血管新生與傷口癒合、發炎、類風濕性關節炎、糖尿病視網膜病變、黃斑部病變和腫瘤生長有密切關係。在生物體的生長過程中,血管新生是新組織生長的重要部分。在成年期,除了特殊器官中受到嚴格調控的週期性事件外,由於促血管生成和抗血管生成的內源性因素之間的平衡,幾乎每種正常組織都缺乏大量的生理性血管生成。當這種平衡朝著促進血管生成的方向被打破時,微血管內皮細胞(EC)就會轉變為血管生成表型,從而啟動血管生成反應,這種反應可以被消除或加速。

研究中,傳統的體內血管生成實驗方法包括角膜微袋、腸系膜、海綿/基質植入、視盤分析(DAS)、斑馬魚等,但這些實驗不僅技術要求高、費用高、耗時長,還涉及倫理問題。與體內血管生成實驗相比,利用特殊基質在體外維持細胞血管生成更經濟實用。最常用的細胞生長維持基質是從EHS小鼠腫瘤中萃取的可溶性基底膜製劑-基質凝膠。

基質凝膠主要成分為層黏連蛋白、IV型膠原蛋白、硫酸肝素蛋白聚醣(HSPG)、巢蛋白,也含有TGF-β、EGF、IGF、FGF、組織型纖溶酶原活化劑等生長因子以及EHS腫瘤中所含的其他生長因子。它為組織和細胞提供支撐、抗拉強度和支架支持,也可作為細胞黏附和運動的三維亞結構,以及生長因子、趨化因子和細胞因子的儲存器。它也可以作為細胞形態發生和分化的信號。 Yeasen 開發並生產了Ceturegel商標 基質凝膠,不含LDEV(乳酸脫氫酶升高病毒),內毒素含量超低,並經過支原體檢測,確保無支原體污染。它包括不同類型的基質凝膠,如基礎濃度、高濃度和低生長因子。

產品特性

安全性高: 不含 LDEV(乳酸脫氫酶增強病毒)

濃度多功能性: 濃度範圍8~20 mg/mL

良好的批次穩定性: 嚴格的生產和品質控制流程,確保批次間性能穩定

低內毒素: 內毒素含量≤4EU/mL

污染物檢測:未檢測到支原體、細菌和真菌殘留。

血管新生實驗

  • 基質凝膠製備

1) 實驗前一天,取出 Ceturegel商標 將基質凝膠從冰箱取出,放入 4°C 冰箱過夜融化,並預冷所用的耗材。

2) 將 Ceturegel商標 實驗前始終將基質凝膠放在冰盒中。

3) 打開血管生成玻片的滅菌包裝並取出玻片。

4) 加入 10 μl Ceturegel商標 將 Matrix Gel 加入每個孔中,注意在添加 Ceturegel 時槍尖應垂直於內孔頂部商標 基質凝膠,以防止任何基質凝膠流過上孔並留下殘留凝膠。

  • 凝膠

1) 首先,將載玻片蓋上蓋子,準備一個 10 公分的培養皿,在其中放置浸有水的紙巾,形成濕盒。

2) 將玻片放入培養皿並蓋上蓋子。

3) 將整顆培養皿放入 CO2 在培養器中靜置約30分鐘,等待凝膠凝結,同時製備細胞懸浮液。

  • 細胞擴散

1) 將消化後的細胞製成密度為2×105 細胞/毫升並混勻。

2) 取出含有已凝固成凝膠的血管的血管玻片。

3) 每孔加入50μl細胞懸浮液,注意保持槍尖垂直於上孔頂部,不要接觸下孔的凝膠。

4) 加入細胞培養基,蓋上靜置,一段時間後,所有細胞都會下沉並落在基質膠表面。

  • 影像擷取

根據細胞生長速度定期觀察、拍照並保存影像。

  • 結果展示

筆記血管生成和螢光結果

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項號

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