非洲猪瘟病毒 - 总主混合物/直接扩增 qPCR 解决方案
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染家猪或野猪引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,发病率和死亡率可达100%,严重危害全球养猪业,造成难以估量的经济损失,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的动物疫病。
目前,非洲猪瘟尚无疫苗和有效治疗方法。通过实验室诊断方法快速准确地诊断非洲猪瘟对于防止疾病的传播至关重要。OIE建议将qPCR作为ASF常规诊断的主要工具。
图 1.
解决方案 I:TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus)(询问)
产品特性
👍UDG防污染系统,有效防范气溶胶污染风险
👍预混PCR溶液(master mix+引物+探针)在室温下长期稳定,大大简化了检测难度
👍扩增效率高、重复性好
👍适用于多平台、多系统
案例展示
👉预混PCR溶液的长期稳定性
使用Cat#13171配置可37℃放置7天的预混PCR溶液,在ASF质粒体系扩增中反复冻融15次,结果显示PCR溶液37℃放置7天后Ct值及灵敏度无明显变化,反复冻融15次后Ct值无明显变化。
图 2. Cat#13171 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(查询)用于ASF质粒体系扩增预混PCR液,具有长期稳定性。2A-37℃0天和7天的Ct值2B-37℃0天和7天的灵敏度2C-15次冻融后的稳定性
👉稳定且可重复的试剂
选取4个不同批次的Cat#13171进行20次ASFV质粒系统扩增实验,Ct值无明显差异,CV均小于1%。
图 3.重复性测试
👉多平台多系统适用
图 4. Bio-Rad CFX96 实时 PCR 系统
图 5. ABI Q5 实时 PCR 系统
图 6. Slan 实时 PCR 系统
解决方案二:通用 TaqMan 多重 qPCR 预混液
产品特性
👍对血液杂质耐受性强,可与
👍超高灵敏度达3份/反应,大大提高检测准确率
👍预混PCR溶液(Master Mix+引物+探针)在室温下长期稳定,大大简化了检测难度
案例展示
👉对血液杂质耐受性强
与其他品牌的同类产品相比,
图 7. Cat#11211 通用 TaqMan 多重 qPCR 预混液 和不同品牌的主混合物用于 ASF qPCR 溶液,分别补充 3 mM EDTA(3A)、6 mM 柠檬酸钠(3B)、0.5% 血液(3C)。
👉超高灵敏度,每次反应可达 3 份
对不同品牌产品进行20次重复的ASFV质粒扩增实验,结果表明,ASFV质粒的检出率
图8. 不同品牌同类产品检测率对比(最终系统中有3份拷贝)
👉长期稳定性,常温下可稳定7天
ASFV/ACT双质粒系统PCR液在4℃、25℃、37℃条件下放置7天后仍能保持稳定性能,可见Ct值和荧光值均无明显变化。
图9. PCR溶液的稳定性
解决方案三: 等温扩增
产品特性
👍扩增效率高
👍高产量扩增
👍dUTP 耐受性,可与 Cat#10303 尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDG/UNG) 结合使用(查询),热不稳定,1 U/μL,以防止气溶胶污染的风险
案例展示
👉进口品牌 N* 产品的更优质替代品
扩增过程使用来自
图10. 不同品牌的扩增曲线
订购产品
类别 | 产品描述 | 产品名称 | 库存单位 |
萃取 | 磁珠提取 | 核酸释放试剂V2(查询) | 13720ES |
qPCR 混合物 | 预混料稳定 | Hieff Unicon™ TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)(查询) | 13171ES |
高灵敏度 | 11211ES | ||
酶及抗体 | 塔克 | Hieff UNICON™ HotStart Direct Taq DNA 聚合酶(查询) | 10717ES |
Taq抗体 | 31303ES | ||
布施 | 14402ES | ||
Hieff™ Bst Plus DNA 聚合酶(2000 U/μL)(查询) | 14403ES | ||
联合发展集团 | 尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG),不耐热(查询) | 10303ES |