巨噬細胞簡介
巨噬細胞的發現可以追溯到1882年,當時生物學家艾利‧梅契尼科夫在研究缺乏適應性免疫機制的原始動物時發現了它們,並將這些細胞稱為吞噬細胞。巨噬細胞是一類異質性免疫細胞,具有高度可塑性和多種功能,包括體內組織發育和體內平衡、清除細胞碎片、消除病原體和調節發炎反應。不同的誘導訊號可以活化巨噬細胞,改變其自身的形態和生理特性。

圖 1 巨噬細胞起源
借用輔助性T細胞(Th)的概念,巨噬細胞活化狀態通常在活化方式方面簡化為兩類:經典活化的巨噬細胞CAM和替代活化的巨噬細胞AAM。 M1巨噬細胞產生促發炎細胞因子,抵抗病原體入侵,但也會造成身體損傷; M2巨噬細胞分泌抗發炎細胞因子,在組織修復重建和腫瘤形成中發揮作用。

圖2 巨噬細胞的不同表型、細胞表面標誌與功能
值得注意的是,兩種巨噬細胞表型並不是絕對拮抗分化的,即M1與M2表型並不互相排斥,而是經常共存,因此不能簡單地被認為是完全不同的巨噬細胞群體。巨噬細胞極化標誌通常在不同表型的巨噬細胞上有不同的表達水平,並且不同表型的巨噬細胞在一定條件下可以發生相互轉化。在體內傷口癒合過程中,巨噬細胞在早期表現出促發炎的M1型分泌譜,具有較高的抗原呈現能力,並產生白血球介素IL-12和IL-23,從而抑制細胞增殖、造成組織損傷;而在後期癒合階段,巨噬細胞轉變為抗炎的M2型基因表現譜,透過產生血管生成介質,如同GFTGF-β.消退和傷口癒合。

圖 3 巨噬細胞活化表型在組織修復、再生和纖維化的主要機制
體內研究
巨噬細胞是身體每個器官中唯一存在的細胞,存在於表皮、角膜和沒有血管的關節內部,研究其體內生物學最重要的方法之一是巨噬細胞耗竭。體內巨噬細胞耗竭是使用物理化學或基因技術去除巨噬細胞的方法。此方法目前被廣泛應用於研究巨噬細胞在動物疾病模型中的作用,以及研究免疫病理或發炎損傷的機制,如發炎性疾病:過敏性氣喘、糖尿病、肥胖、動脈粥狀硬化、自體免疫疾病的相關研究;及其他疾病領域:腫瘤、病毒相關疾病、組織再生及其他相關研究。氯膦酸鹽脂質體法是目前最常使用的巨噬細胞耗竭方法。
氯膦酸鹽脂質體
自從Nico van Rooijen教授成功研製出氯膦酸鹽脂質體體內外細胞清除劑,利用巨噬細胞的內吞機制,將氯膦酸鹽帶入細胞內,在細胞內釋放出氯磷酸,當達到一定濃度時可引發巨噬細胞凋亡,從而達到清除巨噬細胞的目的。該試劑已被廣泛應用,是目前國際上最成熟、最方便的巨噬細胞清除工具。
圖4 巨噬細胞清除原理示意圖
不同組織的做法(僅供參考)
器官/巨噬細胞 | 劑量(20-25g/只) |
脾臟/紅髓巨噬細胞 | 單劑量:200 µl/小鼠(IV 或 IP)。 |
肝臟/Kuffer 細胞 | 單劑量:200 µl/小鼠(IV 或 IP)。 |
肺/肺泡巨噬細胞 | 靜脈注射(150-200 µl)與氣管內或鼻腔內注射(50 µl)結合可獲得最佳效果。 |
淋巴結 | 注射(100-200 µl)/小鼠,特定給藥方案可參考文獻。 |
大腦/小膠質細胞 | 腦室內進入腦脊髓液,10 µl/小鼠,50 µl/大鼠。 |
血液/單核細胞 | 150-200 µl/小鼠(IV),24 小時內達到最大消耗率,但 1-7 天內的最大消耗率取決於菌株。 |
產品推薦
產品名稱 | 產品編號 | 規格 |
40337ES08 | 5 毫升 | |
40337ES10 | 10 毫升 | |
40338ES08 | 5 毫升 | |
40338ES10 | 10 毫升 |