验的需求，同时避免因样本数量多导致首孔与末孔时间差而引起的信号差异，确保结果更加稳定可靠。
强荧光信号： 信号值可达8个数量级，为早期药物筛选、疗效评估提供了较大的检测窗口和有力的数据支持。
操作简便： 一步式操作，免去复杂的实验步骤，只需加入检测试剂，等待5分钟即可开机检测。
多种选择： 根据不同的应用场景，有3种不同的产品可供选择，可根据实验对信号值、信号稳定性的要求进行选择。
产品数据
01 性能比较
三种检测试剂盒的验证 在稳定表达萤火虫荧光素酶的细胞株上进行了检测，结果显示，Bright-One Step产品具有更高的信号值；Steady-One Step产品具有更长的信号半衰期和更稳定的信号；Bio-One Step产品不仅信号值高而且维持了较长的信号半衰期。
图 1. 不同
02
使用时
图 2. 比较
03
图 3.反复冻融试验
操作流程
01 细胞转染
将试剂直接加入细胞悬浮液中，然后上下移液5次，确保充分混合，等待5分钟以使细胞完全裂解。
02 样品加载
将混合物（检测试剂+细胞培养基）100 μL 移入检测板的每个孔中。
03 荧光检测
在酶标仪上设置好参数，将检测板放入酶标仪，震荡数秒后，即可进行检测。
产品列表
| 产品类别
| 产品名称 | 产品代码 | 产品规格 |
| 荧光素酶报告基因检测试剂盒 | 11411ES60/80/81 | 100吨/10×100吨/1000吨 | |
| 11413ES60/80/81 | 100吨/10×100吨/1000吨 | ||
| 11412ES60/80/81 | 100吨/10×100吨/1000吨 | ||
| 双荧光素酶报告基因检测试剂盒
| 11402ES60/80 | 100吨/1000吨 | |
| 11405ES60/80 | 100吨/1000吨 |