NGS文库定量的本质是核酸（DNA或RNA）的定量，准确的NGS文库定量分析对于获得高质量的测序数据至关重要。如果NGS文库定量浓度较高，可能因聚类不充分而导致测序数据产量较低，而定量浓度较低则可能造成簇间信号干扰而产生低质量数据，甚至导致测序失败。另外，随着测序仪测序通量的增加，往往会将多个NGS文库联合进行测序，根据测序数据大小的要求，在定量结果的基础上混合相应摩尔量的NGS文库，以稳定每个样本数据大小的输出。因此，准确的NGS文库定量对于文库的定量至关重要。

目前NGS文库定量主要有两种方法，紫外吸收法、荧光染料法。NanoDrop是基于紫外吸收原理设计的DNA定量仪；Qubit是根据荧光染料原理开发的DNA定量仪。这两种方法定量精度和成本都不一样。这里主要推荐Qubit法。那么我们为什么要向大家推荐Qubit呢？Qubit提供的产品有什么特点呢？ Yeasen?请继续阅读...

1.我们为什么向您推荐Qubit？

2. Qubit 提供的产品有哪些特点 Yeasen？

• Qubit 如何工作？
• 热门产品由 Yeasen
• 产品特性

3. 针对不同的样本，如何选择Qubit？

1.我们为什么向您推荐Qubit？

毫无疑问，Qubit 优于 Nanodrop。那么为什么 qubit 优于 nanodrop 呢？qubit 和 nanodrop 有什么区别呢？首先，如前所述，它们在 DNA 定量的原理上有所不同，NanoDrop 是基于紫外吸收设计的。紫外吸收法的原理是核酸成分中存在嘌呤和嘧啶碱基，这些碱基具有共轭双键，在紫外区 250-280nm 处有较强的光吸收，最大吸收值在 260nm 左右。因此，可以利用核酸的紫外吸收进行浓度定量。NanoDrop 操作简便快捷，但无法区分 DNA、RNA、降解核酸、游离核苷酸等杂质，不适合获得准确的文库定量数据。而对于准确的 NGS 文库定量，尤其是 DNA 定量，Qubit 定量是最佳选择。那么 qubit DNA 定量有哪些特点呢？请查看下表：

2. Qubit 提供的产品有哪些特点 Yeasen？

在介绍Qubit产品的特点之前 Yeasen，让我们了解一下它是如何工作的。

2.1 Qubit 如何工作？

Qubit的原理是利用荧光染料与DNA分子结合后发出荧光，然后测量荧光强度来得到核酸的浓度。荧光染料只有与DNA双链结合后才会发出荧光，产生的荧光与DNA浓度成正比。

2.2 热门产品由 Yeasen

这 1×dsDNA HS Assay Kit for Qubit®（货号：12642ES），基于 dsDNA HS Assay Kit for Qubit® kit (Cat#: 12640ES)，是即用的Qubit预混液，将原装试剂盒中的浓缩染料预先稀释成工作液，操作时只需将工作液与待测样本混合即可通过Qubit®荧光计测定样本浓度，使用更加便捷。

2.3 产品特点

简便易操作：即取即用的预混液，无需配制工作液，操作简单、定量更省时；

图 1. Qubit dsDNA HS 检测试剂盒流程

超高灵敏度：64倍梯度稀释精确定量，0.2-100 ng dsDNA具有良好的线性关系；

超强特异性：特异性检测dsDNA，对一些常规污染物有极好的耐受性；

染料结合速度快：2分钟内即可达到饱和，无需等待即可快速读取准确的定量结果；

稳定性高：荧光信号可持续3h，室温下放置20天后定量准确性不受影响。

图1. 产品稳定性试验。结果表明其 室温下放置2周后稳定（测量值与理论值偏差<10%）

注：选取两种浓度的dsDNA，Thermo#Q33230 4℃保存， Yeasen#12642 储存于 4℃， Yeasen使用保存于室温（约25℃）的#12642测定不同时刻的浓度值，计算每次测量与第一次测量的偏差率（记为0d）。

图2. 产品稳定性测试。稳定性超强，有效期内测试结果相关性高

3. 针对不同的样本，如何选择Qubit？

Qubit，快速定量！使用Qubit进行文库定量有很多优势。其检测过程快速有效。单个样本数秒内即可得到测序结果并直接输出浓度，十分直观；同时还可兼容大部分酶标仪进行批量样本定量，是常规文库定量、dsDNA定量的首选。