巨噬細胞是免疫系統中的重要細胞,在組織中發揮多種作用,包括病原體清除、組織修復和免疫調節。在某些病理條件下,例如慢性發炎、自體免疫疾病或腫瘤發展,巨噬細胞的異常活化或功能障礙可能會對生物體產生不利影響。氯膦酸鹽脂質體是目前最成熟、最方便、最經濟的巨噬細胞清除工具,可以有效清除動物多種組織和部位的巨噬細胞,包括肝臟、脾臟、肺臟、血液等,是目前應用最廣泛的巨噬細胞清除方法。

不同組織的做法(僅供參考)

器官/巨噬細胞

劑量(20-25g/只)

脾臟/紅髓巨噬細胞

單劑量:200 µl/小鼠(IV 或 IP)。
長期消耗:首次劑量為 200 µl/隻小鼠,然後每隔 2 - 3 天再給 200 µl/隻小鼠

肝臟/Kuffer 細胞

單劑量:200 µl/小鼠(IV 或 IP)。
長期消耗:首次劑量為 200 µl/隻小鼠,然後每隔 2 - 3 天再給 200 µl/隻小鼠

肺/肺泡巨噬細胞

靜脈注射(150-200 µl)與氣管內或鼻腔內注射(50 µl)結合可獲得最佳效果。

淋巴結

注射(100-200 µl)/小鼠,特定給藥方案可參考文獻。

大腦/小膠質細胞

腦室內進入腦脊髓液,10 µl/小鼠,50 µl/大鼠。

血液/單核細胞

150-200 µl/小鼠(IV),24 小時內達到最大消耗率,但 1-7 天內的最大消耗率取決於菌株。

常問問題

問題 1:接受氯膦酸鹽脂質體治療後我該做什麼?

答:收到氯膦酸鹽脂質體後,如不能立即使用,需放置於4℃冰箱。禁止冷凍!用作原液,不允許稀釋。脂質體易發生沉澱,因此建議使用前先輕輕混合。另外,4℃氯磷酸脂質體無法立即使用,需恢復至室溫後再注射。

問題 2:如何從小瓶轉移脂質體?

答:從小瓶中轉移脂質體的最佳方法是使用無菌針頭注射器。這樣,小瓶中剩餘的脂質體懸浮液將保持密封和清潔。您也可以使用帶有無菌尖頭的移液器進行轉移,但最好在乾淨的環境中進行,例如在 BSC 罩內。

Q3:氯膦酸鹽脂質體可以用於體外巨噬細胞清除嗎?

答:本產品可用於體外巨噬細胞清除實驗,但此方法較適合體內實驗。主要原因是在體外培養過程中,死細胞釋放的氯磷酸或從脂質體中「漏出」的氯磷酸殘留在培養基中,但在體內,氯磷酸的半衰期很短,很快就會被腎臟清除。雖然遊離的氯磷酸不會進入細胞或脂質體,但一旦在培養基中積累,就會慢慢進入細胞。

問題4:動物靜脈注射氯膦酸鹽脂質體後很快死亡的原因是什麼?

答:一方面,有可能為動物注射了不均勻的脂質體懸浮液。建議使用前輕輕搖晃混合。脂質體在體外放置一段時間後就會沉澱。如果在較長時間內一次要給多隻動物注射,脂質體將會在註射器中沉澱並形成不均勻的懸浮液,使得第一次注射的測量結果與最後一次注射的測量結果會有顯著差異。另一方面,脂質體可能剛從冰箱中取出,尚未恢復到室溫。

Q5:注射氯膦酸鹽脂質體後多少天動物死亡?

答:這可能是由於細菌污染造成的。從體內去除巨噬細胞會增加病毒顆粒、細菌或酵母菌等感染的機會。

Q6:氯膦酸鹽脂質體沒有達到預期的效果?

答:氯膦酸鹽脂質體是大量生產的,每批都要經過氯膦酸鹽濃度以及多種可能的污染物的測試,以確保在出售給客戶之前濃度正確。此外,脂質體易受到極端溫度的影響。正確的運輸和儲存方式是4~8℃。懸浮液不應冷凍或加熱至 30°C 以上。自收到貨日起需在3個月內使用完,否則可能影響使用效果。

Q7:靜脈注射時,可以增加註射量嗎?

答:靜脈注射應依動物體重,且不超過0.1mL/10mg,但腹腔注射可適當增加註射量。皮下注射需根據注射部位的體積來決定。

Q8:使用脂質體時應注意什麼?

答:由具有飽和烴鏈的脂質製成的脂質體其實強度很高,但應注意以下幾點。

①請勿與有機溶劑混合,如氯仿、甲醇、乙醇、DMSO、乙醚等。

② 除非必須裂解脂質體,否則不要添加界面活性劑。

③ 不要加熱至接近或高於脂質的主要相變溫度,除非進行藥物負載,這需要在相變溫度以上進行孵育。

產品推薦

產品名稱

產品編號

規格

氯膦酸鹽脂質體(來自阿姆斯特丹自由大學)

40337ES08

5 毫升

40337ES10

10 毫升

對照脂質體(PBS)

40338ES08

5 毫升

40338ES10

10 毫升

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