产品介绍
胶原酶是一类能特异识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列在胶原蛋白中经常出现,而其他蛋白质中很少出现)并裂解此序列中中性氨基酸(X)与甘氨酸(Gly)之间的肽键,并能水解结缔组织中的胶原蛋白的内切酶。
很多蛋白酶都能水解单链和变性的胶原蛋白肽,但胶原酶是唯一能降解三链超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,广泛存在于结缔组织中,其中最强效的是厌氧菌溶组织梭菌所分泌的“粗”胶原酶。
目前,市场上的细菌胶原酶根据胶原酶活性的不同主要分为五种类型:I型胶原酶、II型胶原酶、III型胶原酶、IV型胶原酶和V型胶原酶。
胶原酶的选择
产品名称 | 外貌 | 酶活性 | 适用范围 |
I型 胶原酶) | 棕色或棕褐色结晶粉末 | ≥250单位/毫克固体 | 含有(胶原酶、酪蛋白酶、梭菌和胰蛋白酶)活性,用于分离上皮、肺、脂肪和肾上腺组织细胞。 |
II 型 胶原酶) | 棕色或棕褐色结晶粉末 | ≥125单位/毫克固体 | 含有更多的梭菌酶活性,适用于肝脏、骨骼、甲状腺、心脏和唾液腺组织细胞的分离 |
III型 胶原酶) | 棕色或棕褐色结晶粉末 | ≥100单位/毫克固体 | 含有低蛋白水解活性,对消化组织连接部分有效,常用于哺乳动物组织细胞的解离 |
类型IV 胶原酶) | 棕色或棕褐色结晶粉末 | ≥125 CDU/毫克固体* | 胰蛋白酶活性较低,常用于细胞制备以确保胰岛和受体的完整性 |
V型 胶原酶) | 棕色或棕褐色结晶粉末 | ≥125 CDU/毫克固体* | 含有至少7种蛋白酶成分,可用于胰岛组织的分离及结缔组织分离成单个细胞 |
*CDU = 胶原蛋白消化单位
产品特性
- 消化效率高:溶组织梭菌粗酶提取物对组织有很高的消化效率。
- 依赖于激活剂:胶原酶需要依赖二价阳离子(如 Ca2+和锌2+。
- 受抑制剂影响:胶原酶的抑制剂有EDTA、EGTA等;其次是重金属离子(Hg2+, 铅2+, 光盘2+);还有一些化学药剂如半胱氨酸、组氨酸、DTT、2-巯基乙醇、邻菲咯啉等,对胶原酶也有抑制作用。
- 抗干扰性强:胶原蛋白不会受到培养细胞所用血清的影响。
使用注意事项
- 使用方法:溶于Hank's、Earle's或其他平衡盐溶液,建议使用浓度为0.05%~0.5%(w/v)
- 储藏温度:2-8℃
- 使用建议:
(1) 对于胶原蛋白结构和生物合成的研究,通常使用纯度较高的胶原酶制剂,而不使用其他蛋白水解活性物质。
(2)对于组织解离,通常使用粗胶原酶制剂,例如弹性蛋白酶,胰蛋白酶或木瓜蛋白酶。
常问问题
- 实验期间消化不良
(1)若因酶活弱或钙离子不足引起,胶原酶应保存在低温干燥条件下,胶原酶溶液分装后应冷冻保存
(2)如果是钙离子不足引起的,胶原酶溶液中钙离子浓度应为5mM
- 使用过程中发生细胞死亡
(1)若蛋白酶过量,应减少蛋白酶接触时间或加入白蛋白或灭活血清
(2)如果 pH 值发生变化,应使用缓冲液(例如 HBSS);经常检查并重新调整 pH 值
(3)若氧气过少,应使用无菌空气对消化液进行通气
- 实验过程中细胞受损
如果是蛋白酶过多引起,应减少蛋白酶量或加入白蛋白或灭活血清
订购
目录编号 | 产品名称 | 尺寸 |
40507ES60 | 胶原酶I | 100 毫克,1克 |
40508ES60 | 胶原酶 II | 100 毫克,1克 |
40509ES60 | 胶原酶 III | 100 毫克 |
40510ES60 | 胶原酶IV | 100 毫克,1克 |
40511ES60 | 胶原酶V | 100 毫克 |
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