有效降低时间，通过最新升级到OnePot mRNA转录过程确保质量！

近年来，mRNA技术的开发与应用持续受到关注。mRNA药物是将编码抗原蛋白的mRNA接种于人体，利用人体细胞内的遗传物质，表达合成抗原蛋白，通过抗原蛋白诱导和激活人体免疫系统，达到预防和治疗疾病的目的。mRNA药物具有安全、高效、周期短等优势，可同时诱导体液免疫和细胞免疫，已应用于肿瘤、传染病、罕见病、心血管疾病等多种疾病。

mRNA药物开发的整个过程大致可以分为几个步骤：

序列测定与设计—mRNA体外转录—包封制备

这 传统的 mRNA体外转录（IVT）的步骤包括：

质粒 DNA 提取和线性化—质粒 DNA 纯化—体外转录（共转录加帽）—纯化—mRNA原液

这 一锅 mRNA体外转录（IVT）过程包括：

质粒 DNA 提取和线性化—体外转录（共转录加帽）—纯化—mRNA 原液

目前，大多数现有工艺均在酶切后、IVT 步骤之前对质粒 DNA 进行单一纯化步骤。 Yeasen 生物科技依托成熟的mRNA应用开发中心，研发出“Onepot mRNA Transcription”工艺，该工艺中环状质粒DNA不经酶切纯化，直接用于体外转录，得到高品质的mRNA原液，整个工艺在保证产品和工艺质量的同时，缩短了现有工艺的工时。

工艺优势：

1. 流程优化，减少IVT步骤，操作更简单。
2. 材料成本更低，无需裂解后纯化和质量检验。
3. 保持 mRNA 的质量和产量。

数据：

1. 收益和 正直：

使用 1μg线性化的2K、4K和9K质粒，一锅法可以产生150-200μg的mRNA。

长度	收益	正直
2K	200 微克	94.00%
4K	185 微克	92.20%
9千	150 微克	87.50%

采用毛细管电泳（CE）对2K、4K、9K长度的片段进行完整性检测，2K、4K片段的完整性>92%，9K片段的完整性>87%。

2. mRNA 加帽效率检测

采用LC-MS评估2K序列的封端效率，结果显示封端效率为99.5%。

上图：HPLC UV 色谱图

下面的图片：解卷积分子量谱

3. mRNA多聚腺苷酸化效率检测

采用LC-MS检测样品的聚腺苷酸化效率，结果呈正态分布。

上图：液相色谱TIC色谱图

下面的图片：解卷积分子量谱

4.mRNA表达 测定

使用合成的 mRNA 产物转染 293T 细胞 传统的 过程 （左，线性化质粒 瓦纯化） 而一锅法（右，未经纯化的线性化质粒）在培养 24 小时后荧光蛋白表达没有差异。

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