产品介绍

胶原酶是一类能特异识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列在胶原蛋白中经常出现,而其他蛋白质中很少出现)并裂解此序列中中性氨基酸(X)与甘氨酸(Gly)之间的肽键,并能水解结缔组织中的胶原蛋白的内切酶。

很多蛋白酶都能水解单链和变性的胶原蛋白肽,但胶原酶是唯一能降解三链超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,广泛存在于结缔组织中,其中最强效的是厌氧菌溶组织梭菌所分泌的“粗”胶原酶。

Yeasen 胶原酶来源于溶组织梭菌,是一种酶“粗”提取物,它不仅含有能降解天然胶原蛋白和网状纤维的胶原酶,还含有一些其它蛋白酶如多糖酶、脂肪酶等,能有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质中的其它蛋白质、多糖和脂质,因此更适用于组织的消化。

目前,市场上的细菌胶原酶根据胶原酶活性的不同主要分为五种类型:I型胶原酶、II型胶原酶、III型胶原酶、IV型胶原酶和V型胶原酶。

胶原酶的选择

产品名称

外貌

酶活性

适用范围

I型 胶原酶)

棕色或棕褐色结晶粉末

≥250单位/毫克固体

含有(胶原酶、酪蛋白酶、梭菌和胰蛋白酶)活性,用于分离上皮、肺、脂肪和肾上腺组织细胞。

II 型 胶原酶)

棕色或棕褐色结晶粉末

≥125单位/毫克固体

含有更多的梭菌酶活性,适用于肝脏、骨骼、甲状腺、心脏和唾液腺组织细胞的分离

III型 胶原酶)

棕色或棕褐色结晶粉末

≥100单位/毫克固体

含有低蛋白水解活性,对消化组织连接部分有效,常用于哺乳动物组织细胞的解离

类型IV 胶原酶)

棕色或棕褐色结晶粉末

≥125 CDU/毫克固体*

胰蛋白酶活性较低,常用于细胞制备以确保胰岛和受体的完整性

V型 胶原酶)

棕色或棕褐色结晶粉末

≥125 CDU/毫克固体*

含有至少7种蛋白酶成分,可用于胰岛组织的分离及结缔组织分离成单个细胞

*CDU = 胶原蛋白消化单位

产品特性

  1. 消化效率高:溶组织梭菌粗酶提取物对组织有很高的消化效率。
  2. 依赖于激活剂:胶原酶需要依赖二价阳离子(如 Ca2+和锌2+
  3. 受抑制剂影响:胶原酶的抑制剂有EDTA、EGTA等;其次是重金属离子(Hg2+, 铅2+, 光盘2+);还有一些化学药剂如半胱氨酸、组氨酸、DTT、2-巯基乙醇、邻菲咯啉等,对胶原酶也有抑制作用。
  4. 抗干扰性强:胶原蛋白不会受到培养细胞所用血清的影响。

使用注意事项

  1. 使用方法:溶于Hank's、Earle's或其他平衡盐溶液,建议使用浓度为0.05%~0.5%(w/v)
  2. 储藏温度:2-8℃
  3. 使用建议:

(1) 对于胶原蛋白结构和生物合成的研究,通常使用纯度较高的胶原酶制剂,而不使用其他蛋白水解活性物质。

(2)对于组织解离,通常使用粗胶原酶制剂,例如弹性蛋白酶,胰蛋白酶或木瓜蛋白酶。

常问问题

  1. 实验期间消化不良

(1)若因酶活弱或钙离子不足引起,胶原酶应保存在低温干燥条件下,胶原酶溶液分装后应冷冻保存

(2)如果是钙离子不足引起的,胶原酶溶液中钙离子浓度应为5mM

  1. 使用过程中发生细胞死亡

(1)若蛋白酶过量,应减少蛋白酶接触时间或加入白蛋白或灭活血清

(2)如果 pH 值发生变化,应使用缓冲液(例如 HBSS);经常检查并重新调整 pH 值

(3)若氧气过少,应使用无菌空气对消化液进行通气

  1. 实验过程中细胞受损

如果是蛋白酶过多引起,应减少蛋白酶量或加入白蛋白或灭活血清

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目录编号

产品名称

尺寸

40507ES60

胶原酶I

100 毫克,1克

40508ES60

胶原酶 II

100 毫克,1克

40509ES60

胶原酶 III

100 毫克

40510ES60

胶原酶IV

100 毫克,1克

40511ES60

胶原酶V

100 毫克

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目录编号

产品名称

尺寸

40123ES60

PerfCel™l 胰蛋白酶-EDTA(0.25%),酚红

100 毫升

40124ES60

PerfCell™ 胰蛋白酶-不含 EDTA (0.25%、不含酚红

100 毫升

40126ES60

PerfCell™ 胰蛋白酶 (0.25%)、酚红

100 毫升

40127ES60

PerfCell™ 胰蛋白酶-EDTA(0.25%)、酚红

100 毫升

40101ES25

胰蛋白酶1:250(粉末)

25 克

40512ES10/60

PerfCell™重组胰蛋白酶(粉末)

10 毫克/100 毫克

20416ES60

重组胰蛋白酶(MS-SAFE)

100 微克

40134ES60

PerfCell Tryzyme™Express

100 毫升

40135ES60

PerfCell Tryzyme™Express

100 毫升

40506ES60

艾库特

100 毫升

40104ES60/80

分散酶Ⅱ

100毫克/1克

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