支原体检测、预防和去除-一步到位!

支原体

支原体又称支原体,是迄今为止发现的最小最简单的原核生物,直径为0.1至0.3μm,能通过滤膜,形态多形性强,呈球形、杆状、丝状、分枝状等多种形态。在实验室和生物制药生产中,细胞培养物易发生支原体污染。据文献报道,储存细胞株中支原体污染发生率约为15%-35%,在生物制药行业中则为0.44%-6.70% [1]

Figure 1: Morphology of Mycoplasma

图1:支原体的形态

支原体污染的影响

细菌和真菌污染相对容易检测、预防和去除,但支原体污染很难被发现。即使生长密度高达 10^7-10^9 CFU/ml,也可能没有明显的污染迹象(例如浑浊度或 pH 值变化)。支原体污染可导致细胞发生各种变化(见图 2)。

Figure 2: Changes in Cell States After Mycoplasma Contamination

图2:支原体污染后细胞状态的变化

支原体检测的应用场景

Application Scenarios for Mycoplasma Detection

支原体污染的典型来源

  • 细胞间交叉污染;
  • 工作环境或实验设备受到污染;
  • 实验者无菌技术差;
  • 培养基或其他试剂受到污染;
  • 用于细胞制备的原始组织或器官受到污染。

细胞培养遭遇支原体污染时该怎么办

Figure 3: Total Solution for Mycoplasma Contamination

图 3:支原体污染的全面解决方案

细胞支原体污染的三效解决方案

1. 支原体检测

一步恒温支原体检测:

Yeasen一步式恒温支原体检测试剂采用独特的恒温扩增技术,颜色辨别能力更强,从蓝紫色(阴性)到天蓝色(阳性),更容易目测识别。它含有抗污染成分,可消除假阳性。

Figure 4: Operation Process of One-Step Mycoplasma Detection

图4:一步法支原体检测操作流程

基于PCR的支原体检测:

Yeasen公司的PCR支原体检测方法与传统的一步法PCR不同,采用三对引物代替一对引物,针对支原体的16S和23S保守区进行嵌套PCR扩增,大大提高了灵敏度,同时降低了非特异性,可检测出低至单拷贝的支原体。

 Figure 5: Gel Electrophoresis Image of PCR Amplification of Samples with Different Mycoplasma Concentrations

图5:不同支原体浓度样本PCR扩增凝胶电泳图

 Figure 6: Gel Electrophoresis Image of PCR Amplification of Samples with Different Mycoplasma Concentrations

图6 不同支原体浓度样本PCR扩增凝胶电泳图

表 1:可检测的支原体类型 Yeasen一步法恒温支原体检测试剂

ypes of Mycoplasma Detectable by Yeasen’s One-Step Isothermal Mycoplasma Detection Reagent

注:蓝色部分表示可通过一步等温检测和 PCR 方法检测到的支原体类型。

2. MycAway支原体消除试剂(1000×)

MycAway 支原体清除剂(1000×)是一种混合配方,通过抑制支原体生长所需的 DNA 和必需蛋白质合成,有效清除支原体,而不会伤害细胞。它最大限度地挽救了您的细胞,并减少了因支原体污染造成的损失。

Figure 6: Demonstration of Cell Elimination Effect

图7:细胞消除效果演示

支原体消除试剂特点:

  • 低毒性: 细胞毒性极小,不影响后续细胞实验 例如细胞活力测试和转染;
  • 高稳定性:可在-20°C下长期保存,同时保持功效;
  • 便于使用:只需将产品加入到被支原体污染的培养基中,进行孵育即可;
  • 快速作用:最快3天即可看到效果;
  • 广谱: 对大多数实验室支原体类型有效。

图8 支原体消除试剂细胞毒性试验图

3. 支原体的预防

Mycoplasma Prevention

产品 信息

类别

产品名称

货号

规格

检测

MycAway™ -Color 一步法支原体检测试剂盒 热门

40612ES25/60

25/100吨

MycAway™ 支原体实时 qPCR 检测试剂盒 热门

40618ES25/60

25/100吨

GMyc-PCR支原体检测试剂盒

40601ES10/20

10/20 次检测

移动

MycAway™ 喷雾 (即用型)

40605ES02/03

1/2×500毫升

MycAway™ 治疗 (1000×)-支原体消除试剂

40607ES03/08

1/5×1毫升

预防

MycAway™预防性(2000×)-支原体预防试剂

40608ES03/08

1/5×1毫升

MycGuard™ -1 溶液 (100×)

40609ES60

100 毫升

MycGuard™-2 溶液 (500×)

40610ES60

100 毫升

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